一种血管紧张素Ⅱ转换酶活性检测试剂盒和检测方法技术

本发明专利技术公开了一种血管紧张素Ⅱ转换酶活性检测试剂盒和检测方法，所述检测试剂盒包括体系缓冲液、ACE2提取液、样本稀释液、底物应用液和pNA标准品，所述底物应用液中含有pNA基肽。本发明专利技术利用血管紧张素Ⅱ转换酶可以裂解合成的pNA基肽底物以释放黄色物质pNA的能力，并通过普通酶标仪或分光光度计在波长405nm检测吸光度来量化血管紧张素Ⅱ转换酶的活性；本发明专利技术检测时间短，检出限更低，且大大降低了检测成本。

【技术实现步骤摘要】
一种血管紧张素II转换酶活性检测试剂盒和检测方法
本专利技术属于生物
，特别涉及一种血管紧张素II转换酶活性检测试剂盒和检测方法。
技术介绍
血管紧张素II转换酶(ACE2,EC3.4.17.23)，一种锌基金属蛋白酶，是肾素-血管紧张素系统(RAS)的一部分，通过切割血管紧张素II的c末端二肽将其转化为血管紧张素1-7来控制血压的调节。ACE2是人冠状病毒的受体，如SARS和SARS-CoV-2，它表达在肺、肾和心脏的血管内皮细胞上；而且ACE2是心血管和冠状病毒引起的疾病的潜在治疗靶点。ACE2活性检测试剂盒将有助于这一领域的研究进展。现有市面上销售的血管紧张素II转换酶(ACE2)活性检测试剂盒多采用的是荧光法，需要荧光酶标仪检测，仪器昂贵，全球普及率比较低，客户检测该指标受限制于实验室条件。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了一种血管紧张素II转换酶活性检测试剂盒和检测方法，利用血管紧张素II转换酶裂解合成的pNA基肽底物以释放黄色物质的能力，释放的pNA可以通过酶标仪或分光光度计在波长405nm检测吸光本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血管紧张素II转换酶活性检测试剂盒，其特征在于，包含以下试剂：体系缓冲液，ACE2提取液，样本稀释液，底物应用液，pNA标准品；所述底物应用液中含有pNA基肽，所述pNA基肽为由ACE2特异性底物多肽与pNA偶联合成的物质，所述pNA基肽中ACE2特异性底物多肽的羧基端与pNA通过肽键偶联。/n

【技术特征摘要】
1.一种血管紧张素II转换酶活性检测试剂盒，其特征在于，包含以下试剂：体系缓冲液，ACE2提取液，样本稀释液，底物应用液，pNA标准品；所述底物应用液中含有pNA基肽，所述pNA基肽为由ACE2特异性底物多肽与pNA偶联合成的物质，所述pNA基肽中ACE2特异性底物多肽的羧基端与pNA通过肽键偶联。


2.根据权利要求1所述的血管紧张素II转换酶活性检测试剂盒，其特征在于，所述ACE2特异性底物多肽为AngⅠ、AngII、孤儿G蛋白耦联受体-13、内啡肽及神经加压素中的一种。


3.根据权利要求1所述的血管紧张素II转换酶活性检测试剂盒，其特征在于，所述体系缓冲液中含有磷酸氢二钠、磷酸二氢钾和牛血清蛋白，且pH为7.8～8.4，所述磷酸氢二钠的含量为15.0～22.5g/L，所述磷酸二氢钾的含量为2.5～3.5g/L，所述牛血清蛋白的含量为0.1～0.5g/L。


4.根据权利要求1所述的血管紧张素II转换酶活性检测试剂盒，其特征在于，所述ACE2提取液中含有三(羟甲基)氨基甲烷、盐酸、曲拉通X-100、去氧胆酸钠、氯化钠、EDTA、抑蛋白酶肽、亮抑酶肽、胃蛋白酶抑制剂、十二烷基硫酸钠和焦磷酸钠；其中，所述三(羟甲基)氨基甲烷的含量为48～75g/L，所述盐酸的含量为0.1～0.5mmol/L，所述曲拉通X-100的含量为0.1～0.5％，所述去氧胆酸钠的含量为0.2～1.0mmol/L，所述氯化钠的含量为180～240mmol/L，所述EDTA的含量为0.2～1.5mmol/L，所述抑蛋白酶肽的含量为0.01～0.1mmol/L，所述亮抑酶肽的含量为0.005～0.05mmol/L，所述胃蛋白酶抑制剂的含量为0.005～0.05mmol/L，所述十二烷基硫酸钠的含量为0.1～0.5％，所述焦磷酸钠的含量为0.05～0.1mmol/L。


5.根据权利要求3所述的血管紧张素II转换酶活性检测试剂盒，其特征在于，所述样本稀释液中含有三(羟甲基)氨基甲烷、盐酸、曲拉通X-100和氯化钠，其中，所述三(羟甲基)氨基甲烷的含量为48～75g/L，所述盐酸的含量为0.05～0.5mmol/L，所述曲拉通X-100的含量为0.1～0.5％，所述氯化钠的含量为180～240mmol/L。


6.根据权利要求1所述的血管...

【专利技术属性】
技术研发人员：冷毅斌，王长乐，王振平，
申请(专利权)人：武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42