UPLC法同时检测柱花草中4种次级代谢物的方法技术

技术编号:26889216 阅读:30 留言:0更新日期:2020-12-29 16:02
本发明专利技术涉及UPLC检测技术领域,尤其涉及UPLC法同时检测柱花草中4种次级代谢物的方法。本发明专利技术提供了柱花草中次级代谢物的检测方法,包括采用乙酸铵水溶液和甲醇作为流动相,在优化的洗脱梯度以及前处理方法后,取得了良好的检测效果,能够同时对柱花草中的水杨酸、吲唑、原苯甲酸三乙酯和大豆甾醇B进行定性和/或定量的检测,且具有良好的准确性和灵敏度。

【技术实现步骤摘要】
UPLC法同时检测柱花草中4种次级代谢物的方法
本专利技术涉及UPLC检测
,尤其涉及UPLC法同时检测柱花草中4种次级代谢物的方法。
技术介绍
柱花草(Stylosanthesspp.)是一种优良的热带豆科牧草,占世界热带、南亚热带地区人工草地牧草品种的三分之一,也是我国热区最重要的热带牧草,并形成了“北有苜蓿草,南有柱花草”的草业发展格局。主要用于畜牧、青草饲料、橡胶园果园覆盖作物及水土保持等。目前,关于柱花草的品种(系)、遗传多样性、基因鉴定、病害、评价与利用、育种等是研究热点之一。柱花草的次级代谢物有很好的抑菌活性,但由于其种类较多,缺乏批量同时精准检测的方法。刘文超等人分离出柱花草中的8种次级代谢产物,发现水杨酸等对能造成柱花草毁灭性病害的炭疽菌有很好抑制作用。目前,水杨酸、甾醇等次级代谢产物检测方法有分光光度法、液相色谱法,液相色谱-质谱法、气相色谱-质法等;吲唑、原苯甲酸三乙酯等次级代谢产物的检测方法鲜有报道,同时检测以上4种次级代谢物的研究尚无报道。
技术实现思路
有鉴于此,本专利技术要解决的技术问题在本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种柱花草4种次级代谢物的检测方法,其特征在于,包括:/n柱花草经提取获得待测液,以超高效液相色谱法对待测液进行检测,色谱参数为:/nC18色谱柱,检测器为二极管阵列检测器,检测波长210nm和/或240nm;/n流动相A:乙酸铵水溶液,流动相B:甲醇;/n梯度洗脱程序:/n0~5.00min,流动相B的体积分数为40%;/n5.00~5.01min,流动相B的体积分数由40%至98%;/n5.01~6.00min,流动相B的体积分数为98%;/n6.00~6.01min,流动相B的体积分数由98%至40%;/n6.01~8.00min,流动相B的体积分数为40%。/n

【技术特征摘要】
1.一种柱花草4种次级代谢物的检测方法,其特征在于,包括:
柱花草经提取获得待测液,以超高效液相色谱法对待测液进行检测,色谱参数为:
C18色谱柱,检测器为二极管阵列检测器,检测波长210nm和/或240nm;
流动相A:乙酸铵水溶液,流动相B:甲醇;
梯度洗脱程序:
0~5.00min,流动相B的体积分数为40%;
5.00~5.01min,流动相B的体积分数由40%至98%;
5.01~6.00min,流动相B的体积分数为98%;
6.00~6.01min,流动相B的体积分数由98%至40%;
6.01~8.00min,流动相B的体积分数为40%。


2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述柱花草待测液的制备方法为:
柱花草与乙酸乙酯混合,经超声提取获得的提取液;
所述提取液以C18吸附剂处理后,取上清液经浓缩干燥后复溶,获得柱花草提取液,所述复溶的溶液由40%流动相B和60%流动相A组成。


3.根据权利要求2所述的检测方法,其特征在于,
每g柱花草与8mL~12mL乙酸乙酯混合;
每g柱花草提取物以3gC18吸附剂处理;
每g柱花草的提取物以1mL溶液,于10±2℃,超声复溶1min。


4.根据权利要求2或3所述的检测方法,其特征在于,所述超声提取的功率为90W,次数为2次,每次25min,第一次超声提取结束后,分离上清液;沉淀再次加入等体积乙酸乙酯进行第二次超声提取,合并两次提取的上清液为提取液;所述超声提取的功率为90W。


5.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员:邹冬梅蒋昌顺尹青春潘永波邓浩
申请(专利权)人:中国热带农业科学院分析测试中心
类型:发明
国别省市:海南;46

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