一种野菊花药材及配方颗粒薄层色谱的鉴别方法及应用组成比例

本发明专利技术涉及一种野菊花药材及配方颗粒的薄层鉴别方法，通过将野菊花药材及配方颗粒薄层色谱图与野菊花对照药材与绿原酸、蒙花苷、4,5‑二‑O‑咖啡酰奎宁酸、3,5‑O‑二咖啡酰基奎宁酸、木犀草苷、木犀草素对照品色谱图相比，能快速有效的鉴定野菊花药材及配方颗粒中有效成分。首次利用薄层色谱法鉴定野菊花药材及配方颗粒中绿原酸、4,5‑二‑O‑咖啡酰奎宁酸、3,5‑O‑二咖啡酰基奎宁酸三种同分异构体与木犀草苷、木犀草素两种天然黄酮类化合物，可以利用本发明专利技术在硅胶板相应Rf位置，对其进行富集，分离、纯化，制备绿原酸及其同分异构体成分与黄酮类化合物，具有很好商业价值。本发明专利技术操作环保便捷，重复性，专属性和较好，具有良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种野菊花药材及配方颗粒薄层色谱的鉴别方法及应用
本专利技术涉及中药质量控制领域，具体而言，涉及一种野菊花药材及配方颗粒薄层色谱的鉴别方法及应用。
技术介绍
野菊花为菊科植物野菊(ChrysanthemumindicumL.)的干燥头状花序。其味苦、辛、凉，清热解毒，防治预防流行性感冒、治疗高血压、肝炎效果明显。野菊花的功效与其所含物质成分密切相关，文献报道野菊花中含有绿原酸、蒙花苷、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、木犀草素，木犀草苷等多种成分，其中4,5-二咖啡酰基奎宁酸、3,5-二咖啡酰基奎宁酸为绿原酸同分异构体。木犀草苷、木犀草素是一种天然黄酮类化合物，具有治疗止咳、祛痰、消炎的功效。野菊花配方颗粒是以野菊花药材经过提取、浓缩、干燥、制粒而成，其保留了野菊花中多种有效成分。传统的野菊花鉴别中采用三氯甲烷、丁酮有毒试剂，以蒙花苷、绿原酸为指标成分，鉴别成分单一，不能从整体上反应野菊花药材质量和功效成分。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种野菊花药材及配方颗粒的薄层鉴别方法，该方法提高了效率，节省了成本，对含有相同物质成分中药及配方颗粒鉴定具有重要意义。为了实现上述目的，本专利技术所采用的技术方案是：一种野菊花药材及配方颗粒的薄层鉴别方法，包括以下步骤：a、对照品溶液的制备：取绿原酸、蒙花苷、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、木犀草苷、木犀草素对照品，加甲醇使溶解，作为对照品溶液；>b、对照药材溶液的制备：取野菊花对照药材，加80％甲醇，超声，滤过，取滤液作为对照药材溶液；c、供试品溶液的制备：取野菊花药材与野菊花配方颗粒粉末，加80％甲醇，超声处理，滤过，滤液作为供试品溶液；d、薄层层析测定：取对照品溶液、对照药材溶液、供试品溶液分别点于同一硅胶G板上，以乙酸乙酯-正丁醇-甲酸-水为展开剂，晾干，喷以三氯化铝试液，加热，置紫外光下检视。进一步地，步骤a中所述甲醇为体积浓度80～100％的甲醇，所述对照品溶液，每1ml各含绿原酸、蒙花苷、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、木犀草苷、木犀草素对照品0.2～3mg。进一步地，步骤b中所述对照药材与甲醇的质量体积比为(4～6):60g/ml，优选为1:15g/ml；所述提取为超声提取，超声提取时间为15～30min，优选15min。进一步地，步骤c所述野菊花药材、野菊花配方颗粒粉末与80％甲醇的质量体积比为(4～6):60g/ml，优选6:60g/ml；所述提取处理为超声提取，超声提取时间为15～30min，优选15min。进一步地，步骤d中所述供试品、对照药材、对照品取样量为2～10μL。进一步地，步骤d中乙酸乙酯-正丁醇-甲酸-水为常用无毒试剂，体积比为(15～10):(1～3):(0.5～4)：(0.5～5)，优选10：1：0.5:0.5；所述三氯化铝试液浓度为1～5％(w/v)溶液。进一步地，步骤d所述加热温度为70+5℃，时间3-5min；所述紫外光波长为365nm。进一步地，步骤d所述检视步骤为供试品溶液分别与对照品溶液、对照药材溶液色谱图比对，判断在相应位置是否显示相同颜色荧光斑点。本专利技术对野菊花药材及配方颗粒薄层方法进行开发，采用常用低毒试剂进行实验，同时鉴定了野菊花药材及配方颗粒中六种成分，建立了野菊花药材及配方颗粒中多成分有效成分薄层鉴别方法，相较于高效液相指纹图谱技术，提高了效率，节省了成本，对含有相同物质成分中药及配方颗粒鉴定具有重要意义。本专利技术首次利用薄层色谱法鉴定野菊花药材及配方颗粒中绿原酸、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸三种同分异构体与木犀草苷，木犀草素两种天然黄酮类化合物，可以利用本专利技术在硅胶板相应Rf位置，对其进行富集，分离、纯化，制备绿原酸及其同分异构体成分与黄酮类化合物，具有很好商业价值。本专利技术通过将野菊花药材及配方颗粒薄层色谱图与野菊花对照药材与绿原酸、蒙花苷、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、木犀草素，木犀草苷对照品色谱图相比，相对比移值在区间0.3-0.98之间。能快速有效的鉴定野菊花药材及配方颗粒中有效成分。本专利技术操作简便，重复性，专属性和较好，具有良好的应用前景。附图说明图1为实施例1的野菊花及配方颗粒薄层色谱图；图2为实施例2的野菊花及配方颗粒薄层色谱图；图3为实施例3的野菊花及配方颗粒薄层色谱图；图4为应用例1含有相似成分不同种类配方颗粒薄层色谱图；图5为对比例1野菊花配方颗粒色谱图；图6为对比例2野菊花药材薄层色谱图。具体实施方式以下通过具体实施方式对本专利技术技术方案做进一步解释说明。仪器与试药及实验材料薄层成像系统(biostepDD70),薄层显色加热器(YOKO-XR)烟台海洋化工研究院(硅胶G板)，青岛海洋(硅胶G板)。试药：乙酸乙酯、正丁醇、甲酸等化学试剂均为分析纯，水为纯净水。实验材料:野菊花配方颗粒(批号：YJHKL01、YJHKL02、YJHKL03、YJHKL04、YJHKL05、YJHKL06)；野菊花药材(批号：YJHYC01、YJHYC02、YJHYC03、YJHYC04、YJHYC05、YJHYC06)；小蓟配方颗粒(XJKL01)；密蒙花配方颗粒(MMHKL01)；菊花配方颗粒(JHKL01)；忍冬藤配方颗粒(RDTKL01)；炒苍耳子配方颗粒(CCEZKL01)；茵陈配方颗粒(YCKL01)；石菖蒲配方颗粒(SCPKL01)；野菊花对照药材(中国药品生物制品检定所提供，批号：120995-201506)。绿原酸、蒙花苷、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、木犀草素，木犀草苷对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号：110753-201415、111528-201509、111894-201202、111720-201609、111520-201605)。实施例1一种野菊花药材及配方颗粒的薄层鉴别方法，包括以下步骤：a、取绿原酸、蒙花苷、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、木犀草素、木犀草苷对照品对照品，加80％浓度的甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。b、野菊花对照药材1g，加80％甲醇15ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。c、取待测样品1g，加80％甲醇15ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。d、照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取供试品溶液2μl、对照药材溶液10μL、对照品溶液5μL，分别点于同一高效硅胶G版上，以乙酸乙酯-正丁醇-甲酸-水按照10：1：0.5：0.5的比例为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，浓度为0.02g/ml，在70℃加热5分钟，在紫外本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种野菊花药材及配方颗粒的薄层鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：/na、对照品溶液的制备：取绿原酸、蒙花苷、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、木犀草苷、木犀草素对照品，加甲醇使溶解，作为对照品溶液；/nb、对照药材溶液的制备：取野菊花对照药材，加80％甲醇，超声，滤过，取滤液作为对照药材溶液；/nc、供试品溶液的制备：取野菊花药材与野菊花配方颗粒粉末，加80％甲醇，超声处理，滤过，滤液作为供试品溶液；/nd、薄层层析测定：取对照品溶液、对照药材溶液、供试品溶液分别点于同一硅胶G板上，以乙酸乙酯-正丁醇-甲酸-水为展开剂，晾干，喷以三氯化铝试液，加热，置紫外光下检视。/n

【技术特征摘要】
1.一种野菊花药材及配方颗粒的薄层鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：
a、对照品溶液的制备：取绿原酸、蒙花苷、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、木犀草苷、木犀草素对照品，加甲醇使溶解，作为对照品溶液；
b、对照药材溶液的制备：取野菊花对照药材，加80％甲醇，超声，滤过，取滤液作为对照药材溶液；
c、供试品溶液的制备：取野菊花药材与野菊花配方颗粒粉末，加80％甲醇，超声处理，滤过，滤液作为供试品溶液；
d、薄层层析测定：取对照品溶液、对照药材溶液、供试品溶液分别点于同一硅胶G板上，以乙酸乙酯-正丁醇-甲酸-水为展开剂，晾干，喷以三氯化铝试液，加热，置紫外光下检视。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤a中所述甲醇为体积浓度80～100％的甲醇，所述对照品溶液，每1ml各含绿原酸、蒙花苷、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、木犀草苷、木犀草素对照品0.2～3mg。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤b中所述对照药材与甲醇的质量体积比为(4～6):60g/ml，优选为1:15g/m...

【专利技术属性】
技术研发人员：靳步昆，胡辉，李清安，龚华梦，翟红伟，龙林，成焕波，吴新，丁苗，陈素娟，徐凯，赵玉婷，黄茜茜，程佩佩，廖子蔚，
申请(专利权)人：劲牌持正堂药业有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42