一种提取高分子银耳多糖的银耳栽培方法技术

一种提取高分子银耳多糖的银耳栽培方法，涉及银耳栽培技术领域，解决了现有栽培技术所获得的银耳多糖分子量低的问题，包括低温驯化获得银耳孢子，新型培养基配制，进行拌种，洁净区中将下层香灰菌丝和上层银耳菌丝1∶2进行混匀后12小时内接种；对银耳栽培过程进行了优化，包括银耳菌株驯化，新型培养基配制、灭菌、接种和优化培养条件；银耳菌株经过耐低温驯化后，适应生长温度降低，在银耳生长发育过程中伴生菌香灰菌分泌的纤维素酶、半纤维素酶、多酚氧化酶得到较好控制；为优化银耳初期生长，培养基加入重要原料银耳多糖提取废渣、甘蔗渣，保证银耳初期正常生长发育；培养基中银耳多糖提取废渣回收利用，也解决了废渣处理的环保问题。

【技术实现步骤摘要】
一种提取高分子银耳多糖的银耳栽培方法
本专利技术涉及一种银耳栽培方法，尤其涉及一种提取高分子银耳多糖的银耳栽培方法。
技术介绍
银耳，又名白木耳、雪耳，食、药两用，其营养价值和药用功效极高，是非常珍贵的食用真菌，有“菌中之冠”的美称。我国银耳的研究与栽培在全世界处于领先地位，以四川通江和福建古田等地区为银耳的道地产区，分别以段木（青杠木）栽培和代料（瓶栽、袋栽）栽培为代表；通江段木银耳的产量和质量居全国首位，全国90％的银耳为古田代料银耳。对银耳的研究主要集中在生物学特性、生产栽培、病虫害防治、加工技术、分离纯化、药用功能、经济价值、遗传育种等方面。银耳多糖是从银耳中提取精制而得的新型植物源性高效保湿剂，也被认为是一种植物源性类透明质酸物质，分子量可达到100-150万，是迄今为止，化妆品原料界中唯一的分子量能够达到100万以上的植物来源的保湿剂，特别适用于精华液、面膜、膏霜、乳液、护肤水等化妆品中。银耳多糖在化妆品市场上，对于高分子的需求逐渐增加，市场出现不断出现分子量在创新高的情况。目前市场已出现160万Da分子量银耳多糖，很多客户提出的需求已达到180万Da以上，即高分子银耳多糖有着很大的应用市场空间。但是，现有的银耳原料进行提取时，同等条件下提取产品分子量在90-160万Da不等，可以看出原料对银耳多糖提取起着很关键性的作用。通过分析得到，银耳栽培过程中的伴生菌，即香灰菌分泌的纤维素酶、半纤维素酶和多酚氧化酶会对银耳多糖分子量产生重要影响，因此，控制香灰菌的分泌物含量成为控制银耳多糖分子量的关键因素。
技术实现思路
为了解决上述问题，本专利技术提供了一种提取高分子银耳多糖的银耳栽培方法，提供一种培育高分子银耳多糖的银耳栽培方法。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种提取高分子银耳多糖的银耳栽培方法，包括如下步骤：1）无菌条件下进行银耳菌株低温驯化，在精确23℃中进行培养，八成熟后，采用生长强壮进行孢子弹射分离，分离后孢子进行菌丝培养、菌株栽培，培养温度改为22℃，反复筛选出能适应在18-20℃条件下茁壮的银耳孢子；2）新型培养基配制：30-50%木屑，10-20%麸皮，10-20%玉米芯，10-20%银耳多糖提取废渣，5-10%甘蔗渣，1-5%酵母蛋白胨，1-2%石膏，1-2%磷酸氢二钾；混合后进行粉碎，勾兑水，使培养基湿度达到50-60%，混匀，装袋；3）进行高温高压灭菌，灭菌条件：增加压力，温度121℃，灭菌时间2-3小时，等菌棒在接种室内冷却至22-26℃接种；4）进行拌种，洁净区中将下层香灰菌丝和上层银耳菌丝1∶2进行混匀后12小时内接种；5）用接种勺取2-4g银耳菌种，接种到接种穴中，将菌袋放置在无菌环境中进行培养，培养时间4-8天，温度保持在22-26℃；6）再转移到菌房栽培，将菌袋封口开6*6cm小孔，使菌落充分接触空气，控制温度在20-24℃，湿度80-90%，培养5-10天；芽基分化耳芽后，控制温度在18-22℃，湿度90-95%，栽培10-15天；7）叶片直径大于18cm停止喷水，保持自然湿度，增大通风，温度18-22℃，5-10天菌袋明显收缩、皱褶、变轻后采摘；8）真空低压低温干燥后，进行专利申请号201710243322.2《一种银耳多糖提取的新方法》测量分子量。进一步地，步骤1）驯化后的菌株低于驯化前菌株生长环境的3-5℃，栽培阶段控制温度来调节香灰菌丝生长状态，使其分泌的纤维素酶、半纤维素酶、多酚氧化酶等得到控制，减少银耳中多糖分子量情况。进一步地，步骤1）中驯化方法采用恒温培养箱培育。进一步地，步骤2）中新型培养基中通过银耳多糖提取废渣、甘蔗渣、酵母蛋白胨控制银耳生长周期、叶片直径、单朵银耳鲜重、单朵银耳干重及提取银耳多糖分子量。进一步地，步骤3）中利用高压高温灭菌锅进行，有效降低灭菌时间，提高生产效率。进一步地，步骤4）中银耳菌株的制作，进行拌种，洁净区中先将银耳接种在培养基上，培养10天后，再接入少许香灰菌丝，在同样温度下，培养7～10天，待香灰菌丝蔓延全试管时拌匀即为原种。进一步地，步骤8）中也可以直接用鲜银耳进行提取，出于保存困难问题，为保证分子量，负压55-60℃进行干燥。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：对银耳栽培过程进行了优化，包括银耳菌株驯化，新型培养基配制、灭菌、接种和优化培养条件；银耳菌株经过耐低温驯化后，适应生长温度降低，在银耳生长发育过程中伴生菌香灰菌分泌的纤维素酶、半纤维素酶、多酚氧化酶得到较好控制；为优化银耳初期生长，培养基加入重要原料银耳多糖提取废渣、甘蔗渣，保证银耳初期正常生长发育；培养基中银耳多糖提取废渣回收利用，也解决了废渣处理的环保问题；本方法能提高银耳中粘多糖的分子量以及解决银耳多糖废渣处理的环保问题，同时成本低，适合工业化生产。具体实施方式为了使本领域技术人员更好地理解本专利技术的技术方案，下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明。实施例一1）无菌条件下进行银耳菌株培育，在精确23℃中进行培养，原始银耳菌株不做任何驯化处理；2）新型培养基配制：40%木屑，15%麸皮，15%玉米芯，15%银耳多糖提取废渣，8%甘蔗渣，3%酵母蛋白胨，2%石膏，2%磷酸氢二钾；混合后进行粉碎，勾兑水，使培养基湿度达到50-60%，混匀，装袋；3）进行高温高压灭菌，灭菌条件：增加压力，温度121℃，灭菌时间2-3小时，等菌棒在接种室内冷却至22-26℃接种；4）进行拌种，洁净区中将下层香灰菌丝和上层银耳菌丝1∶2进行混匀后12小时内接种；5）用接种勺取2-4g银耳菌种，接种到接种穴中，将菌袋放置在无菌环境中进行培养，培养时间4-8天，温度保持在22-26℃；6）再转移到菌房栽培，将菌袋封口开6*6cm小孔，使菌落充分接触空气，控制温度在20-24℃，湿度80-90%，培养5-10天；芽基分化耳芽后，控制温度在18-22℃，湿度90-95%，栽培10-15天；7）叶片直径大于18cm停止喷水，保持自然湿度，增大通风，温度18-22℃，5-10天菌袋明显收缩、皱褶、变轻后采摘；8）真空低压低温干燥后，进行专利申请号201710243322.2《一种银耳多糖提取的新方法》测量分子量。实施例二1）无菌条件下进行银耳菌株低温驯化，在精确23℃中进行培养，八成熟后，采用生长强壮进行孢子弹射分离，分离后孢子进行菌丝培养、菌株栽培，培养温度改为20℃，反复筛选出能适应在15-17℃条件下茁壮的银耳孢子；2）新型培养基配制：40%木屑，15%麸皮，15%玉米芯，15%银耳多糖提取废渣，8%甘蔗渣，3%酵母蛋白胨，2%石膏，2%磷酸氢二钾；混合后进行粉碎，勾兑水，使培养基湿度达到50-60%，混匀，装袋；3）进行高温高压灭菌，灭菌条件：增加压力，温度121℃，灭菌时间2-3小时，等菌棒在接种室内冷却至22-2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提取高分子银耳多糖的银耳栽培方法，其特征是包括以下步骤：/n1）无菌条件下进行银耳菌株低温驯化，在精确23℃中进行培养，八成熟后，采用生长强壮进行孢子弹射分离，分离后孢子进行菌丝培养、菌株栽培，培养温度改为22℃，反复筛选出能适应在18-20℃条件下茁壮的银耳孢子；/n2）新型培养基配制：30-50%木屑，10-20%麸皮，10-20%玉米芯，10-20%银耳多糖提取废渣，5-10%甘蔗渣，1-5%酵母蛋白胨，1-2%石膏，1-2%磷酸氢二钾；混合后进行粉碎，勾兑水，使培养基湿度达到50-60%，混匀，装袋；/n3）进行高温高压灭菌，灭菌条件：增加压力，温度121℃，灭菌时间2-3小时，等菌棒在接种室内冷却至22-26℃接种；/n4）进行拌种，洁净区中将下层香灰菌丝和上层银耳菌丝1∶2进行混匀后12小时内接种；/n5）用接种勺取2-4g银耳菌种，接种到接种穴中，将菌袋放置在无菌环境中进行培养，培养时间4-8天，温度保持在22-26℃；/n6）再转移到菌房栽培，将菌袋封口开6*6cm小孔，使菌落充分接触空气，控制温度在20-24℃，湿度80-90%，培养5-10天；芽基分化耳芽后，控制温度在18-22℃，湿度90-95%，栽培10-15天；/n7）叶片直径大于18cm停止喷水，保持自然湿度，增大通风，温度18-22℃，5-10天菌袋明显收缩、皱褶、变轻后采摘；/n8）真空低压低温干燥后，进行专利申请号201710243322 .2《一种银耳多糖提取的新方法》测量分子量。/n...

【技术特征摘要】
1.一种提取高分子银耳多糖的银耳栽培方法，其特征是包括以下步骤：
1）无菌条件下进行银耳菌株低温驯化，在精确23℃中进行培养，八成熟后，采用生长强壮进行孢子弹射分离，分离后孢子进行菌丝培养、菌株栽培，培养温度改为22℃，反复筛选出能适应在18-20℃条件下茁壮的银耳孢子；
2）新型培养基配制：30-50%木屑，10-20%麸皮，10-20%玉米芯，10-20%银耳多糖提取废渣，5-10%甘蔗渣，1-5%酵母蛋白胨，1-2%石膏，1-2%磷酸氢二钾；混合后进行粉碎，勾兑水，使培养基湿度达到50-60%，混匀，装袋；
3）进行高温高压灭菌，灭菌条件：增加压力，温度121℃，灭菌时间2-3小时，等菌棒在接种室内冷却至22-26℃接种；
4）进行拌种，洁净区中将下层香灰菌丝和上层银耳菌丝1∶2进行混匀后12小时内接种；
5）用接种勺取2-4g银耳菌种，接种到接种穴中，将菌袋放置在无菌环境中进行培养，培养时间4-8天，温度保持在22-26℃；
6）再转移到菌房栽培，将菌袋封口开6*6cm小孔，使菌落充分接触空气，控制温度在20-24℃，湿度80-90%，培养5-10天；芽基分化耳芽后，控制温度在18-22℃，湿度90-95%，栽培10-15天；
7）叶片直径大于18cm停止喷水，保持自然湿度，增大通风，温度18-22℃，5-10天菌袋明显收缩、皱褶、变轻后采摘；
8）真空低压低温干燥后，进行专利申请号201710243322.2《一种银耳多糖提取的新方法》测量分子量。


2.根据权利要求1所述的提取高分子银耳多糖的银耳栽培方法，其特征是步骤1）驯化后的菌株低于驯化前菌株生长环境的3-5℃，栽培阶段控制温度来调节香灰菌丝生长状态，使其分泌的纤维素酶、半纤维素酶、多酚氧化酶等得到控制，减少银耳中多糖分子量情况。


3.根据权利要求1所述的提取高分子银耳多糖的银耳栽培方法，其特征是步骤1）中驯化方法采用恒温培养箱培育。


4.根据权利要求1所述的提取高分子银耳多糖的银耳栽培方法，其特征是步骤2）中新型培养基中通过银耳多糖提取废渣...

【专利技术属性】
技术研发人员：王宇，杨建卫，冯兴成，孔文文，何勇，孔猛，杨守峰，
申请(专利权)人：山东同康农业开发有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37