【技术实现步骤摘要】
结合氘水培养和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析的快速抗生素敏感性测试方法
本专利技术涉及医疗检测领域，尤其是涉及一种结合氘水培养和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析(D2O-MALDI)的快速抗生素敏感性测试(AST)方法。
技术介绍
细菌感染是当今世界高发病率和死亡率的疾病之一，给全球公共卫生带来了巨大威胁。最新的研究表明，在全球范围内，由耐药微生物引起的感染的绝对数量在不断增加。据悉，全球每年死于耐药性细菌感染的有70万人，如果没有实施有效的措施减少耐药性的传播和专利技术新的抗生素，在2050年，这个数字将达到1000万。而发展快速、准确的抗生素敏感性测试(AST)方法是解决抗生素耐药性不断增加的关键。当前AST的金标准是在抗生素存在的情况下检测细菌的生长，虽然速度缓慢(从收到临床样本开始，通常需要2～7天时间，其中包括1～5天的细菌预培养和16～24小时的AST)，但通过检测可以直接回答抗生素是否抑制病原体生长的关键问题。相比之下，较新的基因分型方法不能满足通用的AST。作为临床诊断，全基...
【技术保护点】
1.一种结合氘水培养和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析的快速抗生素敏感性测试方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1：配制抗生素储备液；/nS2：通过两倍稀释法将S1中得到的抗生素储备液稀释成一系列的浓度，以此用于快速抗生素敏感性测试，得到配置好的工作液；/nS3：在培养容器中对细菌进行培养，将S2得到的工作液加入培养容器中，同时设置增加对照组，对细菌进行孵育；/nS4：将孵育好的细菌离心，洗涤，之后将细菌点至MALDI靶板上，在空气中干燥后覆盖上基质溶液；/nS5：采用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱对S4中得到的样品点进行分析，得到孵育后的细菌指纹谱图；/nS6：...
【技术特征摘要】
1.一种结合氘水培养和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析的快速抗生素敏感性测试方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：配制抗生素储备液；
S2：通过两倍稀释法将S1中得到的抗生素储备液稀释成一系列的浓度，以此用于快速抗生素敏感性测试，得到配置好的工作液；
S3：在培养容器中对细菌进行培养，将S2得到的工作液加入培养容器中，同时设置增加对照组，对细菌进行孵育；
S4：将孵育好的细菌离心，洗涤，之后将细菌点至MALDI靶板上，在空气中干燥后覆盖上基质溶液；
S5：采用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱对S4中得到的样品点进行分析，得到孵育后的细菌指纹谱图；
S6：选取氘代蛋白峰D与对应的未氘代的峰ND，将其峰强比值ID/IND作为代谢活性判断依据，同时对比不同浓度对应的代谢活性，以此实现抗生素存在下最小抑菌浓度的测定。
2.根据权利要求1所述的一种结合氘水培养和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析的快速抗生素敏感性测试方法，其特征在于，S2中采用的稀释剂为氘水配制的肉汤培养基。
3.根据权利要求2所述的一种结合氘水培养和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析的快速抗生素敏感性测试方法，其特征在于，所述培养基中氘水含量大于75vol％。
4.根据权利要求1所述的一种结合氘水培养和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析的快速抗生素敏感性测试方法，其特征在于，S3中，将S2得到的工作液加入培养容器中，使得细菌的...
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