一种窖泥中己酸菌的分离培养方法技术

本发明专利技术提供了一种窖泥中己酸菌的分离培养方法，先使用RCM液体培养基富集培养，然后再给以外加电场，能对浓香型白酒窖泥中的己酸菌进行分离培养，该方法缩短了己酸菌的获得时间，强化了己酸菌的产己酸能力，该方法可满足白酒酿造、食醋酿造、发酵食品等研究方向中微生物的分离培养需求，所述方法得到的己酸菌发酵液中己酸产量可达到15‑18mg/mL,该方法具有简单、快速、高效的特点，大大缩短己酸菌的分离培养时间，提高生产效率，进而加速窖泥的老熟，提高厂家的优质酒率。

【技术实现步骤摘要】
一种窖泥中己酸菌的分离培养方法
本专利技术涉及一种酿酒用微生物的分离培养方法，尤其是一种窖泥中己酸菌的分离培养方法。
技术介绍
我国具有悠久的酒文化，白酒在酒饮料中居主导地位，浓香型白酒又占白酒市场的70％以上的份额，而浓香型白酒的品质和窖泥的质量密切相关。新窖池的建造和老窖池的维护都需要大量的窖泥。窖泥的品质严重影响着浓香型白酒的品质。经过多年来对窖泥微生物的研究，人工窖泥技术取得了一定的发展。现阶段，应用效果较好的窖泥制作技术是在制作窖泥的过程中向其中加入各种强化功能菌，以此来达到窖泥中产香味物质的积累和有益菌群富集的目的，同时加快窖泥的老熟。窖泥中的己酸菌是产生浓香型白酒中风味物质己酸乙酯的微生物，因此是窖泥制作过程中最常用的添加菌株。要想得到优质的可添加己酸菌，最好的办法是从窖泥中筛选。窖泥中的微生物大多数为不可培养的微生物，这使得优质己酸菌的筛选变得十分困难，传统的己酸菌获得方法用时过长。传统的己酸菌获得一般采用如下方法：1.窖泥悬浮液的制备称取窖泥加入盛有含有无菌生理盐水及无菌玻璃珠的三角瓶中，37℃、220本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种窖泥中己酸菌的分离培养方法，其特征在于：利用电场辅助筛选技术对窖泥己酸菌分离培养，具体步骤如下：/n(1)窖泥悬浮液的制备/n称取窖泥适量加入盛有无菌生理盐水及无菌玻璃珠的三角瓶中，37℃、220r/min震荡30min；/n(2)窖泥己酸菌的富集培养/n接种体积分数3％的窖泥悬浮液于300mL的RCM液体培养基内，37℃于厌氧培养箱内富集培养4天；/n(3)电场辅助初筛/n将富集培养后的液体培养基200mL倒入电场辅助筛选装置内，两个电极板间加载5-15V电压，在1-4h后可观察到负极板处产生少量细腻泡沫，并在负极板上观察到明显物质附着；/n(4)电场辅助复筛：将电极板上聚集的菌落利...

【技术特征摘要】
20200907 CN 20201092616191.一种窖泥中己酸菌的分离培养方法，其特征在于：利用电场辅助筛选技术对窖泥己酸菌分离培养，具体步骤如下：
(1)窖泥悬浮液的制备
称取窖泥适量加入盛有无菌生理盐水及无菌玻璃珠的三角瓶中，37℃、220r/min震荡30min；
(2)窖泥己酸菌的富集培养
接种体积分数3％的窖泥悬浮液于300mL的RCM液体培养基内，37℃于厌氧培养箱内富集培养4天；
(3)电场辅助初筛
将富集培养后的液体培养基200mL倒入电场辅助筛选装置内，两个电极板间加载5-15V电压，在1-4h后可观察到负极板处产生少量细腻泡沫，并在负极板上观察到明显物质附着；
(4)电场辅助复筛：将电极板上聚集的菌落利用无菌棉棒洗脱到新鲜的200mLRCM液体培养基中，厌氧培养4天后，再次筛选；
(5)重复步骤(3)、(4)直至得到纯己酸菌株，将菌种保藏在RCM固体培养基中待用。


2.根据权利要求1所述的窖泥中己酸菌的分离培养方法，其特征在于：所述RCM液体培养基：蛋白胨10g/L，牛肉膏10g/L，酵母膏3g/L，葡萄糖5g/L，可溶性淀粉1g/L，氯化钠5g/L，醋酸钠3g/L，半胱氨酸盐酸盐0.5g/L，121℃灭菌20min，pH自然；RC...

【专利技术属性】
技术研发人员：张朝正，赵华，刘安，张天爽，
申请(专利权)人：天津科技大学，
类型：发明
国别省市：天津;12