一种牦牛曲拉中乳酸菌的分离方法技术

本发明专利技术涉及生物工程技术领域，具体涉及一种牦牛曲拉中乳酸菌的分离方法。具体通过样品收集、表面消毒、冲洗、预培养、乳酸菌分离、乳酸菌鉴定及保藏七个步骤实现。本发明专利技术一种牦牛曲拉中乳酸菌的分离方法，牦牛曲拉采用预处理方法处理后，更有利于从中分离乳酸菌，处理后乳酸菌的分离具有效率高、杂菌污染少、步骤简单、成本低等优点。本发明专利技术方法分离所得的乳酸菌可应用于乳制品生产，基于上述优点，本发明专利技术可产生较好的社会及经济效益，市场前景广阔。

【技术实现步骤摘要】
一种牦牛曲拉中乳酸菌的分离方法
本专利技术涉及生物工程
，具体涉及一种牦牛曲拉中乳酸菌的分离方法。
技术介绍
牛曲拉，又称奶渣，是将牦牛乳脱脂后，在自然条件下进行发酵使酪蛋白凝结、干燥后制成的一种发酵乳制品。曲拉中蛋白含量高于以普通牛乳制作的干酪。与新鲜牦牛乳相比较，曲拉具有蛋白质含量较高、易贮藏、方便运输的特点。曲拉不仅是藏区牧民储藏食品蛋白的重要手段，而且也是制作酸奶的发酵剂。不同地域曲拉的制作方式存在很大的差异，并且同一地域的不同牧民家庭因制作习惯不同也不尽相同。曲拉的品质及风味与其制作方式关系密切，其主要由脱脂方式、制作所用的发酵剂及环境条件所控制，这些因素直接决定了曲拉的品质及滋气味。随着藏区牧民家庭脱脂技术的逐渐提高，采用电动式脱脂机已能够满足脱脂要求；到目前为止，牧民制作曲拉时依旧选择沿用传统的添加乳清液的方式作为发酵剂，因其中本身含有异常复杂的微生物，因此，曲拉的制作过程中除乳酸菌外还有多种微生物参与了发酵过程。曲拉的发酵过程属于自然发酵，因无法精确控制发酵温度，在这种开放环境下适宜多种微生物生长繁殖，因此本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种牦牛曲拉中乳酸菌的分离方法，其特征在于，具体包括如下步骤：/n步骤一，样品收集：从牧区或周边市场收集牦牛曲拉样品，收集时检查是否有霉变或虫蛀的牦牛曲拉；/n步骤二，表面消毒：称取牦牛曲拉样品，按照料液比1:10的比例，加入装有体积分数75％酒精的无菌离心管中浸泡30～50s，4000rpm离心，去除上清液，再加入与酒精相同量，质量分数15％的过氧化氢，灭菌15～20min，4000rpm离心取沉淀；/n步骤三，冲洗：将表面消毒后的牦牛曲拉用无菌水冲洗4～5次，然后用0.9％的无菌生理盐水浸泡5～8min，用无菌吸水纸吸干牦牛曲拉表面水分；/n步骤四，预培养：将冲洗过的牦牛曲拉放入其原始...

【技术特征摘要】
1.一种牦牛曲拉中乳酸菌的分离方法，其特征在于，具体包括如下步骤：
步骤一，样品收集：从牧区或周边市场收集牦牛曲拉样品，收集时检查是否有霉变或虫蛀的牦牛曲拉；
步骤二，表面消毒：称取牦牛曲拉样品，按照料液比1:10的比例，加入装有体积分数75％酒精的无菌离心管中浸泡30～50s，4000rpm离心，去除上清液，再加入与酒精相同量，质量分数15％的过氧化氢，灭菌15～20min，4000rpm离心取沉淀；
步骤三，冲洗：将表面消毒后的牦牛曲拉用无菌水冲洗4～5次，然后用0.9％的无菌生理盐水浸泡5～8min，用无菌吸水纸吸干牦牛曲拉表面水分；
步骤四，预培养：将冲洗过的牦牛曲拉放入其原始重量20～40倍体积的灭菌乳中，在37～40℃温度下培养至凝乳；
步骤五，乳酸菌分离：取10g预培养后的凝乳于90mL生理盐水中，按照10倍梯度稀释，取适宜稀释度的稀释液0.1mL涂布于MRS琼脂培养基37℃培养；
步骤六，乳酸菌鉴定：挑取菌落进行过氧化氢酶试验和革兰氏染色并镜检，将革兰阳性、过氧化氢酶实验阴性的纯菌菌株初步确定为乳酸菌；
步骤七，保藏：将步骤六初步确定的乳酸菌株接种于保藏培养基，...

【专利技术属性】
技术研发人员：文鹏程，张卫兵，赵礼，赵德，
申请(专利权)人：青海雪峰牦牛乳业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：青海;63