【技术实现步骤摘要】
一种分离纯化真核细胞核糖体并用于体外翻译的方法
本专利技术属于生物
，涉及一种分离纯化真核细胞核糖体并用于体外翻译的方法。
技术介绍
核糖体是真核生物中至关重要的细胞器，目前有研究表明包括核糖体在内的真核生物蛋白翻译系统在调控基因表达过程中起到重要的作用。近期研究表明，细胞内存在异质性核糖体亚群(specializedribosomes)，核糖体之间组成成分以及功能都不尽相同，导致各自对于不同mRNA的翻译具有偏好性。这种核糖体异质性可能出现在同一细胞内的不同核糖体间，也可能存在于不同组织、细胞中的核糖体之间，因此对于组织、器官的形成以及正常功能具有调控作用。除此之外，一些疾病中，如癌症以及其他非癌症疾病，都已发现核糖体功能或组成异常，这些疾病统称为“核糖体病”。DBA(Diamond-Blackfananemia)、先天性角化不良、5q综合征(5q-syndrome)都属于核糖体病，并且目前仍缺乏有效的治疗手段。鉴于此，分离纯化核糖体技术有助于此类疾病的研究，并为开发相关药物于治疗方法提供研究基础。无细胞蛋白...
【技术保护点】
1.一种分离纯化真核细胞80S核糖体的方法，其特征在于包括以下步骤：1)裂解细胞；2)分离纯化细胞裂解液中的核糖体；/n其特征在于1)所述的裂解细胞在溶液A中进行，所述的溶液A含有蛋白酶抑制剂、核酸酶抑制剂以及DTT，并且不含K
【技术特征摘要】
1.一种分离纯化真核细胞80S核糖体的方法，其特征在于包括以下步骤：1)裂解细胞；2)分离纯化细胞裂解液中的核糖体；
其特征在于1)所述的裂解细胞在溶液A中进行，所述的溶液A含有蛋白酶抑制剂、核酸酶抑制剂以及DTT，并且不含K+和Mg2+。
2.如权利要求1所述的分离纯化真核细胞80S核糖体的方法，其特征在于核酸酶抑制剂工作浓度为5U/μL；DTT终浓度为1mM。
3.如权利要求1所述的分离纯化真核细胞80S核糖体的方法，其特征在于步骤2)采用离心法去除细胞核以及线粒体等细胞器成分，最大程度分离纯净核糖体颗粒。
4.如权利要求1...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。