基于CRISPR-Cas12a和G四链体-血红素的HPV的检测试剂盒制造技术

本发明专利技术属于生物检测技术领域，具体涉及一种基于CRISPR‑Cas12a和G四链体‑血红素的HPV的检测试剂盒，包括如下组分：DNA提取液、阳性对照、阴性对照、RPA反应液、PS2.M/Hemin溶液、Cas12a/gRNA复合物溶液和检测溶液。检测HPV时，其操作简单、快捷，扩增的特异性较高，十分适合RNA的快速、及时的检测。

【技术实现步骤摘要】
基于CRISPR-Cas12a和G四链体-血红素的HPV的检测试剂盒
本专利技术属于生物检测
，具体涉及一种基于CRISPR-Cas12a和G四链体-血红素的HPV的检测试剂盒。
技术介绍
人类乳头瘤病毒(humanpapillomavirus，HPV)是一种乳多空病毒科的乳头瘤空泡病毒A属，是球形DNA病毒感染引起的一种性传播疾病。主要类型为HPV1、2、6、11、16、18、31、33及35型等，HPV16和18型长期感染可能与女性宫颈癌有关。为实现HPV的早期检测并使耐药菌传播减至最小，开发低成本、准确、高效、快速地检测HPV相关特异基因的诊断方法非常重要。重组酶聚合酶扩增技术(recombinasepoly-meraseamplification，RPA)一种新型的恒温核酸扩增技术，其最显著的优势就是可在37-42℃的恒温下实现特定核酸序列的扩增，可以在10～40min内完成数十亿的DNA拷贝。RPA属于等温扩增技术，对仪器设备要求低，仅需要恒温水浴锅即可完成反应，无需精密仪器。CRISPR-Cas是细菌抵抗病毒和本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于CRISPR-Cas12a和G四链体-血红素的HPV的检测试剂盒，其特征在于，包括如下组分：DNA提取液、阳性对照、阴性对照、RPA反应液、PS2.M/Hemin溶液、Cas12a/gRNA复合物溶液和检测溶液。/n

【技术特征摘要】
1.一种基于CRISPR-Cas12a和G四链体-血红素的HPV的检测试剂盒，其特征在于，包括如下组分：DNA提取液、阳性对照、阴性对照、RPA反应液、PS2.M/Hemin溶液、Cas12a/gRNA复合物溶液和检测溶液。


2.根据权利要求1所述基于CRISPR-Cas12a和G四链体-血红素的HPV的检测试剂盒，其特征在于，所述DNA提取液来自HPV感染病人阴道、宫颈分泌物。


3.根据权利要求1所述基于CRISPR-Cas12a和G四链体-血红素的HPV的检测试剂盒，其特征在于，所述阳性对照为HPV重组质粒；所述阴性对照为无关序列的质粒；
所述RPA反应液：包含扩增引物对、重泡胀缓冲液、ddH2O、冻干酶粉和MgAc。


4.根据权利要求3所述基于CRISPR-Cas12a和G四链体-血红素的HPV的检测试剂盒，其特征在于，所述扩增引物对用于扩增HPV16型或HPV18型DNA；
所述扩增引物对包括：
RPA-1上游引物:5'CACCTTCATCACCGTCGCTGGAGCGCCAGGAGTC3'，
RPA-1下游引物:5'GCGACCGGTGCCTTCTTAGGCAAGACGAGGGAG3'；
RPA-2上游引物:5'CACATTCATCACTGTCGCTGTAGCGCCAGGAGTC3'，
RPA-2下游引物:5'GAGACCGTTGCATTCTTAGCCAAGACGAGGGAG3’。


5.根据权利要求4所述基于CRISPR-Cas12a和G四链体-血红素的HPV的检测试剂盒，其特征在于，所述HPV16型或HPV18型DNA提取采用病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒进行提取。


6.根据权利要求1所述基于CRISPR-Cas1...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡争，田瑞，崔资凤，金庄，
申请(专利权)人：中山大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：广东;44