一种DGKγ基因的shRNA及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种DGKγ基因的shRNA，所述shRNA核苷酸序列为SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2所示。本发明专利技术采用RNAi方法下调人DGKγ基因的表达后可有效地抑制神经干细胞的增殖、迁移，影响分化后神经元的发育。本发明专利技术筛选了转染效率高，干扰效率高的shRNA或者包含该序列的核酸构建体、慢病毒，并能够特异性抑制神经干细胞的增殖、迁移，从而影响脑部发育，为脑发育相关疾病的治疗开辟新的方向。

【技术实现步骤摘要】
一种DGKγ基因的shRNA及其应用
本专利技术涉及生物医药研究领域，特别是涉及一种DGKγ基因的shRNA及其应用。
技术介绍
RNA干扰(RNAinterference，RNAi)是机体内广泛存在的一种双链RNA介导的序列特异性基因沉默现象，因其可高效特异地阻断体内特定基因的表达导致特异基因沉默而被广泛应用于科学研究和基因治疗。其中，shRNA即小发卡RNA或者短发卡RNA(asmallhairpinRNAorshorthairpinRNA，shRNA)是一段具有茎环结构的外源性RNA序列，能够在细胞内加工成siRNA，siRNA进而与蛋白质结合形成RNA诱导沉默复合物(RNA-inducedsilencingcomplex，RISC)结合到同源的mRNA上并诱导其降解。shRNA的作用具有严格的靶向性，特异性靶位点的选择具有位置效应，不同的靶位点对同一基因的干扰效率有着很大的差异。甘油二酯激酶(diacylglycerolkinase，DGK)是一种保守的脂质激酶，可以催化甘油二酯(diacylglycerolkinase，DG)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种DGKγ基因的shRNA，其特征在于，所述shRNA核苷酸序列为SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种DGKγ基因的shRNA，其特征在于，所述shRNA核苷酸序列为SEQIDNO:1和/或SEQIDNO:2所示。


2.一种shRNA表达载体，其特征在于，所述shRNA表达载体包括如权利要求1所述的shRNA。


3.一种如权利要求2所述的shRNA表达载体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
(1)根据DGKγ基因的序列设计shRNA；
(2)将shRNA插入表达载体中，得到所述shRNA表达载体。


4.一种重组慢病毒，其特征在于，所述重组慢病毒采用如权利要求2所述的表达载体与包装辅助质粒共转染哺乳细胞制备得到。


5.一种如权利要求1所述的shRNA、如权利要求2所述的shRNA表达载体或如权利要求4所述的重组慢病毒在制备抑制神经干细胞中DGKγ基因或蛋白表达的试剂盒中的应用和/或制备抑制神经干细胞的增殖、迁移，分化后神经元的发育的产品中的应用。


6.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞转染有如权利要求1所述的shRNA、如权利要求2所述的shRNA表...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢建山，杜家政，马逸丹，李蕾，黄绎格，师亮，崔慧林，曹锡梅，
申请(专利权)人：山西医科大学，
类型：发明
国别省市：山西;14