一种同时测定清肺药物中多种活性成分的检测方法技术

本发明专利技术公开了同时测定清肺药物中绿原酸、咖啡酸、对香豆酸、野黄芩苷、迷迭香酸、芹菜素含量的HPLC方法，以及检测贝母素甲、贝母素乙的方法，建立了药物活性成分的指纹图谱，保证了测量方法的精密度、稳定性、重复性、专属性、准确度。

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定清肺药物中多种活性成分的检测方法
本专利技术属于医药领域，涉及一种用于同时测定多种清肺药物活性成分的检测方法，以及对活性成分HPLC标准指纹图谱的建立方法。
技术介绍
清肺方破茧于《景岳全书》，绵历甲子，1973年总结成中肺协定方，1976年开发为中肺合剂，原方由浙贝母、防己、白花蛇舌草、龙葵、重楼、半枝莲、白茅根、仙鹤草、夏枯草、天龙10味中药组成，主要用于肺癌、肺炎、放射性肺炎引起的咳嗽多痰、胸痛、咳血等。清肺方剂经过多年改良发展，衍生了多种针对不同症状的药物组合形式，2002年起对于清肺合剂的质量控制研究、药理药效研究、临床研究持续不断发展，取得了一定进展。中药指纹图谱是指中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。它能够直观描绘中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药物提取物或成方药品质量进行控制和评价，具备专属性强、稳定性好、重现性好的优点，因此中药指纹图谱已经成为目前国际上较为先进的中药质量控制手段。CN101732552B公开了一种清肺化痰丸的检测本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种清肺药物组合物的含量测定方法，该组合物中含有如下药物：龙葵，百合，夏枯草，浙贝母，重楼，制黄精，沙参，半枝莲和白花蛇舌草，其特征在于对药物中活性成分绿原酸、咖啡酸、对香豆酸、野黄芩苷、迷迭香酸、芹菜素同时进行检测，包括如下步骤：/nS1.色谱条件：采用SB-C18色谱柱；流动相A为0.3%质量浓度的甲酸溶液，流动性B为乙腈，梯度洗脱，检测波长：0-25 min为310 nm，25-75 min为330 nm；柱温：35℃；流速：1.0mL/min；进样量：10 μl；/nS2.对照品溶液制备：精密称定咖啡酸、对香豆酸、野黄芩苷、迷迭香酸、芹菜素对照品适量，加甲醇溶解并稀释制得对照品溶液...

【技术特征摘要】
1.一种清肺药物组合物的含量测定方法，该组合物中含有如下药物：龙葵，百合，夏枯草，浙贝母，重楼，制黄精，沙参，半枝莲和白花蛇舌草，其特征在于对药物中活性成分绿原酸、咖啡酸、对香豆酸、野黄芩苷、迷迭香酸、芹菜素同时进行检测，包括如下步骤：
S1.色谱条件：采用SB-C18色谱柱；流动相A为0.3%质量浓度的甲酸溶液，流动性B为乙腈，梯度洗脱，检测波长：0-25min为310nm，25-75min为330nm；柱温：35℃；流速：1.0mL/min；进样量：10μl；
S2.对照品溶液制备：精密称定咖啡酸、对香豆酸、野黄芩苷、迷迭香酸、芹菜素对照品适量，加甲醇溶解并稀释制得对照品溶液；
S3.供试品溶液制备：取龙葵，百合，夏枯草，浙贝母，重楼，制黄精，沙参，半枝莲和白花蛇舌草原料药，置于蒸馏瓶中，加水后恒温回流提取，过滤得滤液，滤渣加水第二次回流，过滤得滤液，合并两次滤液，旋转蒸发即得；
S4.测定：在色谱条件下，分别进对照品溶液、供试品溶液各10μl，以峰面积计算样品含量。


2.权利要求1所述的测定方法，其特征在于，S1色谱条件中的梯度洗脱为（以B的体积百分比计）0-18min：8-12%B，18-25min：12%-14%B；25-27min：14%-16%B；27-40min：16%-16%B；40-75min：16%-35%B。


3.权利要求1所述的测定方法，其特征在于对照品制备步骤如下：精密称定咖啡酸、对香豆酸、野黄芩苷、迷迭香酸、芹菜素对照品适量，加甲醇溶解并稀释制得浓度分别为0.874mg/ml，1.18mg/ml，0.626mg/ml，0.571mg/ml，0.467mg/ml，0.238mg/ml的绿原酸、咖啡酸、对香豆酸、野黄芩苷、迷迭香酸、芹菜素对照品贮备液，4℃冰箱贮藏，备用。


4.权利要求1所述的测定方法，其特征在于供试品溶液的制备包括：取浙贝12g，白花蛇舌草15g，龙葵15g，重楼5g，半枝莲15g，沙参12g，夏枯草8g，百合15g，制黄精15g，置于蒸馏瓶中，加入10倍量(1120ml)的水，180℃恒温回流提取2小时，过滤得滤液，药渣加入10倍量水第二次180℃恒温回流2小时，过滤得滤液，合并两次滤液旋转蒸发到体积为1120ml，即得。


5.权利要求1所述的测定方法，其特征在于绿原酸、咖啡酸、对香豆酸在310nm处有最大吸收，野黄芩苷、迷迭香酸、芹菜素在330nm处有最大吸收；供试品各成分峰面积RSD均在4%之内。


6.清肺药物组合物中活性成分HPLC标准指纹图谱的建立方法，其特征在于建立活性成分为绿原酸、咖啡酸、对香豆酸、野黄芩苷、迷迭香酸和芹菜素的指纹图谱，用SB-C18色谱柱(4.6*150mm，5μm)，乙腈-0.3%甲酸体系，进行梯度洗脱，流动相A为...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄萍，张轶雯，朱俊峰，刘宇佳，潘宗富，盛孔胜，
申请(专利权)人：浙江省人民医院，
类型：发明
国别省市：浙江;33