用于检测棉花曲叶病毒的RPA引物、试剂盒及其检测方法与应用技术

本发明专利技术公开了用于检测棉花曲叶病毒的RPA引物、试剂盒及其检测方法与应用。其中，所述RPA引物的序列为：CLCV‑F：5'‑TATGGATGGATGAAAATATAAAGACCAGGAAT‑3'(SEQ ID NO.1)；CLCV‑R：5'‑GTATTTTCCTGCTTCCTGTTGATTGTAAAC‑3'(SEQ ID NO.2)。并基于此建立一种RPA检测方法。本发明专利技术中的RPA方法简便易操作、快速高效、特异性强、灵敏度高，相较于传统的PCR技术，更适合推广与应用。

【技术实现步骤摘要】
用于检测棉花曲叶病毒的RPA引物、试剂盒及其检测方法与应用
本专利技术属于生物检测领域，具体涉及用于检测棉花曲叶病毒的RPA引物、试剂盒及其检测方法与应用。
技术介绍
棉花曲叶病是对棉花生产具有极大危害的病毒病害，在世界范围内对棉花生带来了巨大经济损失。目前，国际上已报道至少有10种病毒与该病害有关，其中木尔坦棉花曲叶病毒(CottonleafcurlMultanvirus，CLCuMuV)是主要病原之一。棉花曲叶病病原均属双生病毒科(Geminiviridae)菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)成员，由烟粉虱以持久方式传播，可以嫁接传播，但不能通过机械摩擦接种和种子带毒传播。2007年，农业部正式将棉花曲叶病毒列入中国进境植物检疫性有害生物名录，成为一种检疫性病害。中国是世界上最大的棉花生产国和消费国，适宜种植棉花的区域广泛。虽然该病毒并未在长江流域、黄河流域和西北内陆三大棉区出现传播危害，但其对于多种锦葵科作物的侵害也不容小视，且其传播介体烟粉虱分布广泛，该病害容易随着烟粉虱传播和扩散。目前，用于检测棉花曲本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种RPA引物，其特征在于，所述RPA引物的序列为：/nCLCV-F：5'-TATGGATGGATGAAAATATAAAGACCAGGAAT-3'；/nCLCV-R：5'-GTATTTTCCTGCTTCCTGTTGATTGTAAAC-3'。/n

【技术特征摘要】
1.一种RPA引物，其特征在于，所述RPA引物的序列为：
CLCV-F：5'-TATGGATGGATGAAAATATAAAGACCAGGAAT-3'；
CLCV-R：5'-GTATTTTCCTGCTTCCTGTTGATTGTAAAC-3'。


2.一种检测试剂，其特征在于，所述检测试剂中含有权利要求1或2所述的RPA引物。


3.一种检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒中包括权利要求1所述的RPA引物或权利要求2所述的检测试剂。


4.根据权利要求3所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒中还包括RPA重组酶试剂。


5.一种棉花曲叶病毒的RPA检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取待测样品DNA；
(2)将权利要求所述1所述RPA引物和待测样品DNA加入至TwistAmpBasicRPA冻干酶粉管进行RPA扩增，得到扩增产物；
(3)分析步骤(2)得到的所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：汤亚飞，何自福，佘小漫，李正刚，于琳，蓝国兵，
申请(专利权)人：广东省农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：广东;44