具有不对称膜结构的载药聚合物囊泡及制备方法与在制备治疗急性髓系白血病药物中的应用技术

本发明专利技术公开了具有不对称膜结构的载药聚合物囊泡及制备方法与在制备治疗急性髓系白血病药物中的应用。将带有聚天冬氨酸PAsp的两亲性三嵌段聚合物、靶向两亲性嵌段聚合物和小分子药物共同组装，制备得到靶向具有不对称膜结构的载小分子药物聚合物囊泡。本发明专利技术的载药聚合物囊泡拥有许多独特的优点，包括尺寸小、制备简单可控、可逆交联、体内稳定、靶向递送、细胞内药物富集浓度高、还原敏感、高效杀伤肿瘤细胞、肿瘤生长抑制效果显著等，尤其是本发明专利技术载药囊泡无论针对急性髓系白血病细胞株还是病人细胞，都具有有效的抑制。因此，该聚合物囊泡有望成为简单且集多功能于一身的纳米平台，用于高效及特异性靶向递送药物至肿瘤细胞。

【技术实现步骤摘要】
具有不对称膜结构的载药聚合物囊泡及制备方法与在制备治疗急性髓系白血病药物中的应用
本专利技术属于聚合物纳米药物
，具体涉及可逆交联可降解的载小分子药聚合物囊泡及其制备方法与在急性髓系白血病靶向治疗中的应用。
技术介绍
急性髓系白血病是一种常发的血液病，在所有白血病中约占1/3，其典型特征是髓系细胞的异常增殖和分化。如果不能及时发现和治疗，急性髓系白血病会诱发严重的急性骨髓衰竭的症状，导致病人在几周或者几个月内死亡。2018年，全球有437,033例新发病例，309,006例死亡病例。因此，白血病的治疗面临很严峻的形势。在过去的30年里，急性髓系白血病的标准治疗方案并没有长足发展，一直是阿糖胞苷和柔红霉素（7+3）联合治疗方案，治疗效果也差强人意，5年生存率约27%，复发率超过60%。因此寻求新的治疗方案就变得及其迫切。随着纳米药物的不断发展，纳米药物在改善小分子药的疗效方面具有一定的优势，尤其在药物靶向、药代动力学、给药途径、耐药性和毒副作用方面。因此，通过合理设计，制备理化性质可控的纳米载体、稳定装载药物并能靶向性地提高在肿瘤细胞中的药物浓度是治疗急性髓系白血病的关键。
技术实现思路
本专利技术的目的是公开两亲性三嵌段聚合物、载药聚合物囊泡及其制备方法与应用，具体为一种可逆交联可降解的载小分子药物聚合物囊泡及其制备方法和应用。为达到上述专利技术目的，本专利技术采用如下技术方案：多肽靶向具有不对称膜结构的载药聚合物囊泡，由两亲性三嵌段聚合物、靶向两亲性嵌段聚合物共同装载小分子药物制备。上述多肽靶向具有不对称膜结构的载药聚合物囊泡在制备抗肿瘤药物中的应用，尤其是在制备抗急性髓系白血病药物中的应用。具有不对称膜结构的载药聚合物囊泡在制备抗急性髓系白血病药物中的应用；具有不对称膜结构的载药聚合物囊泡由两亲性三嵌段聚合物装载小分子药物制备。本专利技术中，两亲性三嵌段聚合物，具有如下化学结构式：其中，n为5～15。本专利技术中，所述两亲性三嵌段聚合物中，亲水链段PEG的分子量为3000～8000Da；疏水链段的分子量为PEG分子量的2.5～6倍，疏水链段为聚碳酸酯（PTMC）、聚乳酸（PLA）或者聚己内酯（PCL）；PDTC链段的分子量为疏水链段分子量的11%～30%；PAsp的分子量为PEG分子量的17%～50%。本专利技术的两亲性三嵌段聚合物有亲水链段（m链段）、疏水链段（x+y链段）、PAsp链段（n链段），疏水链段、PAsp链段通过基团连接；所述两亲性三嵌段聚合物表示为PEG-P(TMC-DTC)-PAsp、PEG-P(CL-DTC)-PAsp、PEG-P(LA-DTC)-PAsp，与结构式单元对应。本专利技术中，所述两亲性三嵌段聚合物由两亲性嵌段聚合物制得。制备方法包括以下步骤，将两亲性嵌段聚合物的端羟基通过氯甲酸对硝基苯酯活化，再与PAsp反应制得两亲性三嵌段聚合物。所述两亲性嵌段聚合物中，PEG的分子量为3000～8000Da；疏水链段的总分子量为PEG分子量的2.5～6倍；PDTC的总分子量为疏水链段总分子量的11%～30%；两亲性嵌段聚合物，具有如下化学结构式：PAsp具有如下化学结构式：其中，n为5～15。本专利技术中，靶向两亲性嵌段聚合物由Mal官能团或者NHS官能团功能化的两亲性嵌段聚合物接靶向多肽得到；具体为常规方法。本专利技术中，靶向多肽包括A6、CLL1和iNGR。A6的序列为KPSSPPEE，CLL1的序列为CDLRSAAVC(C-C桥联)，iNGR的序列为CRNGRGPDC(C-C桥联)。本专利技术的靶向多肽优选为A6。本专利技术载药聚合物囊泡由两亲性三嵌段聚合物组装并交联后得到，其具有不对称膜结构，外壳为亲水链段PEG，膜层为可逆交联的疏水链段，内壳为PAsp，可以实现带正电荷小分子药物的高效装载。本专利技术载药聚合物囊泡，由药物、上述两亲性三嵌段聚合物制备；或者由药物、上述两亲性三嵌段聚合物、靶向两亲性嵌段聚合物制备。具体的，以药物、上述两亲性三嵌段聚合物为原料，通过溶剂置换法制备非靶向载药聚合物囊泡。靶向载药聚合物囊泡制备方法有两种，一、前修饰：以药物、上述两亲性三嵌段聚合物、靶向两亲性嵌段聚合物为原料，通过溶剂置换法制备靶向载药聚合物囊泡；二、后修饰：以药物、上述两亲性三嵌段聚合物、Mal官能团或NHS官能团功能化两亲性嵌段聚合物为原料，通过溶剂置换法制备功能化的载药聚合物囊泡，然后在功能化的载药聚合物囊泡表面后修饰靶向得到靶向载药聚合物囊泡。本专利技术优选的靶向载药聚合物囊泡制备方法为前修饰。靶向两亲性嵌段聚合物的用量为两亲性三嵌段聚合物、靶向两亲性嵌段聚合物摩尔量和的5%～35%；官能化两亲性嵌段聚合物的用量为两亲性三嵌段聚合物、官能化两亲性嵌段聚合物摩尔量和的5%～35%。本专利技术中，所述小分子药物为硫酸长春新碱（VCR）、柔红霉素（DNR）、米托蒽醌（MTO）。本专利技术的小分子药物优选为VCR。本专利技术公开了靶向或者非靶向具有不对称膜结构的载药聚合物囊泡，非靶向载药聚合物囊泡由上述两亲性三嵌段聚合物制备，靶向具有不对称膜结构的载药聚合物囊泡由上述两亲性三嵌段聚合物/靶向两亲性嵌段聚合物制备；以及上述具有不对称膜结构的载药聚合物囊泡在制备治疗急性髓系白血病纳米药物中的应用。本专利技术的载药聚合囊泡由药物与聚合物囊泡组成，聚合物囊泡由聚合物交联得到；以聚碳酸酯、A6、Mal官能团、VCR为例，本专利技术载药聚合物囊泡的制备方法可以如下：（1）将PEG-P(TMC-DTC)的端羟基通过氯甲酸对硝基苯酯活化，再与PAsp反应制得PEG-P(TMC-DTC)-PAsp；（2）在PEG-P(TMC-DTC)的PEG端引入Mal官能团，得到功能化两亲性嵌段聚合物Mal-PEG-P(TMC-DTC)；然后偶联靶向，得到靶向两亲性嵌段聚合物A6-PEG-P(TMC-DTC)；（3）以VCR、PEG-P(TMC-DTC)-PAsp为原料，通过溶剂置换法制备可逆交联可降解的非靶向载VCR聚合物囊泡；或者以VCR、PEG-P(TMC-DTC)-PAsp和A6-PEG-P(TMC-DTC)为原料，通过溶剂置换法制备靶向载VCR聚合物囊泡。可以将PEG-P(TMC-DTC)-PAsp聚合物的溶液注射入VCR水溶液中，搅拌后透析，即得到可逆交联可降解的非靶向载VCR聚合物囊泡（cPS-VCR）；具体为将VCR溶于HEPES缓冲液（pH6.8，10mM），然后向其中注入PEG-P(TMC-DTC)-PAsp聚合物的DMSO溶液，搅拌均匀后静置于37℃孵育。用HEPES（pH7.4，10mM）透析即得到cPS-VCR。可以将PEG-P(TMC-DTC)-PAsp和A6-PEG-P(TMC-DTC)聚合物的混合溶液注射入VCR水溶液中，搅拌后透析，即得到可逆交联可降解的靶向载VCR聚合物囊泡（A6-cPS-VCR）；具体为将VCR溶于HEPES缓冲液（pH6.8，10mM），本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.多肽靶向具有不对称膜结构的载药聚合物囊泡，由两亲性三嵌段聚合物、多肽靶向两亲性嵌段聚合物共同装载小分子药物制备；或者由两亲性三嵌段聚合物、官能化两亲性嵌段聚合物共同装载小分子药物后接多肽制备；/n所述小分子药物包括硫酸长春新碱、柔红霉素或者米托蒽醌；/n所述两亲性三嵌段聚合物，具有如下化学结构式：/n

【技术特征摘要】
1.多肽靶向具有不对称膜结构的载药聚合物囊泡，由两亲性三嵌段聚合物、多肽靶向两亲性嵌段聚合物共同装载小分子药物制备；或者由两亲性三嵌段聚合物、官能化两亲性嵌段聚合物共同装载小分子药物后接多肽制备；
所述小分子药物包括硫酸长春新碱、柔红霉素或者米托蒽醌；
所述两亲性三嵌段聚合物，具有如下化学结构式：



其中，n为5～20。


2.根据权利要求1所述多肽靶向具有不对称膜结构的载药聚合物囊泡，其特征在于，所述两亲性三嵌段聚合物中，亲水链段的分子量为3000～8000Da；疏水链段的分子量为亲水链段分子量的2.5～6倍；PDTC链段的分子量为疏水链段分子量的8%～30%。


3.权利要求1所述多肽靶向具有不对称膜结构的载药聚合物囊泡在制备抗肿瘤药物中的应用。


4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述多肽为A6、CLL1或者iNGR。


5.具有不对称膜结构的载药聚合物囊泡在制备抗急性髓系白血病药物中的应用；具有不对称膜结构的载药聚合物囊泡由两亲性三嵌段聚合物装载小分子药物制备；所述小分子药物包括硫酸长春新碱、柔红霉素或者米托蒽醌；所述两亲性三嵌段聚合物，具有如下化学结构式：
其中，...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟志远，顾文星，曲艳，王哲，孟凤华，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32