RNF138作为预测结直肠癌对SC75741治疗敏感性的生物标志物的应用制造技术

本发明专利技术公开了RNF138作为预测结直肠癌对SC75741治疗敏感性的生物标志物的应用。本发明专利技术还公开了相关试剂，试剂盒，用于改善结直肠癌患者预后以及提高结直肠癌患者对NF

【技术实现步骤摘要】
RNF138作为预测结直肠癌对SC75741治疗敏感性的生物标志物的应用


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，具体地，涉及RNF138作为预测结直肠癌对SC75741治疗敏感性的生物标志物的应用。

技术介绍

[0002]结直肠癌(Colorectal cancer，CRC)是常见的恶性肿瘤之一，世界卫生组织最新的有关全球癌症状况的数据显示，结直肠癌的死亡率为实体肿瘤的第三位。近年来，随着经济的发展和生活水平的提高，我国发病率的上升速度达到国际平均增速的2倍，在上海等东部沿海城市，发病率达到实体肿瘤的第二位，成为导致人死亡的主要疾病之一。
[0003]结直肠癌的化疗方案也受肿瘤耐药问题的困扰。据美国癌症协会估计，死于不同程度的耐药的肿瘤患者占90％以上，肿瘤的耐药问题已经成为肿瘤化疗成功与否的关键因素。患者的化疗敏感性对于化疗效果具有重要的影响作用。
[0004]肿瘤耐药机制包括低效的细胞药物积累，增加DNA修复，增强抗凋亡途径，并激活抗氧化谷胱甘肽系统进行解毒。最近的研究表明，结直肠癌含有肿瘤干细胞(CSCs)，它是肿瘤化疗耐药的主要参与者。多细胞表面蛋白被认为是肿瘤干细胞的标志物，包括CD44，CD133，Lgr5，EpCAM和ALDH。许多信号通路参与调节CSCs，包括Hedgehog通路，Notch通路，NF-κB通路，PI3K/Akt通路和Wnt/β-catenin通路。
[0005]因此，全面分析其耐药性产生的机制，必将对恶性肿瘤临床化疗和药物耐受逆转的深入研究发挥重要的指导作用。
[0006]为了克服及逆转结直肠癌治疗药物耐受，需要使用准确、灵敏、特异性强的生物标记物辅助尽早判断结直肠癌是否药物耐受及耐受程度，指导临床用药，以提高临床疗效，改善患者预后。

技术实现思路

[0007]根据本专利技术的一个方面，本专利技术提供了检测RNF138表达的试剂和/或检测p-P65表达的试剂在制备预测结直肠癌患者预后的产品中的应用。
[0008]进一步，所述检测p-P65表达的试剂包括检测p-P65在胞浆中表达的试剂、和/或检测p-P65在胞核中表达的试剂。
[0009]所述检测RNF138表达的试剂包括与RNF138基因结合的核酸或与RNF138蛋白结合的物质，所述检测p-P65表达的试剂包括与p-P65基因结合的核酸或与p-P65蛋白结合的物质。
[0010]所述与RNF138基因结合的核酸包括扩增RNF138基因的引物，所述与RNF138蛋白结合的物质包括与RNF138蛋白特异性结合的抗体；所述与p-P65基因结合的核酸包括扩增p-P65基因的引物，所述与p-P65蛋白结合的物质包括与p-P65蛋白特异性结合的抗体。
[0011]根据本专利技术的另一个方面，本专利技术提供了RNF138和/或p-P65在制备改善结直肠癌
患者预后的药物中的应用。
[0012]进一步，所述药物包括促进RNF138表达的试剂和/或抑制p-P65核质比的试剂。
[0013]抑制p-P65核质比的试剂是指抑制p-P65在胞核和胞浆中表达比值的试剂。这样的试剂包括LkB蛋白、吡咯烷二硫代甲酸铵、羟基红花黄色素A。
[0014]促进RNF138表达的试剂的种类不受限制，只要是促进RNF138表达即可，这样的例子如RNF138基因过表达载体。
[0015]根据本专利技术的又一个方面，本专利技术提供了检测RNF138表达的试剂在制备预测结直肠癌患者对NF-κB抑制剂的敏感性的产品中的应用。
[0016]进一步，所述NF-κB抑制剂包括NG25、IKK16、BAY 11-7082、Tomatidine、PTL、JSH-23、sc75741、QNZ、CAPE；优选地，所述NF-κB抑制剂是sc75741。
[0017]更进一步，所述检测样品中RNF138的表达量的试剂包括能够定量样品中RNF138的mRNA的试剂，和/或能够定量样品中RNF138蛋白的试剂。
[0018]本专利技术的定量样品中mRNA的试剂可基于使用核酸分子的已知方法来发挥其功能：如PCR、如Southern杂交、Northern杂交、点杂交、荧光原位杂交(FISH)、DNA微阵列、ASO法、高通量测序平台等。使用该产品可以定性地、定量地、或半定量地实施分析。
[0019]进一步，所述试剂包括与RNF138基因结合的核酸。
[0020]包含在上述试剂中的核酸可以通过化学合成来获得，或通过从生物材料制备含有期望核酸的基因，然后使用设计用于扩增期望核酸的引物扩增它来获得。
[0021]进一步，所述PCR方法为已知方法，例如，ARMS(Amplification Refractory Mutation System，扩增不应突变系统)法、RT-PCR(逆转录酶-PCR)法、嵌套PCR法等等。扩增的核酸可以通过使用点印迹杂交法、表面等离子共振法(SPR法)、PCR-RFLP法、原位RT-PCR法、PCR-SSO(序列特异性寡核苷酸)法、PCR-SSP法、AMPFLP(可扩增片段长度多态性)法、MVR-PCR法、和PCR-SSCP(单链构象多态性)法来检测。
[0022]更进一步，所述核酸包括实时定量PCR中使用的特异扩增RNF138基因的引物。
[0023]引物可以通过化学合成来制备，通过使用本领域技术人员知道的方法参考已知信息来适当地设计，并通过化学合成来制备。
[0024]如本文使用的，术语“引物”是指具有短的游离3
′-
末端羟基的核酸序列，其是短的核酸序列，可以与互补模板形成碱基对并用作模板链复制的起始点。在合适的缓冲液在合适的温度在存在用于聚合的试剂(例如，DNA聚合酶或反转录酶)和四种三磷酸核苷的情况下，引物可以起始DNA合成。PCR条件和有义和反义引物的长度可以根据本领域中已知技术适当选择。
[0025]上面所述的核酸还可包括探针，所述探针可以通过化学合成来制备，通过使用本领域技术人员知道的方法参考已知信息来恰当设计，并通过化学合成来制备，或者可以通过从生物材料制备含有期望核酸序列的基因，并使用设计用于扩增期望核酸序列的引物扩增它来制备。
[0026]在本文使用的术语“基因”指编码功能蛋白质、多肽或者肽的单元。如本领域的技术人员所理解的，这一功能性的术语包括两个基因组序列、cDNA序列或者其片段或组合，以及基因的产物，包括可以经人工改变的那些。经纯化的基因、核酸、蛋白质等等用于指从至少一种通常与其相关的污染核酸或者蛋白质中鉴定并分离出来的这些实体。术语“等位基
因”或者“等位基因形式”指编码同样的功能性蛋白的基因的可选择的形式，但是含有与同一基因的其他形式相关的核苷酸序列上的差异。
[0027]如本文所使用的，“核酸”或者“核酸分子”指多核苷酸，如脱氧核糖核酸(DNA)或者核糖核酸(RNA)、寡核苷酸、由聚合酶链式反应(PCR)所产生的片段以及通过任意的连接、剪切、核酸内切酶和核酸外切酶活动产生的片段本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测RNF138表达的试剂和/或检测p-P65表达的试剂在制备预测结直肠癌患者预后的产品中的应用；优选地，所述检测p-P65表达的试剂包括检测p-P65在胞浆中表达的试剂、和/或检测p-P65在胞核中表达的试剂；更优选地，所述检测RNF138表达的试剂包括与RNF138基因结合的核酸或与RNF138蛋白结合的物质，所述检测p-P65表达的试剂包括与p-P65基因结合的核酸或与p-P65蛋白结合的物质；最优选地，所述与RNF138基因结合的核酸包括扩增RNF138基因的引物，所述与RNF138蛋白结合的物质包括与RNF138蛋白特异性结合的抗体；所述与p-P65基因结合的核酸包括扩增p-P65基因的引物，所述与p-P65蛋白结合的物质包括与p-P65蛋白特异性结合的抗体。2.RNF138和/或p-P65在制备改善结直肠癌患者预后的药物中的应用；优选地，所述药物包括促进RNF138表达的试剂和/或抑制p-P65核质比的试剂。3.检测RNF138表达的试剂在制备预测结直肠癌患者对NF-κB抑制剂的敏感性的产品中的应用；优选地，所述NF-κB抑制剂包括NG25、IKK16、BAY 11-7082、Tomatidine、PTL、JSH-23、sc75741、QNZ、CAPE；更优选地，所述NF-κB抑制剂是sc75741。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述试剂包括与RNF138基因结合的核酸或与RNF138蛋白结合的物质；优选地，所述核酸包括扩增RNF138基因的引物；优选地，所述物质包括与RNF138蛋白特异性结合的抗体。5.RNF138在制备提高结直肠癌患者对NF-κB抑制剂敏感性的药物中的应用；优选地，所述药物包括抑制RNF138表...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋伟，赵宏，刘长征，应建明，黄容，路亚岚，
申请(专利权)人：中国医学科学院基础医学研究所，
类型：发明
国别省市：