一种兽用三分类血细胞分析试剂及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种兽用三分类血细胞分析试剂，包括稀释液、溶血剂和清洗液，所述稀释液的成分为抗凝剂、渗透压调节剂、分散剂、缓冲液A、pH值调节剂A和纯水；所述溶血剂的成分为缓冲液B、季铵盐、防腐剂、电导率调节剂和纯水，所述防腐剂为甲醛；所述清洗液的成分为无机盐、表面活性剂、碱性蛋白酶、pH值调节剂B和纯水。稀释液中添加了分散剂，有利于细胞形态的保持和分散，便于分类计数；溶血剂中添加了甲醛防腐剂，有利于血红蛋白的稳定，便于提高血红蛋白的测试精度；清洗液中添加了碱性蛋白酶，可以更好地溶解和清洗液路系统残留的污渍和血渍，有效减少堵孔现象的发生，提高循环测试精度。度。

【技术实现步骤摘要】
一种兽用三分类血细胞分析试剂及其制备方法


[0001]本专利技术涉及一种医疗诊断仪器用试剂，具体涉及一种兽用三分类血细胞分析试剂及其制备方法。

技术介绍

[0002]兽用血细胞分析在畜牧业的研究、养殖，宠物疾病的预防、治疗以及兽用实验研究方面，有很重要的价值，对兽用各种疾病的诊断是必不可少的。对红细胞及血红蛋白的检查，能查清贫血的病因；检测兽用的血小板数量能诊断出血性疾病。对白细胞总数及分类的检测能推断细菌性或病毒性炎症，也可诊断寄生虫感染性疾病和皮肤病。在我国，随着科学技术进步和社会经济条件的发展，兽用血细胞分析的应用越来越普遍。
[0003]目前，在我国对人血细胞的分析技术已经很成熟，特别是白细胞从三分类发展到五分类，完全实现了自动化，对血红蛋白的检测从含氰化物到无氰的试剂。但是，对兽用血细胞的自动化分析研究甚少，国内的血细胞分析仪生产厂家把人的血细胞分析仪及试剂直接应用到兽用血细胞分析上，这是很不科学的。在光学显微镜下观察，人和兽用之间的血细胞形态结构、大小差别很大，而且，不同种群的兽用之间也有很大的差别，因此，不能把人的血细胞分析仪和相应的试剂，直接应用到兽用血细胞分析上来，这样，就造成分析很不准确。

技术实现思路

[0004]本专利技术要解决的技术问题是如何满足兽用血细胞分析的精度的问题，提供了一种兽用三分类血细胞分析试剂及其制备方法。
[0005]为实现上述目的，本申请提供了一种兽用三分类血细胞分析试剂，包括稀释液、溶血剂和清洗液，所述稀释液的成分为抗凝剂、渗透压调节剂、分散剂、缓冲液A、pH值调节剂A和纯水；所述溶血剂的成分为缓冲液B、季铵盐、防腐剂、电导率调节剂和纯水，所述防腐剂为甲醛；所述清洗液的成分为无机盐、表面活性剂、碱性蛋白酶、pH值调节剂B和纯水。
[0006]作为本申请的进一步改进，所述甲醛的质量百分含量为0.1％～0.5％；所述溶血剂的电导率为11.0ms/cm～12.0ms/cm。
[0007]作为本申请的进一步改进，所述稀释液中：所述抗凝剂为乙二胺四乙酸二钠，所述渗透压调节剂为氯化钠、氯化钾中的至少一种，所述分散剂为聚乙二醇400、甘油中的至少一种，所述缓冲液A为磷酸盐、硼酸盐、乙醇胺中的任意一种，所述pH值调节剂A为柠檬酸；所述溶血剂中：所述缓冲液B为硼砂、硼酸中的至少一种，所述电导率调节剂为硫酸钠，所述季铵盐为十二烷基三甲基氯化铵、十二烷基三甲基溴化铵、十四烷基三甲基氯化铵、十四烷基三甲基溴化铵中的任意一种；所述清洗液中：所述无机盐为氯化钠、氯化钾中的至少一种，所述表面活性剂为月桂醇聚氧乙烯醚，所述pH值调节剂B为乙醇胺。
[0008]作为本申请的进一步改进，所述分散剂为聚乙二醇400和甘油的组合，所述聚乙二醇400和甘油的组合分散剂的质量百分含量为0.2％～5％。
[0009]作为本申请的进一步改进，所述聚乙二醇400和甘油的组合分散剂中所述聚乙二醇400和所述甘油的质量比为1:7～1:30。
[0010]作为本申请的进一步改进，所述聚乙二醇400和甘油的组合分散剂中所述聚乙二醇400和所述甘油的质量比为1:15。
[0011]作为本申请的进一步改进，所述月桂醇聚氧乙烯醚和所述碱性蛋白酶的质量比为1:1～4:1。
[0012]作为本申请的进一步改进，所述季铵盐为十二烷基三甲基氯化铵，所述十二烷基三甲基氯化铵的质量百分含量为0.5％～5％。
[0013]为实现上述目的，本申请还提供了一种兽用三分类血细胞分析试剂的制备方法，如下：稀释液的制备步骤：依次将抗凝剂、渗透压调节剂、分散剂、缓冲液A、pH值调节剂A充分溶解到少量纯水中，混合均匀，定容，得到稀释液；溶血剂的制备步骤：依次将缓冲液B、季铵盐、防腐剂、电导率调节剂充分溶解到少量纯水中，混合均匀，定容，得到溶血剂；清洗液的制备步骤：依次将无机盐、表面活性剂、碱性蛋白酶、pH值调节剂B充分溶解到少量纯水中，混合均匀，定容，得到清洗液。
[0014]作为本申请的进一步改进，应用0.22μm的聚丙烯膜对所述稀释液、所述溶血剂和所述清洗液进行过滤。
[0015]本专利技术的有益效果在于，本申请提供了一种兽用三分类血细胞分析试剂，包括稀释液、溶血剂和清洗液，所述稀释液的成分为抗凝剂、渗透压调节剂、分散剂、缓冲液A、pH值调节剂A和纯水；所述溶血剂的成分为缓冲液B、季铵盐、防腐剂、电导率调节剂和纯水，所述防腐剂为甲醛；所述清洗液的成分为无机盐、表面活性剂、碱性蛋白酶、pH值调节剂B和纯水。稀释液中添加分散剂的作用是有利于细胞形态的保持和分散，便于分类计数；在所述溶血剂中添加甲醛防腐剂，不仅具有防腐功能，还有利于血红蛋白的稳定，有助于兽用血细胞的分类和血红蛋白的测试；所述的清洗液中添加了碱性蛋白酶，该碱性蛋白酶与表面活性剂的组合可以更好地溶解和清洗液路系统残留的污渍和血渍，有效减少堵孔现象的发生，提高循环测试精度。
具体实施方式
[0016]为使本申请的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本申请具体实施例对本申请技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
[0017]为了更精确的分析兽用血细胞，本申请提供了一种兽用三分类血细胞分析试剂，包括稀释液、溶血剂和清洗液，所述稀释液的成分为抗凝剂、渗透压调节剂、分散剂、缓冲液A、pH值调节剂A和纯水，所述稀释液的pH值范围控制在6～8之间，所述稀释液的电导率范围设置为18.0ms/cm～21.0ms/cm；所述溶血剂的成分为缓冲液B、季铵盐、防腐剂、电导率调节剂和纯水，所述防腐剂为甲醛；所述清洗液的成分为无机盐、表面活性剂、碱性蛋白酶、pH值调节剂B和纯水。优选的，所述分散剂为聚乙二醇400、甘油中的至少一种。
[0018]本申请的技术方案适用于各种兽类血细胞分析，如猪、狗、羊、猫、犬、猴等，为验证本申请技术方案的有益效果，本申请选取了两组物种兽用血液样本进行了分析，第一组物
种为犬类，第二组物种为猫类，每组物种选取了11例动物血液样本进行分析，研究探索过程中，专利技术人选取了市面上常规的对兽用血细胞分析较稳定的IDEXX三分类血细胞试剂，应用IDEXX三分类血细胞分析仪对上述两组物种兽用血液样本进行了分析测试，测试的细胞种类主要有红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)、白细胞(WBC)、淋巴细胞(LYM)、单核细胞(MONO)、粒细胞(GRAN)，得出了上述两组物种兽用血液样本的实际测量值，数据如表一所示。
[0019]表一：犬类和猫类血液样本的三分类血细胞分析
[0020][0021][0022]本申请中，兽用血细胞计数的关键一方面在于细胞形态的保持和分散，在稀释液中添加分散剂，有利于分散兽用血液中的各种细胞以及维持细胞形态，便于计数。为证明分散剂的有益效果，本申请中针对有无分散剂的稀释液以及含有不本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种兽用三分类血细胞分析试剂，其特征在于，包括稀释液、溶血剂和清洗液，所述稀释液的成分为抗凝剂、渗透压调节剂、分散剂、缓冲液A、pH值调节剂A和纯水；所述溶血剂的成分为缓冲液B、季铵盐、防腐剂、电导率调节剂和纯水，所述防腐剂为甲醛；所述清洗液的成分为无机盐、表面活性剂、碱性蛋白酶、pH值调节剂B和纯水。2.如权利要求1所述的兽用三分类血细胞分析试剂，其特征在于，所述甲醛的质量百分含量为0.1％～0.5％；所述溶血剂的电导率为11.0ms/cm～12.0ms/cm。3.如权利要求1所述的兽用三分类血细胞分析试剂，其特征在于，所述稀释液中：所述抗凝剂为乙二胺四乙酸二钠，所述渗透压调节剂为氯化钠、氯化钾中的至少一种，所述分散剂为聚乙二醇400、甘油中的至少一种，所述缓冲液A为磷酸盐、硼酸盐、乙醇胺中的任意一种，所述pH值调节剂A为柠檬酸；所述溶血剂中：所述缓冲液B为硼砂、硼酸中的至少一种，所述电导率调节剂为硫酸钠，所述季铵盐为十二烷基三甲基氯化铵、十二烷基三甲基溴化铵、十四烷基三甲基氯化铵、十四烷基三甲基溴化铵中的任意一种；所述清洗液中：所述无机盐为氯化钠、氯化钾中的至少一种，所述表面活性剂为月桂醇聚氧乙烯醚，所述pH值调节剂B为乙醇胺。4.如权利要求3所述的兽用三分类血细胞分析试剂，其特征在于，所述分散剂为聚乙二醇400和甘油的组合，所述聚乙二醇400和甘油的组合分散剂的质量百分含量为0.2％～...

【专利技术属性】
技术研发人员：王蓉蓉，钱翀，李婷，
申请(专利权)人：爱若维生物科技苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：