免疫细胞p16特异性结合的单克隆抗体的试剂盒制造技术

本发明专利技术提供免疫细胞p16特异性结合的单克隆抗体的试剂盒，涉及试剂盒技术领域，试剂盒中包括以下试剂：1ml－1.5ml的免疫细胞p16单克隆抗体，0.3ml－0.5ml的分离液，5ml－8ml的稀释液，20ml－60ml的PSB工作液，20ml－50ml的3％H

【技术实现步骤摘要】
免疫细胞p16特异性结合的单克隆抗体的试剂盒
本专利技术涉及试剂盒
，特别的为免疫细胞p16特异性结合的单克隆抗体的试剂盒。
技术介绍
宫颈癌是妇科最常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一，发病率仅次于乳腺癌，位居女性恶性肿瘤第二位，严重威胁女性的身体健康和生活质量。中国是宫颈癌的高发国家，发生率及死亡率约占全世界的1/3。宫颈癌也是目前唯一病因明确，原位癌高发年龄为30～35岁，浸润癌为45～55岁，近年来其发病有年轻化的趋势，通过有效的早期诊断及治疗可以完全治愈的癌症。宫颈癌前病变过程中或者子宫颈癌患者体内可能出现蛋白分子的异常表达，如L1壳蛋白、P16蛋白等，这些标志性蛋白可应用于宫颈癌前筛查，P16蛋白是P16基因的编码产物，能够预测宫颈癌前病变的程度，在免疫组织化学反应中，抗体能够识别抗原决定簇，然后与之特异性结合。目前市面上试剂盒，在进行使用时，显色效果差，极易出现标记错误，操作不便，不适用筛查筛选，无法满足医护人员的需求。
技术实现思路
本专利技术提供的专利技术目的在于提供免疫细胞p16特异性结合的单克隆抗体的试剂盒，实现显色效果好，不易出现标记错误，操作方便，适用筛查筛选的效果。为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：免疫细胞p16特异性结合的单克隆抗体的试剂盒，所述试剂盒中包括以下试剂：1ml－1.5ml的免疫细胞p16单克隆抗体；0.3ml－0.5ml的分离液；5ml－8ml的稀释液；20ml－60ml的PSB工作液；20ml－50ml的3％H2O2去离子水；0.2ml－0.5ml的中性树脂；0.2ml－0.5ml的显色液A；0.2ml－0.5ml的显色液B；2ml－6ml的封闭液；2ml－5ml的二甲苯。作为本专利技术进一步的方案：所述显色液A为苏木素。作为本专利技术进一步的方案：所述显色液B为蓝化液。作为本专利技术进一步的方案：所述免疫细胞p16单克隆抗体、分离液、稀释液、PSB工作液、3％H2O2去离子水、中性树脂、显色液A、显色液B、封闭液和二甲苯均存储在温度条件为2－10℃的环境中。免疫细胞p16特异性结合的单克隆抗体的试剂盒的使用方法，包括以下步骤：S1、将免疫细胞p16单克隆抗体置于震动器中，进行震荡处理。S2、向已编号的试管中加入分离液，再将震荡完的免疫细胞p16单克隆抗体倒入编号的试管中。S3、将准备好的试管放入到离心机中，进行离心处理，倒掉上清液，反转试管于吸水纸。S4、加入至上部离心好的试管中，再次将试管放入离心机进行继续离心，然后取出试管倒掉上清液。S5、加入适量的稀释液，并晃动试管。S6、用吸液枪吸出样本直接打到10孔玻片上，静止10min。S7、将玻片放入50℃的烤箱中10min，烤完后玻片室冷却2min。S8、对玻片进行染色。S9、将适量的中性树脂胶滴在玻片上，盖玻片盖上并排出气泡。S10、使用细胞检测仪分散样本并过滤，采用杂交捕获法检测，将检测结果与以明确的标准细胞进行对比，确定检测结果。作为本专利技术进一步的方案：将根据S1中的操作步骤，所述震动器的转速为2000r/min，震荡时间为15min。作为本专利技术进一步的方案：将根据S3中的操作步骤，所述离心机的转速为800rLmin，离心时间为3min。作为本专利技术进一步的方案：将根据S6中的操作步骤，在静止10min后，用吸液枪把玻片上多余样本回吸。作为本专利技术进一步的方案：其特征在于，根据S8中的操作步骤，在对玻片进行染色时包括以下步骤：S801、加入去离子水温育13min，再用PSB工作液冲洗3次，然后加封闭液温育15min；S802、加显色液A温育3min，蒸馏水冲洗2次，在加入显色液B温育3min，用蒸馏水冲洗2次。作为本专利技术进一步的方案：根据S8中的操作步骤，在对玻片进行染色时，还包括将染色好的玻片放入二甲苯中充分透明。本专利技术提供了免疫细胞p16特异性结合的单克隆抗体的试剂盒。具备以下有益效果：本专利技术中，通过细胞检测仪分散样本并过滤，采用杂交捕获法检测，在检测时，用p16抗体包被玻片中的微孔，制成样本抗体，在免疫组织化学反应中，抗体能够识别抗原决定簇，然后与之特异性结合，通过苏木和蓝化液进行染色，经过彻底洗涤后底物显色，涂片中出现有5个及以上的异常细胞着色为棕色(无论细胞质或细胞核)，则判读结果为阳性，相反，细胞着色为棕色的数量少于5个，甚至无着色细胞，判读结果为阴性，实现显色效果好，不易出现标记错误，操作方便，适用筛查筛。具体实施方式以下参照具体的实施例来说明本专利技术。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅用于说明本专利技术，其不以任何方式限制本专利技术的范围。实施例1：免疫细胞p16特异性结合的单克隆抗体的试剂盒，试剂盒中包括以下试剂：1ml－1.5ml的免疫细胞p16单克隆抗体；0.3ml－0.5ml的分离液；5ml－8ml的稀释液；20ml－60ml的PSB工作液；20ml－50ml的3％H2O2去离子水；0.2ml－0.5ml的中性树脂；0.2ml－0.5ml的显色液A；0.2ml－0.5ml的显色液B；2ml－6ml的封闭液；2ml－5ml的二甲苯。具体的，显色液A为苏木素。具体的，显色液B为蓝化液。具体的，免疫细胞p16单克隆抗体、分离液、稀释液、PSB工作液、3％H2O2去离子水、中性树脂、显色液A、显色液B、封闭液和二甲苯均存储在温度条件为2－10℃的环境中。免疫细胞p16特异性结合的单克隆抗体的试剂盒的使用方法，包括以下步骤：(1)、将免疫细胞p16单克隆抗体置于震动器中，进行震荡处理。(2)、向已编号的试管中加入分离液，再将震荡完的免疫细胞p16单克隆抗体倒入编号的试管中。(3)、将准备好的试管放入到离心机中，进行离心处理，倒掉上清液，反转试管于吸水纸。(4)、加入至上部离心好的试管中，再次将试管放入离心机进行继续离心，然后取出试管倒掉上清液。(5)、加入适量的稀释液，并晃动试管。(6)、用吸液枪吸出样本直接打到10孔玻片上，静止10min。(7)、将玻片放入50℃的烤箱中10min，烤完后玻片室冷却2min。(8)、对玻片进行染色。(9)、将适量的中性树脂胶滴在玻片上，盖玻片盖上并排出气泡。(10)、使用细胞检测仪分散样本并过滤，采用杂交捕获法检测，将检测结果与以明确的标准细胞进行对比，确定检测结果。具体的，将根据(1)中的操作步骤，震动器的转速为2000r/min，震荡时间为15min。具体的，将根据(3)中的操作步骤，离心机的转速为800rLmin，离心时间为3min。具体的，将根据(6)中的操作步骤，在静止1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.免疫细胞p16特异性结合的单克隆抗体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括以下试剂：/n1ml－1.5ml的免疫细胞p16单克隆抗体；/n0.3ml－0.5ml的分离液；/n5ml－8ml的稀释液；/n20ml－60ml的PSB工作液；/n20ml－50ml的3％H

【技术特征摘要】
1.免疫细胞p16特异性结合的单克隆抗体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括以下试剂：
1ml－1.5ml的免疫细胞p16单克隆抗体；
0.3ml－0.5ml的分离液；
5ml－8ml的稀释液；
20ml－60ml的PSB工作液；
20ml－50ml的3％H2O2去离子水；
0.2ml－0.5ml的中性树脂；
0.2ml－0.5ml的显色液A；
0.2ml－0.5ml的显色液B；
2ml－6ml的封闭液；
2ml－5ml的二甲苯。


2.根据权利要求1所述的免疫细胞p16特异性结合的单克隆抗体的试剂盒，其特征在于，所述显色液A为苏木素。


3.根据权利要求1所述的免疫细胞p16特异性结合的单克隆抗体的试剂盒，其特征在于，所述显色液B为蓝化液。


4.根据权利要求3所述的免疫细胞p16特异性结合的单克隆抗体的试剂盒，其特征在于，所述免疫细胞p16单克隆抗体、分离液、稀释液、PSB工作液、3％H2O2去离子水、中性树脂、显色液A、显色液B、封闭液和二甲苯均存储在温度条件为2－10℃的环境中。


5.免疫细胞p16特异性结合的单克隆抗体的试剂盒的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、将免疫细胞p16单克隆抗体置于震动器中，进行震荡处理；
S2、向已编号的试管中加入分离液，再将震荡完的免疫细胞p16单克隆抗体倒入编号的试管中；
S3、将准备好的试管放入到离心机中，进行离心处理，倒掉上清液，反转试管于吸水纸；
S4、加入至上部离心好的试管中，再次将试管放入离心机进行继续离心，然后取出试管倒掉上清液；
S5、加入适量的稀释液，并晃动...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱峻，杰西卡·朱，
申请(专利权)人：深圳市森盈生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44