TAS1R3蛋白作为标志物用于表达该蛋白的肿瘤的治疗、诊断和/或预后目的的用途制造技术

在本发明专利技术中，首次描述了TAS1R3受体作为生物标志物在癌症诊断、监测和疗法中的应用。从这个意义上说，本发明专利技术的作者证明了TAS1R3是肿瘤学中感兴趣的生物标志物，可用于疾病的诊断，并且能够提供相关信息，以便监测演变，选择治疗并选择性地定向治疗分子。已经确认，可以确定针对该受体的疗法，并且还可以定向药物的缀合物和控释系统，例如纳米颗粒，观察到其在原发性、弥散性和转移性肿瘤细胞中的非常有效的胞内累积。另一方面，还证明了TAS1R3存在于循环肿瘤细胞(CTC)中。这些是由原发性肿瘤释放到血流中的肿瘤细胞，被认为是转移发生的关键因素，因此，它们的早期检测将作为转移的早期检测剂，也可用于监测疾病和评估对药物的响应。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】TAS1R3蛋白作为标志物用于表达该蛋白的肿瘤的治疗、诊断和/或预后目的的用途
本专利技术提供了TAS1R3蛋白在上皮肿瘤和其他人类病理学中作为新的标志物和分子靶标的用途。特别地，本专利技术中的一部分为TAS1R3蛋白及其表达产物作为用于治疗、诊断或预后目的的标志物的检测用于正常表达该蛋白的肿瘤中的用途。
技术介绍
在过去的30年中，瘤形成疾病的化疗方面取得了重大进展。这包括在开发新的化疗剂方面的一些进展，尤其是在开发同时药物给药的方案方面。对细胞和组织水平上的肿瘤形成过程以及基本抗瘤药剂作用机理的深入了解，也促使了多种瘤形成疾病的化疗取得进展，包括包括绒毛膜癌、肾母细胞瘤、急性白血病、横纹肌肉瘤、视网膜母细胞瘤、霍奇金氏病和伯基特淋巴瘤。然而，尽管在肿瘤学领域，尤其是化疗领域到目前取得了进展，许多最普遍形式的人类癌症仍然对当前的化疗具有抗性。从这个意义上说，在任何肿瘤治疗方案中，为了使其有效，“总细胞消灭(totalcellannihilation)”的概念至关重要。这个概念认为，为了制定外科手术或化疗或这两者的有效治疗方案，必须对所有所谓的“克隆源性(clonogenic)”恶性细胞(即，具有以不受控制的方式生长和替代任何可以被清除的肿瘤块的能力的细胞)进行总细胞消灭。由于开发实现总细胞消灭的治疗剂和治疗方案的终极需求，某些类型的肿瘤比其他类型的肿瘤对疗法更敏感。例如，软组织肿瘤(例如淋巴瘤)以及血液和血液形成器官的肿瘤(例如白血病)通常比实体瘤(例如癌症)对化疗疗法产生更令人满意的响应。软肿瘤对化疗更敏感的一个原因是化疗干预中淋巴瘤和白血病细胞的物理可及性更高。简而言之，对于大多数化疗剂来说，到达实体瘤块的所有细胞比到达软肿瘤要困难得多，因此，在实体瘤的情况下，要实现总细胞破坏要困难得多。在这方面，为了治疗这样的肿瘤，即实体瘤，化疗剂的剂量显著增加，从而导致副作用，这通常限制了疗法的总体有效性。因此，开发能够治疗实体瘤的令人满意的抗肿瘤剂的策略，涉及设计选择性杀死肿瘤细胞，同时对正常组织产生相对少(如果存在)的不良作用的药剂。由于瘤形成组织和正常组织之间几乎没有定性差异，因此这一目标很难实现。因此，近年来，已经进行了许多努力来尝试鉴定可以作为用于化疗和用于诊断的免疫学靶标的肿瘤特异性“标志物抗原”。从这个意义上讲，本专利技术通过提供一种新的生物标志物来解决这一方面，该生物标志物在原发性肿瘤和弥散性细胞中均在肿瘤细胞的细胞膜中差异表达。另外，该生物标志物的表达与肿瘤细胞的较大的侵袭能力和致瘤能力有关，尤其在缺乏营养的条件下增加其表达，因此能够将该生物标志物用于癌症的诊断/预后。最后，由于该生物标志物是一种膜受体，因此可以设计靶向疗法，例如可以阻止细胞增殖以及细胞迁移、侵袭和扩散的能力的配体(诸如小分子、肽或拮抗剂)。因此，在过去，免疫毒素已用于选择性地靶向实体瘤的癌细胞。免疫毒素是特异性的靶药剂(通常是针对肿瘤的抗体或其片段)与细胞毒性剂(例如毒素部分)的缀合物。靶药剂被设计为将毒素导向携带靶抗原的细胞，并杀死该细胞。另一方面，已经开发了“第二代”免疫毒素，例如开发了使用去糖基化蓖麻毒素A链的免疫毒素，以防止免疫毒素的肝截留并降低肝毒性(Blakeyetal.,1987a；b)，以及开发了具有新交联键的免疫毒素以提供更高的免疫毒素体内稳定性(Thorpeetal.,1988)。免疫毒素已显示有效治疗小鼠(Thorpeetal.,1988,Ghetieetal.,1991,Griffinetal.,1988a；b)以及人(Vitettaetal.,1991)的淋巴瘤和白血病。因此，本专利技术提供了可用于合成免疫毒素的针对本专利技术生物标志物的特异性靶药剂。另外，新的生物标志物(例如本专利技术中详述的生物标志物)的鉴定，对于用于诊断和预后目的的个性化药物的开发，以及对于靶向疗法的选择和治疗的监测是极其有用的。个性化医学的前提基础在于，每个肿瘤都是唯一的，并且会随时间动态变化，因此拥有允许始终确定最佳治疗方法的工具非常重要。在个性化医学领域，液体活检以其决定性的作用脱颖而出。今天，我们知道肿瘤的起源是由于遗传改变的出现，所述的遗传改变影响细胞的增殖和存活机制并且在其分子组成上复杂且异质。另一方面，一旦诊断出癌症，就必须通过分析DNA、RNA和蛋白质谱来表征原发性肿瘤或其转移。在同一肿瘤内共存着不同的肿瘤克隆，标志着肿瘤的演变以及对各种疗法的抗性，因此，创造了术语“动态肿瘤”。这些易于随时间变化，因此，确定各个时间点的优势克隆是选择最有效治疗策略的关键。非小细胞肺癌(NSCLC)的诊断通常是通过CT扫描(一种敏感但非特异性的技术)进行的，这需要通过侵入性程序(活检)进行额外的随访，这就是为什么临床实践需要提供与诊断成像相关的信息的新的生物标志物，以及能够提供信息而无需采用入侵性程序(诸如活检)的生物标志物的原因。
技术实现思路
在本专利技术中，首次描述了TAS1R3受体作为生物标志物在癌症诊断、监测和治疗中的用途。从这个意义上说，本专利技术的作者证明了TAS1R3是肿瘤学中感兴趣的生物标志物，可用于疾病的诊断，并且能够提供相关信息，以便监测演变、选择治疗并选择性地指导治疗分子。已经确定，可以确定针对该受体的疗法，并且还可以指导缀合物和受控药物释放系统(例如纳米颗粒)，从而非常有效地观察缀合物和受控药物释放系统在原发性、弥散性和转移性肿瘤细胞中的胞内积累。另一方面，还证明了TAS1R3存在于循环肿瘤细胞(CTC)中。这些是由原发性肿瘤释放到血流中的肿瘤细胞，被认为是转移发生的关键因素，因此，它们的早期检测将作为转移的早期检测指标，也可用于监测该疾病和评估其对药物的反应。总的来说，这一发现为用化合物功能化任何类型的分子以用作针对肿瘤细胞，特别是针对CTC(循环肿瘤细胞)和原发性、弥散性或转移性肿瘤细胞的药理和/或诊断载体打开了大门，所述化合物充当针对TAS1R3受体的配体，优选是选自抗体、抗体片段、适体、肽或低分子疏水或亲水分子(例如降甜剂(lactisole))的配体，以及能够与TAS1R3受体结合的配体-药物或配体-放射性同位素缀合物，或用反应性基团功能化的配体。附图说明图1.使用IngenuityPathwayAnalysis(IPA)软件针对差异表达进行生物信息学分析以解释CTC的生物学特性。上图：主要网络、分子和细胞功能以及主要的经典途径和相应的p值。下图：根据CTC的表达谱得到的针对细胞运动途径、脂质代谢和碳水化合物的相互作用网络。图2.与健康捐献者的对照组(n＝16)相比，对从转移性非小细胞肺癌(NSCLC)患者(n＝42)分离的循环肿瘤细胞中的TAS1R3表达进行验证。图3.转移性肺癌(NSCLC)患者的肿瘤组织相比于非肿瘤对照组织(n＝6)中TAS1R3的表达。图4.以U87细胞系的值为参照，TAS1R3受体(mRNA)在不同肿瘤类型的不同细胞系：结肠癌(SW620和SW480)、肺癌(A549和H1755)、胶质母细胞瘤(U87和U118)和胰腺癌(MiaPaC本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.TAS1R3膜细胞受体在体外作为肿瘤生物标志物的用途。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180115 EP 18382013.31.TAS1R3膜细胞受体在体外作为肿瘤生物标志物的用途。


2.用于体外诊断患者体内的肿瘤存在、瘤形成或转移性存在的方法，所述方法包括以下步骤：
a)首先从患者分离至少一种生物样品，确定TAS1R3在所述生物样品的细胞中的表达水平，和
b)将所述表达水平与健康个体的生物样品，或健康器官或组织的一部分的生物样品，或没有肿瘤存在的生物样品中的TAS1R3受体的表达水平进行比较，或与参考值进行比较，
其中，与健康个体的生物样品，或健康器官或组织的一部分的生物样品，或没有肿瘤存在的生物样品中的TAS1R3受体的表达水平相比，或与参考值相比，所述表达水平增加则表示患者中的肿瘤存在、瘤形成或转移性存在。


3.用于体外诊断患有肿瘤存在、瘤形成或转移性存在的患者的临床病程的方法，所述方法包括以下步骤：
a)首先从患者分离至少一种生物样品，确定TAS1R3在所述生物样品的细胞中的表达，和
b)将所述表达水平与在获得步骤a)的生物样品的时间之前获得的同一患者生物样品中的TAS1R3受体的表达水平进行比较，或与参考值进行比较，
其中，与在获得步骤a)的生物样品的时间之前获得的同一患者生物样品中的TAS1R3受体的表达水平相比，或与参考值相比，所述表达水平增加则表示患者的临床演变消极。


4.用于体外监测患有肿瘤存在、瘤形成或转移性存在的患者的临床病程的方法，所述方法包括以下步骤：
a)首先从患者分离至少一种生物样品，确定TAS1R3在所述生物样品的细胞中的表达水平，和
b)将所述表达水平与在获得步骤a)的生物样品的时间之前获得的同一患者生物样品中的TAS1R3受体的表达水平进行比较，或与参考值进行比较，
其中，与在获得步骤a)的生物样品的时间之前获得的同一患者生物样品中的TAS1R3受体的表达水平相比，或与参考值相比，表达水平增加则表示患者的临床演变消极。


5.用于监测患有肿瘤存在、瘤形成或转移性肿瘤的患者对治疗的响应的方法，包括以下步骤：
a)首先从患者分离至少一种生物样品，确定TAS1R3在所述生物样品的细胞中的表达水平，和
b)将所述表达水平与在获得步骤a)的生物样品的时间之前获得的同一患者生物样品中的TAS1R3受体的表达水平进行比较，或与参考值进行比较，
其中，与在获得步骤a)的生物样品的时间之前获得的同一患者生物样品中的TAS1R3受体的表达水平相比，或与参考值相比，表达水平增加则表示缺乏对治疗的响应。


6.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：玛利亚·德拉·弗恩特·弗莱瑞，拉斐尔·洛佩斯·洛佩斯，玛尔塔·阿隆索·诺西洛，阿比·朱迪特·瓦兹奎兹·里奥斯，
申请(专利权)人：圣地亚哥德孔波斯特拉健康研究所基金会FIDIS，加利戈健康服务，
类型：发明
国别省市：西班牙;ES