为建立准确度和精密度高且快速评价冬凌草配方颗粒内在质量的方法，本发明专利技术提供了一种冬凌草配方颗粒的UPLC特征图谱，构建该UPLC特征图谱的方法以及该UPLC特征图谱在冬凌草甲素检测中的应用，通过UPLC特征图谱的构建及使用，为冬凌草配方颗粒提供一种全面、快速、有效的内在质量检测方法，具有操作简单、稳定可靠、精密度高的特点。
【技术实现步骤摘要】
一种冬凌草配方颗粒的UPLC特征图谱及其构建方法和应用
本专利技术属于中药材检测
，具体的说，是一种冬凌草配方颗粒的UPLC特征图谱及其构建方法和应用。
技术介绍
中药配方颗粒是由单味中药饮片经水提、分离、浓缩、干燥、制粒而成的颗粒，失去了原有饮片的形态学特征，其真伪鉴别和优劣评价一直是制约行业发展的瓶颈。因此，建立关联功效、兼具指纹特征的中药配方颗粒质量评价体系，全面反映和有效控制配方颗粒的内在品质，是当前急需解决关键问题之一。冬凌草，学名碎米桠（Rabdosiarubescens(Hemsl.)Hara），是唇形科香茶菜属植物。主要分布于中国湖北，四川，贵州，广西，陕西等地，具有清热解毒、抗菌消炎、消肿止痛、抗肿瘤等作用。冬凌草化学成分复杂，经研究发现，其主要活性成分冬凌草甲素具有明显的抗肿瘤和抗菌活性，临床上主要用于治疗急、慢性咽喉炎及扁桃体炎等症，除此之外，冬凌草甲素还具有一定的治疗肝癌、食管癌及胰腺癌的药理作用。因此，鉴于冬凌草丰富的资源优势和良好的药理活性，开发和利用冬凌草中药材的前景十分广阔。赵鹏等在“UPLC测定超声提取冬凌草中冬凌草甲素的含量”《中成药》2011年3月，第33卷第3期，540-542，中公开了采用超高效液相色谱法测定冬凌草中冬凌草甲素的方法，该方法公开了以甲醇为溶剂，超声提取40min，提取液经0.22μm滤膜过滤后，采用WatersAcquityUPLCBEHC18色谱柱（2.1mm×50mm，1.7μm），乙腈-水为流动相梯度洗脱，流速为0.4ml/min，柱温40℃，PDA检测器于242nm波长下对冬凌草甲素的含量进行测定。结果显示，冬凌草甲素在0.022～0.44μg范围内有良好的线性关系（r=0.9997）,平均回收率为97.3%，RSD1.05%。由此可以知道，现有技术已经公开了UPLC在建立冬凌草药材中冬凌草甲素的质量控制过程中的快速准确的测定方法，但对于冬凌草配方颗粒而言，已经不具备饮片性状鉴别的特征，因此，建立UPLC特征图谱对冬凌草配方颗粒具有鉴别意义。
技术实现思路
为建立准确度和精密度高且快速评价冬凌草配方颗粒内在质量的方法，本专利技术提供了一种冬凌草配方颗粒的UPLC特征图谱，构建该UPLC特征图谱的方法以及该UPLC特征图谱在冬凌草甲素检测中的应用，通过UPLC特征图谱的构建及使用，为冬凌草配方颗粒提供一种全面、快速、有效的内在质量检测方法，具有操作简单、稳定可靠、精密度高的特点。本专利技术通过下述技术方案实现：一种冬凌草配方颗粒的UPLC特征图谱的构建方法，包括以下步骤：（1）分别制备冬凌草配方颗粒的供试品溶液、冬凌草对照药材的参照物溶液以及冬凌草甲素的对照品参照物溶液；（2）取步骤（1）制得的供试品溶液和参照物溶液进行超高效液相色谱测定，得到对应的特征图谱；（3）以步骤（2）中参照物溶液的特征图谱为参照图谱，从供试品溶液的特征图谱中选择共有峰，构建冬凌草配方颗粒的UPLC特征图谱。所述步骤（1）中，取冬凌草配方颗粒用70%甲醇溶解后，超声处理15～45min，放冷至20～30℃，摇匀后滤过，取续滤液，即得冬凌草配方颗粒的供试品溶液。所述步骤（1）中，取冬凌草对照药材用70%甲醇溶解后，超声处理15～45min，放冷至20～30℃，摇匀后滤过，取续滤液，即得冬凌草对照药材的参照物溶液。所述步骤（1）中，在冬凌草甲素中加入甲醇制成每1ml含冬凌草甲素60μg的冬凌草甲素的对照品参照物溶液。所述步骤（2）中，超高效液相色谱的测定条件包括：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为150mm，内径为2.1mm，粒径为1.8μm；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.1%磷酸溶液，梯度洗脱；柱温为30℃；流速为0.28ml/min；检测波长为237nm，所述梯度洗脱的过程为：0～5min，流动相A为5％，流动相B为95％，5～8min，流动相A为5～10％，流动相B为95～90％，8～18min，流动相A为10～13％，流动相B为90～87％，18～25min，流动相A为13～18％，流动相B为87～82％，25～30min，流动相A为18％，流动相B为82％，30～45min，流动相A为18～28％，流动相B为82～72％，45～60min，流动相A为28～58％，流动相B为72～42％，60～75min，流动相A为58～80％，流动相B为42～20％，75～78min，流动相A为80％，流动相B为20％。所述步骤（3）中，共有峰包括8个特征峰。供试品特征图谱中应呈现8个特征峰，并应与对照药材参照物色谱峰中的8个特征峰保留时间相对应，与冬凌草甲素参照物峰相应的峰为S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，其中峰1的相对保留时间规定为0.13～0.18，其它特征峰相对保留时间应在规定值的±10％范围之内，规定值为：峰20.40、峰30.83、峰40.87、峰50.91、峰71.56、峰81.61。一种冬凌草配方颗粒的UPLC特征图谱，采用上述方法构建得到。一种冬凌草配方颗粒的UPLC特征图谱在冬凌草配方颗粒质量控制中的应用。现有技术对冬凌草相关产品的质量控制及评价的方法是采用UPLC方法对冬凌草相关产品中的冬凌草甲素进行含量测定而实现的，对于冬凌草配方颗粒，仅通过测定其含量来反映其工业化生产过程中的质量控制，其质量控制方法过于单一，而本专利技术与现有技术相比，具有以下优点及有益效果：（1）本专利技术提供了冬凌草配方颗粒UPLC特征图谱的构建方法，通过以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相，采用梯度洗脱的超高效液相色谱分析得到供试品溶液、参照物溶液的特征图谱，并通过构建冬凌草配方颗粒的对照特征图谱，在本专利技术特定的检测条件下，得到的特征图谱中，冬凌草配方颗粒的色谱峰分布均匀，冬凌草配方颗粒的供试品特征图谱与对照药材参照物的特征图谱高度一致，且色谱峰信息完整。（2）本专利技术可用于冬凌草配方颗粒的检测和质量控制，将待测样品根据其构建的特征图谱与冬凌草对照药材及其冬凌草甲素对照品的特征图谱进行比较，只要待测样品的特征图谱中出现本专利技术所指定的特征图谱，即可确认待测样品为冬凌草配方颗粒，可快速并高效地确保成药质量。（3）本专利技术提供了冬凌草配方颗粒UPLC特征图谱，将冬凌草药材按照本专利技术方法处理后，检测得到的特征图谱与对应冬凌草配方颗粒UPLC特征图谱进行比较，可以对冬凌草配方颗粒的提取工艺进行监控。综上所述，本专利技术方法通过构建冬凌草配方颗粒的UPLC特征图谱，利用其UPLC特征图谱具有的专属性强、稳定性高、重复性好的特性，可全面、快速以及高效的实现冬凌草配方颗粒的鉴别，将该UPLC特征图谱应用于冬凌草配方颗粒的质量控制中，具有操作简单、稳定可靠、精密度高、专属性强、分离度好的优点。附图说明图1为实施例1中冬凌草配方颗粒对照特征图谱。本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种冬凌草配方颗粒的UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：/n（1）分别制备冬凌草配方颗粒的供试品溶液、冬凌草对照药材的参照物溶液以及冬凌草甲素的对照品参照物溶液；/n（2）取步骤（1）制得的供试品溶液和参照物溶液进行超高效液相色谱测定，得到对应的特征图谱；/n（3）以步骤（2）中参照物溶液的特征图谱为参照图谱，从供试品溶液的特征图谱中选择共有峰，构建冬凌草配方颗粒的UPLC特征图谱。/n
【技术特征摘要】
1.一种冬凌草配方颗粒的UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）分别制备冬凌草配方颗粒的供试品溶液、冬凌草对照药材的参照物溶液以及冬凌草甲素的对照品参照物溶液；
（2）取步骤（1）制得的供试品溶液和参照物溶液进行超高效液相色谱测定，得到对应的特征图谱；
（3）以步骤（2）中参照物溶液的特征图谱为参照图谱，从供试品溶液的特征图谱中选择共有峰，构建冬凌草配方颗粒的UPLC特征图谱。
2.根据权利要求1所述的一种冬凌草配方颗粒的UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于：所述步骤（1）中，取冬凌草配方颗粒用70%甲醇溶解后，超声处理15～45min，放冷至20～30℃，摇匀后滤过，取续滤液，即得冬凌草配方颗粒的供试品溶液。
3.根据权利要求1所述的一种冬凌草配方颗粒的UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于：所述步骤（1）中，取冬凌草对照药材用70%甲醇溶解后，超声处理15～45min，放冷至20～30℃，摇匀后滤过，取续滤液，即得冬凌草对照药材的参照物溶液。
4.根据权利要求1所述的一种冬凌草配方颗粒的UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于：所述步骤（1）中，在冬凌草甲素中加入甲醇制成每1ml含冬凌草甲素60μg的冬凌草甲素的对照品参照物溶液。
5.根据权利要求1所述的一种冬凌草配方颗粒的UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于：所述步骤（2）中，超高效液相色谱的测定条件包括：
色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，柱长为150mm，内径为2.1mm，粒径为1.8μm；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.1%磷酸溶液，梯度洗脱；柱温为30℃；流速为0.28ml/...
【专利技术属性】
技术研发人员：周厚成，胡昌江，李莎，郑传奎，吴琴，周维，姚丽琴，
申请(专利权)人：四川新绿色药业科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。