检测重组慢病毒滴度的核酸组合物、试剂盒和方法技术

本发明专利技术涉及一种检测重组慢病毒滴度的核酸组合物、试剂盒和方法，该核酸组合物包括引物对和探针，引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.1～SEQ ID No.2所示，探针上连接有荧光基团。该核酸组合物用于检测含有CD247基因的重组慢病毒滴度时的特异性好，准确性高。

【技术实现步骤摘要】
检测重组慢病毒滴度的核酸组合物、试剂盒和方法
本专利技术涉及生物
，特别是涉及一种检测重组慢病毒滴度的核酸组合物、试剂盒和方法。
技术介绍
肿瘤和自身免疫性疾病的发生与感染、基因突变和环境刺激等多种因素有关。研究发现，CD247基因在慢性炎症、自身免疫性疾病和肿瘤发展过程中发挥重要作用。CD247(又称CD3Z或TCRZ)基因位于人染色体1q24.2，属于CD3Z/FCERIG家族。CD247基因编码产物为CD3分子的两条ζ链，与T细胞抗原受体αβ(也称TCRαβ)或γδ(也称TCRγδ)和CD3γ、ε、δ链以非共价键共同组成TCR/CD3复合物。TCR主要功能是识别与结合MHC抗原肽复合物，CD3则进一步将TCR识别的信号转入T淋巴细胞，诱导T淋巴细胞活化，TCR/CD3膜表达水平决定了T淋巴细胞活化的启动。CD3分子亚单位的胞内段含有一个共同的序列，即免疫受体酪氨酸活化基序(immunoreceptortyrosine-basedactivationmotif，ITAM)。该序列与抗原识别后淋巴细胞的活化及信号转导关系密切，其中CD3本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测重组慢病毒滴度的核酸组合物，其特征在于，包括引物对和探针，所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.1～SEQ ID No.2所示，所述探针上连接有荧光基团。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测重组慢病毒滴度的核酸组合物，其特征在于，包括引物对和探针，所述引物对的核苷酸序列如SEQIDNo.1～SEQIDNo.2所示，所述探针上连接有荧光基团。


2.根据权利要求1所述的核酸组合物，其特征在于，所述探针的核苷酸序列如SEQIDNo.3所示。


3.根据权利要求1所述的核酸组合物，其特征在于，所述荧光基团选自FAM、HEX、VIC、CY5及ROX中的一种。


4.一种检测重组慢病毒滴度的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1～3任一项所述的检测重组慢病毒滴度用的核酸组合物。


5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，还包括PCR反应缓冲液和DNA提取试剂中的至少一种。


6.一种检测重组慢病毒滴度的方法，其特征在于，包括以下步骤：
用含有重组慢病毒的待测样品感染靶细胞，并提取感染后所述靶细胞中的基因组DNA，所述重组慢病毒上整合有CD247基因；
将所述基因组DNA与权利要求1～3任一项所述的检测重组慢病毒滴度的核酸组合物混合后进行实时荧光定量PCR扩增反应，得到CD247基因的Ct值；
根据所述CD247基因的Ct值以及由含有CD247基因的质粒标准品建立的标准曲线，得到提取的所述基因组DNA中的CD247基因的浓度；及
根据提取的所述基因组DNA中的CD247基因的浓度、感染前靶细胞的总数和感染后靶细胞的总数，计算所述待测样品中重组慢病毒的滴度。

【专利技术属性】
技术研发人员：王玲，王亚楠，包朝乐萌，何定红，丁怡瑾，杨谦，程娟，
申请(专利权)人：深圳普瑞金生物药业有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44