一种从山茶花中提取SOD超氧化物歧化酶和茶氨酸的方法技术

本发明专利技术涉及一种从山茶花中提取SOD超氧化物歧化酶和茶氨酸的方法，通过山茶花能够同时对茶氨酸和SOD进行提取，且操作流程安全、简便、能耗低，有机溶剂使用量少，未使用有毒有机溶剂或有毒金属离子，所用吸附剂可反复使用，经重结晶可制得较高纯度的茶氨酸产品，且SOD的提取方法是全物理方法提取SOD，只需要常用的简单设备即可完成，工艺简单，不存在危险；且提取过程中所使用的温度不高，条件温和，成品SOD常温下能够保存；既无环境污染也没有内原性化学污染；进而该SOD的提取方法能够降低开发成本，是一种具备规模提取植物SOD的方法，本发明专利技术的设备与过程简单，原料易得，成本低，保证了成品的质量，得到纯度较高的SOD。

【技术实现步骤摘要】
一种从山茶花中提取SOD超氧化物歧化酶和茶氨酸的方法
本专利技术涉及植物提取
，具体涉及一种从山茶花中提取SOD超氧化物歧化酶和茶氨酸的方法。
技术介绍
超氧化物歧化酶(以下简称SOD)对于人类健康极为重要，医学及'生物化学研究结果表明，它具有防衰老、防癌、防心脑血管疾病的功能。因而SOD制剂被列为国家优先发展的高新技术，列为第31项。由于人工还不能合成SOD，现在只能从动植物中提出SOD。氧化物岐化酶即SOD可对抗与阻断因氧自由基对细胞造成的损害，并及时修复受损细胞，复原因自由基造成的对细胞伤害。由于现代生活压力，环境污染，各种辐射和超量运动都会造成氧自由基大量形成；因此，生物抗氧化机制中SOD的地位越来越重要，从动物血中提SOD的方法已有很多专利发表。它们的共同特点是工艺流程长，质量较差，产品单一，浪费资源。茶多酚和茶氨酸是茶叶中常见的两种有机物。其中，茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色昔类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。主要为黄烷醇(儿茶素)类，儿茶素占60-80％。类物质茶多酚又称茶糅或茶单宁，是形成茶叶色香味的主要成份之一，也是茶叶中有保健功能的主要成份之一。研究表明，茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用，能有效地阻止放射性物质侵入骨髓，并可使锯90和钻60迅速排出体外，被健康及医学界誉为“辐射克星”。茶多酚在茶叶中的含量一般在20-35％，鉴于茶多酚的价值及其在茶叶中的高含量，因而茶多酚一般均通过从茶叶中分离提取的方法获取。然而从山茶花中能够同时提取出SOD和茶氨酸，具有较高的环保和利用价值。
技术实现思路
本专利技术要解决的问题是提供了一种从山茶花中提取SOD超氧化物歧化酶和茶氨酸的方法。为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案是：一种从山茶花中提取SOD超氧化物歧化酶和茶氨酸的方法，包括如下步骤：步骤一：将山茶花进行清洗，烘干、粉碎，进行超声破壁，进行浸提，收取浸提液；步骤二：将上述浸提液进行离心分离，收集清液备用；步骤三：将所述清液进行超滤，获得具有大分子物质的溶液A和具有小分子物质的溶液B，以及SOD滤饼；步骤四：将所述溶液B在5-75℃温度下，将经过盐酸、醋酸和NaOH调节，使溶液pH值为1-5的含茶氨酸的水溶液，通过恒流器流经无机沸石分子筛吸附剂，将茶氨酸吸附；用水洗涤，直至流出液呈无色，再用氨水溶液或者NaCl或KC1电解质溶液作为洗脱液，洗脱被吸附的茶氨酸，收集洗脱液，即茶氨酸溶液；步骤五：除去洗脱液中的洗脱剂；浓缩后加入浓缩液体积3-5倍量的无水乙醇进行干燥结晶，冷却至0℃，抽滤，得到茶氨酸粗品；将茶氨酸粗品加入少量热水溶解，再加入3-5倍量的无水乙醇重干燥结晶，冷却至0℃，抽滤，重结晶1-3次；真空冷冻干燥得精制茶氨酸产品；步骤七：将所述SOD滤饼进行溶解，获得溶解液，将所述溶解液进行超临界C02萃取，得SOD浓缩液，所得SOD浓缩液经冻干制成SOD成品。进一步的，所述溶剂为水、乙醇或其混合物。进一步的，所述超声波破壁采用间歇方式:超声5-10s，间歇3-5s，超声30-60次。进一步的，所述超滤过程采用一级超滤和二级超滤。进一步的，所述二级超滤选取截取分子量大于2000的纳滤膜，滤液为溶液B，滤饼为SOD。进一步的，所述一级超滤采用分子量大于5万的超滤膜，滤液只含有SOD及小分子、离子。进一步的，超临界C02萃取中萃取压力为13kPa，萃取温度为35-45℃。进一步的，步骤四中，所述洗脱液为0.5molL-3molL氨水溶液，或者是0.2-0.5molL的NaCKKCl的电解质溶液。与现有技术相比，本专利技术具有的优点和积极效果是：专利技术提供的提取茶氨酸和SOD的方法，通过山茶花能够同时对茶氨酸和SOD进行提取，且操作流程安全、简便、能耗低，有机溶剂使用量少，未使用有毒有机溶剂或有毒金属离子，所用吸附剂可反复使用，经重结晶可制得较高纯度的茶氨酸产品，且SOD的提取方法是全物理方法提取SOD，只需要常用的简单设备即可完成，工艺简单，不存在危险；且提取过程中所使用的温度不高，条件温和，成品SOD常温下能够保存；既无环境污染也没有内原性化学污染；进而该SOD的提取方法能够降低开发成本，是一种具备规模提取植物SOD的方法，本专利技术的设备与过程简单，原料易得，成本低，保证了成品的质量，得到纯度较高的SOD。具体实施方式为了更好的理解本专利技术，下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步的描述。实施例1：一种从山茶花中提取SOD超氧化物歧化酶和茶氨酸的方法，包括如下步骤：步骤一：将山茶花进行清洗，烘干、粉碎，进行超声破壁，超声波破壁采用间歇方式:超声5s，间歇3s，超声30次，进行浸提，溶剂为水，收取浸提液；步骤二：将上述浸提液进行离心分离，收集清液备用；步骤三：将清液进行超滤，超滤过程采用一级超滤和二级超滤，一级超滤采用分子量大于5万的超滤膜，滤液只含有SOD及小分子、离子；二级超滤选取截取分子量大于2000的纳滤膜，滤液为溶液B，滤饼为SOD，获得具有大分子物质的溶液A和具有小分子物质的溶液B，以及SOD滤饼；步骤四：将溶液B在5℃温度下，将经过盐酸、醋酸和NaOH调节，使溶液pH值为1的含茶氨酸的水溶液，通过恒流器流经无机沸石分子筛吸附剂，将茶氨酸吸附；用水洗涤，直至流出液呈无色，再用0.5molL氨水溶液作为洗脱液，洗脱被吸附的茶氨酸，收集洗脱液，即茶氨酸溶液；步骤五：除去洗脱液中的洗脱剂；浓缩后加入浓缩液体积3倍量的无水乙醇进行干燥结晶，冷却至0℃，抽滤，得到茶氨酸粗品；将茶氨酸粗品加入少量热水溶解，再加入3倍量的无水乙醇重干燥结晶，冷却至0℃，抽滤，重结晶1次；真空冷冻干燥得精制茶氨酸产品；步骤七：将SOD滤饼进行溶解，获得溶解液，将溶解液进行超临界C02萃取，萃取压力为13kPa，萃取温度为35℃，得SOD浓缩液，所得SOD浓缩液经冻干制成SOD成品。实施例2：一种从山茶花中提取SOD超氧化物歧化酶和茶氨酸的方法，包括如下步骤：步骤一：将山茶花进行清洗，烘干、粉碎，进行超声破壁，超声波破壁采用间歇方式:超声10s，间歇5s，超声60次，进行浸提，溶剂为乙醇，收取浸提液；步骤二-步骤三同实施例1；步骤四：将溶液B在75℃温度下，将经过盐酸、醋酸和NaOH调节，使溶液pH值为5的含茶氨酸的水溶液，通过恒流器流经无机沸石分子筛吸附剂，将茶氨酸吸附；用水洗涤，直至流出液呈无色，再用3molL氨水溶液作为洗脱液，洗脱被吸附的茶氨酸，收集洗脱液，即茶氨酸溶液；步骤五：除去洗脱液中的洗脱剂；浓缩后加入浓缩液体积5倍量的无水乙醇进行干燥结晶，冷却至0℃，抽滤，得到茶氨酸粗品；将茶氨酸粗品加入少量热水溶解，再加入5倍量的无水乙醇重干燥结晶，冷却至0℃，抽滤，重结晶3次；真空冷冻干燥得精制茶氨酸产品；步骤七：将SOD滤饼进本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从山茶花中提取SOD超氧化物歧化酶和茶氨酸的方法，其特征在于：包括如下步骤：/n步骤一：将山茶花进行清洗，烘干、粉碎，进行超声破壁，进行浸提，收取浸提液；/n步骤二：将上述浸提液进行离心分离，收集清液备用；/n步骤三：将所述清液进行超滤，获得具有大分子物质的溶液A和具有小分子物质的溶液B，以及SOD滤饼；/n步骤四：将所述溶液B在5-75°C温度下，将经过盐酸、醋酸和NaOH调节，使溶液pH值为1-5的含茶氨酸的水溶液，通过恒流器流经无机沸石分子筛吸附剂，将茶氨酸吸附；用水洗涤，直至流出液呈无色，再用氨水溶液或者NaCl或KC1电解质溶液作为洗脱液，洗脱被吸附的茶氨酸，收集洗脱液，即茶氨酸溶液；/n步骤五：除去洗脱液中的洗脱剂；浓缩后加入浓缩液体积3-5倍量的无水乙醇进行干燥结晶，冷却至0°C，抽滤，得到茶氨酸粗品；将茶氨酸粗品加入少量热水溶解，再加入3-5倍量的无水乙醇重干燥结晶，冷却至0°C，抽滤，重结晶1-3次；真空冷冻干燥得精制茶氨酸产品；/n步骤七：将所述SOD滤饼进行溶解，获得溶解液，将所述溶解液进行超临界C0

【技术特征摘要】
1.一种从山茶花中提取SOD超氧化物歧化酶和茶氨酸的方法，其特征在于：包括如下步骤：
步骤一：将山茶花进行清洗，烘干、粉碎，进行超声破壁，进行浸提，收取浸提液；
步骤二：将上述浸提液进行离心分离，收集清液备用；
步骤三：将所述清液进行超滤，获得具有大分子物质的溶液A和具有小分子物质的溶液B，以及SOD滤饼；
步骤四：将所述溶液B在5-75°C温度下，将经过盐酸、醋酸和NaOH调节，使溶液pH值为1-5的含茶氨酸的水溶液，通过恒流器流经无机沸石分子筛吸附剂，将茶氨酸吸附；用水洗涤，直至流出液呈无色，再用氨水溶液或者NaCl或KC1电解质溶液作为洗脱液，洗脱被吸附的茶氨酸，收集洗脱液，即茶氨酸溶液；
步骤五：除去洗脱液中的洗脱剂；浓缩后加入浓缩液体积3-5倍量的无水乙醇进行干燥结晶，冷却至0°C，抽滤，得到茶氨酸粗品；将茶氨酸粗品加入少量热水溶解，再加入3-5倍量的无水乙醇重干燥结晶，冷却至0°C，抽滤，重结晶1-3次；真空冷冻干燥得精制茶氨酸产品；
步骤七：将所述SOD滤饼进行溶解，获得溶解液，将所述溶解液进行超临界C02萃取，得SOD浓缩液，所得SOD浓缩液经冻干制成SOD成品。


2.根据权利要求1所述的一种从山茶花中提取SOD超氧化物歧化酶和茶氨酸的方法，其特征在于：所述溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘玲子，刘莉，谭楚湘，舒友明，彭彦淇，
申请(专利权)人：洞口县亿丰农林牧科技有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南;43