一种活化凝血因子XIIIA与巴曲酶BTX融合蛋白及其构建方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种活化凝血因子XIIIA与巴曲酶BTX融合蛋白及其构建方法与应用，融合蛋白包括通过将两个具有凝血活性的人活化凝血因子XIIIA和巴曲酶BTX分别连接到柔性肽linker的两端，通过融合表达得到FXIIIA‑BTX融合蛋白，其中人活化凝血因子XIIIA的DNA序列如SEQ ID NO.1所示，巴曲酶BTX的DNA列如SEQ ID NO.2所示，柔性肽linker的DNA序列如SEQ ID NO.3所示，FXIIIA‑BTX融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。

【技术实现步骤摘要】
一种活化凝血因子XIIIA与巴曲酶BTX融合蛋白及其构建方法与应用
本专利技术属于生物
，具体涉及一种活化凝血因子XIIIA与巴曲酶BTX融合蛋白及其构建方法与应用。
技术介绍
凝血功能是指使血液由流动状态变成不能流动的凝胶状态的过程的一种能力。广义的凝血功能，除了机体在血管受损时所具有的由凝血因子按照一定顺序相继激活而生成凝血酶最终使纤维蛋白原变成纤维蛋白而促使血液凝固的能力外，还包括血小板的活性。凝血过程分为凝血酶原激活复合物的形成、凝血酶原的激活和纤维蛋白的生成三个基本步骤。在术前检测患者有无凝血功能的异常，可有效防止在术中及术后出现出血不止等意外。而抗血小板治疗过程中也要随时检测凝血功能，以评价疗效、预防出血风险等。因此，凝血功能检测是医院的常规项目，其中的血小板功能检测就用到由活化凝血因子XIIIA与巴曲酶复配而成的检测试剂盒，不同厂家有不同的名称，有的称为P1、P2、P3试剂，有的称为A、B、C试剂，用血栓弹力图仪(thrombelastographcoagulationanalyzer,TEG)进行检测。该法本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种活化凝血因子XIIIA与巴曲酶BTX融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包括通过将两个具有凝血活性的人活化凝血因子XIIIA和巴曲酶BTX分别连接到柔性肽linker的两端，通过融合表达得到FXIIIA-BTX融合蛋白，其中人活化凝血因子XIIIA的DNA序列如SEQID NO.1所示，巴曲酶BTX的DNA序列如SEQ ID NO.2所示，柔性肽linker的DNA序列如SEQ IDNO.3所示，FXIIIA-BTX融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种活化凝血因子XIIIA与巴曲酶BTX融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包括通过将两个具有凝血活性的人活化凝血因子XIIIA和巴曲酶BTX分别连接到柔性肽linker的两端，通过融合表达得到FXIIIA-BTX融合蛋白，其中人活化凝血因子XIIIA的DNA序列如SEQIDNO.1所示，巴曲酶BTX的DNA序列如SEQIDNO.2所示，柔性肽linker的DNA序列如SEQIDNO.3所示，FXIIIA-BTX融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.5所示。


2.如权利要求1所述的一种活化凝血因子XIIIA与巴曲酶BTX融合蛋白构建方法，其特征在于，具体步骤如下：
1)将编码活化的人凝血因子XIIIA的基因进行密码子优化设计，使其易于在大肠杆菌中高水平表达；
2)将编码巴西矛头蛇的巴曲酶BTX基因进行密码子优化设计，使其易于在大肠杆菌中高水平表达；
3)将步骤1)和步骤2)中编码的人活化凝血因子XIIIA和巴曲酶BTX的基因通过优化的柔性肽linker序列连接，使人活化凝血因子XIIIA和巴曲酶BTX的基因融合表达为一条FXIIIA-BTX多肽分子，得到FXIIIA-BTX融合基因；
4)将步骤3)中的FXIIIA-BTX融合基因构建到大肠杆菌原核表达载体pCold-SUM...

【专利技术属性】
技术研发人员：马永平，
申请(专利权)人：重庆医科大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50