一种绞股蓝皂苷提取物及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种绞股蓝皂苷提取物及其制备方法，所述制备方法包括如下步骤：(1)取药材绞股蓝全草，经拣选、洗涤后，粉碎，过筛；(2)加入乙醇，回流提取；药渣再加乙醇，回流提取，合并提取液，过滤；(3)滤液过大孔树脂，用水洗脱，再用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；(4)加水，通过分子量为500kd和2000kd纳滤膜，收集大于500kd、小于2000kd分子量的滤液，冷冻干燥；(5)取干燥后的绞股蓝皂苷，加甲醇溶解，加入硅胶混合拌样，上中压硅胶层析柱，用氯甲烷‑甲醇‑水洗脱；(6)用薄层检查，收集含有绞股蓝皂苷XLIX的洗脱液，真空干燥，粉碎，得绞股蓝皂苷提取物。本发明专利技术制得的绞股蓝皂苷XLIX含量在95％以上，并且具有良好的抗氧化作用。

【技术实现步骤摘要】
一种绞股蓝皂苷提取物及其制备方法
本专利技术涉及植物提取物
，具体涉及一种绞股蓝皂苷提取物及其制备方法。
技术介绍
绞股蓝Gynostemmapentaphyllum(Thunb.)Makino，又名七叶胆，为葫芦科(Cucurbitaceae)绞股蓝属(GynostemmaBlumeBijdr.)多年生草质藤本攀缘植物。绞股蓝是卫计委公布的可作为保健食品的中药，为益寿保健之品，并被卫生部批准作为新资源药食两用植物，有“第二人参”、“南方人参”之称，在民间亦被称为“不老长寿药草”等。目前普遍认为皂苷、黄酮等是绞股蓝主要活性成分，已知含有包括绞股蓝皂苷A、绞股蓝皂苷XLIX等140余种绞股蓝皂苷以及商陆素、芦丁、槲皮素等10余种黄酮类成分，是目前所知非五加科人参属植物中唯一含有人参皂苷类成分的植物。现代药理学研究表明绞股蓝中富含的多种皂苷有增强免疫力、抗氧化、抗肿瘤、延缓衰老等作用，其中绞股蓝皂苷XLVI和人参皂苷Rb3具有降血糖、抗肿瘤、抗血栓等作用，对神经系统、心脑血管和血液等系统也有重要的药理活性。现有技术专利号CN1l1349135A公开了绞股蓝皂苷XLIX的提取，含量达90％以上，将其制成用于治疗糖尿病和心血管疾病患者的药物，该药物疗效确切，安全无毒副作用；其从绞股蓝皂苷开始纯化，经硅胶层析、制备型高效液相，反复重结晶，制得绞股蓝皂苷XLIX含量90％以上，具有降低血糖和高血脂的效果。其制得的绞股蓝皂苷XLIX的含量较低。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是克服
技术介绍
的技术缺陷，提供一种绞股蓝皂苷提取物及其制备方法。本专利技术以绞股蓝全草为原料，经乙醇提取，大孔树脂纯化，通过纳滤膜和中压硅胶柱，经高效液相色谱检测，制得的绞股蓝皂苷XLIX含量在95％以上，并且具有良好的抗氧化作用。本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案如下：一种绞股蓝皂苷提取物的制备方法，包括如下步骤：(1)取药材绞股蓝全草，经拣选、洗涤后，粉碎，过筛；(2)按质量比，加入10倍量药材质量的60％乙醇，回流提取，放出提取液；按质量比，药渣再加10倍量药材质量的60％乙醇，回流提取，合并提取液，过滤，回收乙醇溶剂；(3)滤液过大孔树脂，按体积比，用4倍柱体积水洗脱，再用5倍柱体积70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液，回收乙醇溶剂；(4)加水，通过分子量为500kd和2000kd纳滤膜，收集大于500kd、小于2000kd分子量的滤液，冷冻干燥；(5)取干燥后的绞股蓝皂苷，加甲醇溶解，加入硅胶混合拌样，上300～400目中压硅胶层析柱，按体积比，依次用15∶1∶0.1、15∶4∶1、15∶6∶1的二氯甲烷-甲醇-水洗脱；(6)用薄层检查，收集含有绞股蓝皂苷XLIX的洗脱液，回收溶剂，真空干燥，粉碎，得绞股蓝皂苷提取物。优选地，所述步骤(1)中，所述过筛时的目数为40目。优选地，所述步骤(2)中，所述回流提取时的温度为90℃。优选地，所述步骤(2)中，所述过滤时的孔径为5μm。优选地，所述步骤(2)中，所述过滤后滤液浓缩至2倍药材量。优选地，所述步骤(3)中，所述大孔树脂为D101。优选地，所述步骤(3)中，所述收集70％乙醇洗脱液将所述洗脱液浓缩至无醇。优选地，所述步骤(4)中，所述加水使溶液含有固体量为2％～5％。优选地，所述步骤(4)中，所述纳滤膜型号为RNF-0460或RNF-2500/7200，膜分子量300～2000道尔顿，过滤能力100L/h以上。优选地，所述步骤(5)中，所述硅胶混合拌样中使用的硅胶的目数为100～200目。优选地，所述步骤(6)中，所述薄层检查，按体积比，以正丁醇-乙酸-水为4∶1∶5为展开剂，10％硫酸乙醇溶液为显色剂。一种绞股蓝皂苷提取物，采用如上所述的一种绞股蓝皂苷提取物的制备方法制备得到。上述技术方案中，所述％为质量百分含量。本专利技术的基本原理：本专利技术通过将纳滤膜与中压层析柱进行结合，在中压层析柱中通过特定洗脱比例的二氯甲烷-甲醇-水(按体积比，15∶1∶0.1、15∶4∶1、15∶6∶1)进行洗脱，制得的绞股蓝皂苷XLIX含量在95％以上。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：(1)本专利技术以绞股蓝全草为原料，经乙醇提取，大孔树脂纯化，通过纳滤膜和中压硅胶柱，经高效液相色谱检测，制得的绞股蓝皂苷XLIX含量在95％以上，并且具有良好的抗氧化作用；(2)本专利技术工艺简便，易于实现工业化。具体实施方式为了更好地理解本专利技术的内容，下面结合具体实施例作进一步说明。应理解，这些实施例仅用于对本专利技术进一步说明，而不用于限制本专利技术的范围。此外应理解，在阅读了本专利技术所述的内容后，该领域的技术人员对本专利技术作出一些非本质的改动或调整，仍属于本专利技术的保护范围。实施例1～3及对比例1和2中所述中压层析柱购自宸乔乔科技有限公司；所述纳滤膜型号为RNF-0460或RNF-2500/7200，膜分子量300～2000道尔顿，过滤能力100L/h以上。实施例1取绞股蓝全草，经拣选、洗涤后，粉碎，称取10kg，过40目，每次加入10倍量药材质量的60％乙醇(m/m)，90℃回流提取，放出提取液；药渣再加10倍量药材质量的60％乙醇(m/m)，90℃回流提取，合并提取液，5μm过滤，回收乙醇溶剂。滤液通过处理好的D101大孔树脂，用4倍柱体积纯化水(v/v)洗脱，水洗液弃去；再用5倍柱体积70％乙醇(v/v)洗脱，收集70％乙醇洗脱液，回收乙醇溶剂，加水使溶液含有固体量为2％，通过分子量500kd和2000kd纳滤膜，收集大于500kd，小于2000kd分子量的滤液，冷冻干燥。取干燥后绞股蓝皂苷100g，加甲醇溶解，加入200g硅胶(100～200目)混合拌样，上1000g(300～400目)中压硅胶层析柱，按体积比，依次用二氯甲烷-甲醇-水洗脱(15∶1∶0.1，15∶4∶1，15∶6∶1)，用薄层检查(按体积比，以正丁醇-乙酸-水＝4∶1∶5为展开剂，10％硫酸乙醇溶液为显色剂)，收集含有绞股蓝皂苷XLIX的洗脱液，回收溶剂，真空干燥，粉碎，得绞股蓝皂苷提取物，检测绞股蓝皂苷XLIX含量。实施例2取绞股蓝全草，经拣选、洗涤后，粉碎，称取10kg，过40目，每次加入10倍量药材质量的60％乙醇(m/m)，90℃回流提取，放出提取液；药渣再加10倍量药材质量的60％乙醇(m/m)，90℃回流提取，合并提取液，5μm过滤，回收乙醇溶剂。滤液通过处理好的D101大孔树脂，用4倍柱体积纯化水(v/v)洗脱，水洗液弃去；再用5倍柱体积70％乙醇(v/v)洗脱，收集70％乙醇洗脱液，回收乙醇溶剂，加水使溶液含有固体量为5％，通过分子量500kd和2000kd纳滤膜，收集大于500kd，小于2000kd分子量的滤液，冷冻干燥。取干燥后绞股蓝皂苷100g，加甲醇溶解，加入200本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种绞股蓝皂苷提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)取药材绞股蓝全草，经拣选、洗涤后，粉碎，过筛；/n(2)按质量比，加入10倍量药材质量的60％乙醇，回流提取，放出提取液；按质量比，药渣再加10倍量药材质量的60％乙醇，回流提取，合并提取液，过滤，回收乙醇溶剂；/n(3)滤液过大孔树脂，按体积比，用4倍柱体积水洗脱，再用5倍柱体积70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液，回收乙醇溶剂；/n(4)加水，通过分子量为500kd和2000kd纳滤膜，收集大于500kd、小于2000kd分子量的滤液，冷冻干燥；/n(5)取干燥后的绞股蓝皂苷，加甲醇溶解，加入硅胶混合拌样，上300～400目中压硅胶层析柱，按体积比，依次用15∶1∶0.1、15∶4∶1、15∶6∶1的二氯甲烷-甲醇-水洗脱；/n(6)用薄层检查，收集含有绞股蓝皂苷XLIX的洗脱液，回收溶剂，真空干燥，粉碎，得绞股蓝皂苷提取物。/n

【技术特征摘要】
1.一种绞股蓝皂苷提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)取药材绞股蓝全草，经拣选、洗涤后，粉碎，过筛；
(2)按质量比，加入10倍量药材质量的60％乙醇，回流提取，放出提取液；按质量比，药渣再加10倍量药材质量的60％乙醇，回流提取，合并提取液，过滤，回收乙醇溶剂；
(3)滤液过大孔树脂，按体积比，用4倍柱体积水洗脱，再用5倍柱体积70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液，回收乙醇溶剂；
(4)加水，通过分子量为500kd和2000kd纳滤膜，收集大于500kd、小于2000kd分子量的滤液，冷冻干燥；
(5)取干燥后的绞股蓝皂苷，加甲醇溶解，加入硅胶混合拌样，上300～400目中压硅胶层析柱，按体积比，依次用15∶1∶0.1、15∶4∶1、15∶6∶1的二氯甲烷-甲醇-水洗脱；
(6)用薄层检查，收集含有绞股蓝皂苷XLIX的洗脱液，回收溶剂，真空干燥，粉碎，得绞股蓝皂苷提取物。


2.如权利要求1所述的一种绞股蓝皂苷提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，所述过筛时的目数为40目。


3.如权利要求1所述的一种绞股蓝皂苷提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述回流提取时的温度为90℃。

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【专利技术属性】
技术研发人员：周凯，蔡冬青，毛成栋，杨小宏，杨建莉，
申请(专利权)人：杨凌萃健生物工程技术有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61