慢病毒载体冻存液及其制备方法和应用技术

技术编号:26996519 阅读:37 留言:0更新日期:2021-01-08 15:16
本发明专利技术提供了一种慢病毒载体冻存液,包括以下体积分数的各组分:羟乙基淀粉注射液0.5%‑10%;人血清白蛋白溶液0.5%‑10%;无血清培养基70%‑95%;DMSO 4%‑10%。本发明专利技术的冻存液可以长期、稳定地保存慢病毒载体,在保存过程中慢病毒载体的生物学活性可以得到很好的维持和保护。本发明专利技术还提供了冻存液的制备方法和应用。

【技术实现步骤摘要】
慢病毒载体冻存液及其制备方法和应用
本专利技术涉及慢病毒载体
,特别是涉及一种慢病毒载体冻存液及其制备方法和应用。
技术介绍
慢病毒载体是常用的病毒载体,是CAR-T细胞工程的主要传递载体。然而,由于慢病毒本身的生物学特性导致其生物活性不稳定,因此在载体制备及保存过程中需要严格控制操作方法,以维持载体的结构完整性及生物学活性。与细胞类似,慢病毒载体需要在超低温环境中保存及运输,使用前进行解冻。冻存时间过长或者反复冻融都会使慢病毒载体的生物学活性迅速下降,使其降低甚至失去感染细胞的能力,不能完成目的基因的整合及表达。因此慢病毒载体冻存时一般需要加入保护剂,防止冷冻过程中冰晶等对病毒载体结构造成伤害。目前常用的保护剂一般是胎牛血清、培养基等。胎牛血清作为一种动物来源的物料,可能存在潜在的致病因子,而CAR-T细胞的制备过程中严格控制动物来源成分物料;而在培养基中冻存慢病毒载体,冻存时间较短,一般3个月左右其活性快速降低,不能满足慢病毒载体大规模生产保存要求。因此,需要一种改进的慢病毒载体冻存液,能够在超低温环境下长期稳定地保存本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种慢病毒载体冻存液,包括以下体积分数的各组分:/n

【技术特征摘要】
1.一种慢病毒载体冻存液,包括以下体积分数的各组分:





2.根据权利要求1所述的慢病毒载体冻存液,其中,包括以下体积分数的各组分:





3.根据权利要求1所述的慢病毒载体冻存液,其中,
所述羟乙基淀粉注射液为羟乙基淀粉130/0.4与氯化钠的灭菌水溶液。


4.根据权利要求1所述的慢病毒载体冻存液,其中,
所述人血清白蛋白溶液中含有质量浓度为20%的人血白蛋白。


5.根据权利要求1所述的慢病毒载体冻存液,其中,
所述无血清培养基选自无血清DMEM基础培养基、无血清DMEM/F12培养基、无血清X-VIVO15培养基。


6.一种如权利要求1-5任一所述的慢病毒载体冻存液的制备方法,...

【专利技术属性】
技术研发人员:孙秀莲
申请(专利权)人:宜明苏州细胞生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:江苏;32

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