用于制备表面活性蛋白D(SP-D)的方法、组合物和细胞技术

本文中提供的方法和组合物的一些实施方案涉及表面活性蛋白D(SP‑D)的制备。一些实施方包括人SP‑D在某些细胞系中的表达，以及从此类细胞系中纯化人SP‑D。一些实施方案包括某些寡聚体形式的人SP‑D的制备。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于制备表面活性蛋白D(SP-D)的方法、组合物和细胞相关申请的交叉引用本申请要求2018年1月8日提交的题为“用于制备表面活性蛋白D(SP-D)的方法、组合物和细胞(METHODS,COMPOSITIONSANDCELLSFORPREPARINGSURFACTANTPROTEIND(SP-D))”的第62/614758号美国临时申请，以及2017年9月6日提交的题为“用于制备表面活性蛋白D(SP-D)的方法、组合物和细胞(METHODS,COMPOSITIONSANDCELLSFORPREPARINGSURFACTANTPROTEIND(SP-D))”的第62/554825号美国临时申请的优先权，它们各自通过引用整体并入。序列表的引用本申请与电子格式的序列表一起提交。序列表作为名为AIRWY007WOSEQ的文件提供，创建于2018年8月31日，其大小大约为13Kb。序列表的电子格式中的信息通过引入整体并入本文中。专利
本文所提供的方法和组合物的一些实施方案涉及表面活性蛋白D(SP-D)的制备。一些实施方案包括人SP-D在某些细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于产生人表面活性蛋白D(SP-D)多肽组合物的方法，所述方法包括：/n(a)将编码所述SP-D多肽的多核苷酸引入人哺乳动物细胞中；/n(b)在其中表达所述SP-D多肽的条件下培养所述细胞；和/n(c)从所述细胞中分离所表达的SP-D多肽。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20170906 US 62/554,825;20180108 US 62/614,7581.用于产生人表面活性蛋白D(SP-D)多肽组合物的方法，所述方法包括：
(a)将编码所述SP-D多肽的多核苷酸引入人哺乳动物细胞中；
(b)在其中表达所述SP-D多肽的条件下培养所述细胞；和
(c)从所述细胞中分离所表达的SP-D多肽。


2.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞来源于人骨髓性白血病细胞。


3.如权利要求2所述的方法，其中所述细胞选自：NM-H9D8、NM-H9D8-E6Q12和NM-F9。


4.如权利要求3所述的方法，其中所述细胞是NM-H9D8细胞。


5.如权利要求1所述的方法，其中所述多核苷酸编码野生型SP-D多肽前导序列。


6.如权利要求5所述的方法，其中所述多核苷酸包含SEQIDNO:03。


7.如权利要求5所述的方法，其中所述多核苷酸包含SEQIDNO:02。


8.如权利要求5所述的方法，其中所述多核苷酸编码具有包含SEQIDNO:05的氨基酸序列的多肽。


9.如权利要求5所述的方法，其中所述多核苷酸编码具有包含SEQIDNO:04的氨基酸序列的多肽。


10.如权利要求1所述的方法，其中所述多核苷酸编码野生型T细胞受体(TCR)多肽前导序列。


11.如权利要求10所述的方法，其中所述多核苷酸包含SEQIDNO:08。


12.如权利要求10所述的方法，其中所述多核苷酸包含SEQIDNO:07。


13.如权利要求10所述的方法，其中所述多核苷酸编码具有包含SEQIDNO:10的氨基酸序列的多肽。


14.如权利要求10所述的方法，其中所述多核苷酸编码具有包含SEQIDNO:09的氨基酸序列的多肽。


15.如权利要求1所述的方法，其中所述SP-D多肽包含在多态性位置处的残基，其中所述残基选自：Met11/31、Thr160/180、Ser270/290和Ala286/306。


16.如权利要求15所述的方法，其中所述SP-D多肽包含Met11/31。


17.如权利要求15所述的方法，其中所述SP-D多肽包含Met11/31、Thr160/180、Ser270/290和Ala286/306。


18.如权利要求1所述的方法，其还包括分离所表达的SP-D多肽的群体，每个所表达的SP-D多肽包含在N-糖基化位点处连接的复合型碳水化合物，其中所述群体具有包含以下特征的糖基化模式：
(i)至少70％的所述复合型碳水化合物包括核心岩藻糖；
(ii)至少10％的所述复合型碳水化合物包括至少一个唾液酸残基；
(iii)至少50％的所述复合型碳水化合物包括至少双触角碳水化合物结构；
(iv)至少10％的所述复合型碳水化合物包括等分的N-乙酰葡糖胺；
(v)少于10％的所述碳水化合物为高甘露糖型结构；和
(vi)可检测量的α2,6-偶联的唾液酸残基。


19.如权利要求18所述的方法，其中所述群体具有包含以下特征中的一个或多个的糖基化模式：
(i)至少20％的所述复合型碳水化合物包括等分的N-乙酰葡糖胺；和
(iii)至少85％的所述复合型碳水化合物包括核心岩藻糖。


20.如权利要求1所述的方法，其中所述多核苷酸编码二氢叶酸还原酶多肽。


21.如权利要求1所述的方法，其中培养所述细胞包括使所述细胞与抗叶酸剂接触。
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【专利技术属性】
技术研发人员：简·苏珊·罗森鲍姆，弗雷德里克·加彭·夸斯特，马提亚·考珀，拉尔斯·斯托克尔，
申请(专利权)人：气道治疗公司，格莱克托佩有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US