【技术实现步骤摘要】
一种用于鉴定草鱼出血热病毒的引物及探针以及检测方法
本专利技术涉及病毒检测领域,具体涉及一种用于鉴定草鱼出血热病毒的引物及探针以及检测方法。
技术介绍
草鱼出血热病毒属于呼肠弧病毒科,感染病鱼的各个器官组织呈现不同程度的充血式出血。目前这类病毒最有效可靠的检测方法是荧光pcr,文献没有查阅到该病毒相关的检测研究,市面上草鱼出血热病毒供应商有上海康朗生物科技有限公司、上海烜雅生物科技有限公司等。本专利技术旨在研发一种快速灵敏检测草鱼出血热病毒的方法,帮助水产养殖早期发现病毒,及时处理减少损失。
技术实现思路
针对现有技术的不足,本专利技术提出一种能有效评估草鱼出血热病毒的检测方法,从草鱼出血热病毒基因序列中找到一段特征序列,针对该序列设计一组灵敏结合目的片段扩增的上下游引物,探针上标记了高荧光强度的Fam发光基团,提高检测灵敏度。本专利技术的技术方案是这样实现的:一种用于鉴定草鱼出血热病毒的引物,其特征在于,包括有:上游引物:5′-CTTCCGCTATTCCGTCTC-3′下 ...
【技术保护点】
1.一种用于鉴定草鱼出血热病毒的引物,其特征在于,包括有:/n上游引物:5′-CTTCCGCTATTCCGTCTC-3′/n下游引物:5′-CTCCATCATCGTGCTGTT-3′/n
【技术特征摘要】
1.一种用于鉴定草鱼出血热病毒的引物,其特征在于,包括有:
上游引物:5′-CTTCCGCTATTCCGTCTC-3′
下游引物:5′-CTCCATCATCGTGCTGTT-3′
2.根据权利要求1所述的一种用于鉴定草鱼出血热病毒的引物,其特征在于,所述引物对应的特征序列如SEQIDNO.1。
3.根据权利要求2所述的一种用于鉴定草鱼出血热病毒的引物,其特征在于,所述引物对应的SEQIDNO.1特征序列的探针的核苷酸序列为:
5′-FamCTCTTTCCCCACGTCCACTTTTCCBHQ1-3′
4.根据权利要求3所述的一种用于鉴定草鱼出血热病毒的引物,其特征在于,所述述探针带有标记物。
5.根据权利要求3所述的一种用于鉴定草鱼出血热病毒的引物,其特征在于,所述标记物为高荧光强度的Fam发光基团。
6.一种用于鉴定草鱼出血热病毒的检测方法,其特征在于,包括以下检测方法:
步骤一:用移液枪取200μl待测样品,并加入到1.5ml离心管中;
步骤二:在离心管中加入500μl裂解液,震荡混匀,室温静置;
步骤三:将离心管中的溶液全部转移至吸附柱中并盖上管盖,然后摒弃废液,将吸附柱放回收集管中;
步骤四:打开吸附柱盖子,加入600μl洗涤液,并盖上管盖,保持12000转离心30s,然后摒弃废液,将吸附柱放回收集...
【专利技术属性】
技术研发人员:汪忠荣,毕峻龙,黎明,
申请(专利权)人:深圳市莱孚生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:广东;44
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