一种用于检测溶栓后脑出血31-kDa Occludin的试纸条及其制备方法和用途技术

本发明专利技术公开一种用于检测溶栓后脑出血31‑kDa Occludin的试纸条，所述试纸条由样品垫、反应垫、硝酸纤维素膜和吸收垫依次贴在PVC底卡上制成，所述硝酸纤维素膜采用羊抗兔抗体划线作为质控线C线，采用兔抗31‑kDa Occludin蛋白的IgG捕获抗体在硝酸纤维素膜上线作为检测线T线，所述反应垫喷涂Fe

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测溶栓后脑出血31-kDaOccludin的试纸条及其制备方法和用途
本专利技术属于免疫层析检测领域，具体涉及脑卒中溶栓或取栓后脑出血的检测，特别是一种脑卒中溶栓或取栓后脑出血蛋白片段及其应用。
技术介绍
从1990年到2017年近20年来，脑卒中一直位列我国国民死亡原因首位。其高发病率、高致死率、高致残率、高复发率、经济负担重五大特点，严重威胁人类健康。血管再通治疗（溶栓或取栓）是目前脑卒中急性期治疗的唯一有效手段，但存在脑出血的巨大风险，导致其治疗率不足5%。如何明确溶栓或取栓导致脑出血的病因、早期识别风险预警标志、提供快速精确诊断成为困扰临床医生的棘手问题，是目前临床亟需解决的重要问题。再灌后脑出血的发生与脑缺血早期血脑屏障损伤密切相关，相关的分子机制研究层出不穷，积累了大量相关血清学标志物的数据。其中来源于凋亡血脑屏障内皮细胞的31-kDaOccludin蛋白降解片段，具有“血脑屏障损伤达到临界点之前，一直维持低水平的正常血清基线；一旦血脑屏障损伤达到临界点，血清水平骤然大幅升高”的生物学特性，具备作为理想血清本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测31-kDa Occludin蛋白降解片段的试纸条，所述试纸条由样品垫、反应垫、硝酸纤维素膜和吸收垫依次贴在PVC底卡上制成，所述硝酸纤维素膜采用羊抗兔抗体作为质控线C线，采用兔抗31-kDa Occludin蛋白的IgG捕获抗体在硝酸纤维素膜上作为检测线T线，所述反应垫喷涂Fe

【技术特征摘要】
1.一种检测31-kDaOccludin蛋白降解片段的试纸条，所述试纸条由样品垫、反应垫、硝酸纤维素膜和吸收垫依次贴在PVC底卡上制成，所述硝酸纤维素膜采用羊抗兔抗体作为质控线C线，采用兔抗31-kDaOccludin蛋白的IgG捕获抗体在硝酸纤维素膜上作为检测线T线，所述反应垫喷涂Fe3O4纳米酶-抗31-kDaOccludin蛋白抗体偶联复合物，所述反应垫采用含有1-2%的Casein-PBS和0.5%-1%TritonX-100进行预处理。


2.根据权利要求1所述的检测31-kDaOccludin蛋白降解片段的试纸条，其特征在于，所述反应垫采用含有1.5%的Casein-PBS和0.75%TritonX-100进行预处理，所述预处理为浸泡5min。


3.根据权利要求1所述的检测31-kDaOccludin蛋白降解片段的试纸条，其特征在于，所述试纸条用浓度为2mg/mL的羊抗兔抗体在硝酸纤维素膜上划线作为质控线C线；用浓度为3mg/mL的兔抗31-kDaOccludin蛋白的IgG捕获抗体在硝酸纤维素膜上线作为检测线T线。


4.根据权利要求1-3任意一项所述检测31-kDaOccludin蛋白降解片段的试纸条，其特征在于，将浓度为1.5mg/mLFe3O4纳米酶-抗31-kDaOccludin蛋白抗体偶联复合物喷涂至反应垫上。


5.根据权利要求1-4任意一项所述检测31-kDaOccludin蛋白降解片段的试纸条，其特征在于，所述Fe3O4纳米酶-抗31-kDaOccludin蛋白抗体偶联复合物的制备方法为：
（1）配制1mL活化剂，所述活化剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺EDC和N-羟基琥珀酰亚胺NHS的混合物，且所述EDC和NHS的物质的量之比为1:1；
（2）向步骤的活化剂中加入分散度好、粒径均一的Fe3O4纳米酶5mg，涡旋振荡，放置在静音混合器中充分反应30min；将100μg的兔抗31-kDaOccludin蛋白的IgG抗体与500μL醋酸钠溶液混合后加入至步骤的活化后的纳米酶溶液中，振荡混匀，置于4℃旋转混匀仪孵育过夜；所述醋酸钠溶液的pH为6.0，所述醋酸钠溶液...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘文兰，徐迹，廖子君，雷雪萌，李梦娜，张圆，
申请(专利权)人：深圳市第二人民医院，
类型：发明
国别省市：广东;44