一种人参总皂苷的纯化方法技术

本发明专利技术公开了一种人参总皂苷的纯化方法，包括将人参筛去杂质、洗净、软化、切片、干燥后，加20%~80%的乙醇浸泡5~15h，煎煮0.5~12h，滤取药液；药渣再依上述方法煎煮2~3次，滤取药液，并与上述药液合并浓缩，得人参粗提物溶液；将其浓缩、干燥，得人参粗提物干粉；将人参粗提物溶液进行膜过滤，取膜透过液，采用高效制备液相色谱将膜透过液纯化，得精制液，将其浓缩、干燥，得精制人参总皂苷粉末；将精制人参总皂苷粉末用纯化水溶解，采用离子交换色谱对其进行脱色除杂，收集除杂后液体，将其浓缩、干燥，得人参总皂苷纯品粉末。本发明专利技术可解决人参总皂苷提取收率低、纯化产品中含量低、有机溶剂残留大及生产成本高等问题。

【技术实现步骤摘要】
一种人参总皂苷的纯化方法
本专利技术属于中药提取
，具体涉及一种人参总皂苷的纯化方法。
技术介绍
人参皂苷(PanaxNotoginsengSaponins,PNS)是一种固醇类化合物，属于三萜皂苷。主要存在于人参药材中。PNS主要是由皂苷元与糖链接所构成，其性状多为白色粉末或针状晶体，吸湿性较强，被视为人参中的主要化学成分，也是人参发挥主要功效的有效成分。研究表明人参皂苷Rg1可快速缓解疲劳、改善学习记忆、延缓衰老，具有兴奋中枢神经作用、抑制血小板凝集作用；人参皂苷Re能抑制中枢神经，促进DNA，RNA合成，升高血浆皮质酮的作用，扩张血管，能减少乙酰胆碱引起的豚鼠离体子宫的收缩，对大鼠有减慢心率和双相性血压(先升后降)作用；人参皂苷Rb1的含量可影响动物睾丸的潜力，亦会影响小鼠的胚胎发育，具有增强胆碱系统的功能，增加乙酰胆碱的合成和释放以及改善记忆力作用。人参总皂苷分离纯化工艺种类繁多，包括有溶剂萃取法、沉淀法、结晶法、大孔树脂吸附法等。溶剂萃取法由于多用二氯甲烷、氯仿、苯等脱脂，此法有机溶剂用量较大，提取时间长、效率低下，且存在有机溶剂易残留的缺点，产品质量低。沉淀法常用的沉淀剂是铅盐，它能与许多物质生成难溶的铅盐或络合物，选择性差；同时铅盐有剧毒，严重影响产品质量，并且容易造成资源浪费，产品纯度不高，液料比大，酸消耗量大，需要脱盐纯化等，不利于商业化发展。结晶法是利用两种或多种可溶性固体在同一种溶剂里溶解度的不同加以分离的方法，该法生成速率慢，生长条件难以控制。大孔树脂吸附分离工艺操作简便，成本较低，树脂可反复使用，适合工业生产，但大孔树脂吸附法对提取液纯度有一定要求，预处理难度大，有机残留物高，强度差，使用过程中破碎严重，使用寿命短，粒径分布广，分离效果不佳，且只适用于产品的粗分离，实验重现性较差。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术实施例期望提供一种人参总皂苷的纯化方法，可解决目前人参总皂苷提取制备工艺收率低、纯化产品中含量低、有机溶剂残留大和生产成本高等问题。为达到上述目的，本专利技术采用一种人参总皂苷的纯化方法，包括以下步骤：a)将人参筛去杂质、洗净、软化、切片、干燥后，加20％～80％的乙醇进行浸泡5h～15h，然后煎煮0.5h～12h，滤取药液；药渣再依上述方法煎煮2～3次，滤取药液，并与上述药液合并进行浓缩，即得人参粗提物溶液；将所述人参粗提物溶液浓缩、干燥，即得人参粗提物干粉；b)将所述人参粗提物溶液进行膜过滤，收集膜透过液，采用高效液相色谱仪将膜透过液进行纯化，得精制液，将其浓缩、干燥，即得精制人参总皂苷粉末；c)将所述精制人参总皂苷粉末用纯化水溶解，采用离子交换色谱仪对其进行脱色除杂，收集脱色除杂后的液体，将其浓缩、干燥，即得人参总皂苷纯品粉末。优选地，所述步骤b)中的膜可以是中空纤维膜、卷式膜、管式膜或板框式膜，所述膜孔径为0.22μm～0.65μm或500KD～1000KD。优选地，所述步骤b)中采用高效液相色谱仪将膜透过液进行纯化包括：采用平衡缓冲液冲洗所述高效液相色谱仪中的色谱柱，将所述膜透过液通过所述色谱柱纯化，通过有机溶剂淋洗杂质、洗脱目标物，其中色谱上样和洗脱流速为140cm/h～350cm/h。优选地，所述色谱柱采用C18反相色谱柱，所述有机溶剂为甲醇、乙醇或乙腈，所述洗脱目标物的有机溶剂浓度为30％～90％。优选地，所述步骤c)中采用离子交换色谱仪进行脱色除杂包括：上样完毕后，采用纯水淋洗所述离子交换色谱仪中的色谱柱，采用1MNaOH和0.1MHCl洗脱结合到色谱柱上的杂质，其中色谱上样和洗脱流速为150cm/h～500cm/h。优选地，所述色谱柱为离子交换色谱柱。优选地，所述步骤a)、b)、c)中的浓缩方式可以为常压蒸发、减压蒸发、薄膜蒸发、多效蒸发；所述步骤a)、b)、c)中的干燥方式可以为减压干燥、冷冻干燥、红外线干燥、喷雾干燥。本专利技术有益效果如下：1)本专利技术采用膜过滤技术，常温下即可实现分离、浓缩，整个过程无相变、化学变化发生，能耗低，选择性好，适应性强，操作简单经济实用，效率和稳定性比较高，适合工业化生产；2)本专利技术采用高效液相色谱技术，可以有效分离皂苷与其结构类似物等物质，实现人参总皂苷的高效纯化制备；3)本专利技术采用离子交换色谱技术，可以有效去除色素、农药残留、重金属、内毒素等有毒有害物质，实现人参总皂苷的高效纯化制备，且适于工业化生产，可解决中药提取物外观差、口感差、颜色深及保存易沉淀等缺点；4)本专利技术操作简单，有机溶剂均可回收重复利用，环保高效，可用于大规模生产，具有良好的工业化前景，人参总皂苷纯化过程安全可控，耗能低、时间短，稳定性高，显著提高人参总皂苷的质量和收率。附图说明图1为本专利技术人参总皂苷的纯化方法流程示意图；图2为本专利技术实施例一制备的人参粗提液的HPLC分析色谱图；图3为本专利技术实施例一制备的人参总皂苷精制液的HPLC分析色谱图；图4为本专利技术实施例一制备的人参总皂苷纯品粉末的HPLC分析色谱图。具体实施方式为了能够更加详尽地了解本专利技术的特点与
技术实现思路
，下面对本专利技术的实现进行详细阐述。本专利技术人参总皂苷的纯化方法流程如图1所示，具体包括如下：步骤101：将人参筛去杂质、洗净、软化、切片、干燥后，加20％～80％的乙醇进行浸泡5h～15h，然后煎煮0.5～12h，滤取药液；药渣再依上述方法煎煮2～3次，滤取药液，并与上述药液合并进行浓缩，即得人参粗提物溶液；将所述人参粗提物溶液浓缩、干燥，即得人参粗提物干粉；这里，药渣再依上述方法煎煮2～3次，即药渣加入20％～80％的乙醇进行浸泡5h～15h，然后煎煮0.5h～12h，滤取药液，如此重复2～3次；这里，所述浓缩方式可以为常压蒸发、减压蒸发、薄膜蒸发、多效蒸发；所述干燥方式可以为减压干燥、冷冻干燥、红外线干燥、喷雾干燥；步骤102：将所述人参粗提物溶液进行膜过滤，收集膜透过液，采用高效液相色谱仪将膜透过液进行纯化，得精制液，将其浓缩、干燥，即得精制人参总皂苷粉末；这里，所述膜可以是中空纤维膜、卷式膜、管式膜或板框式膜，所述膜孔径为0.22μm～0.65μm或500KD～1000KD；这里，采用高效液相色谱仪将膜透过液进行纯化包括：采用平衡缓冲液冲洗所述高效液相色谱仪中的色谱柱，将所述膜透过液通过所述色谱柱纯化，通过有机溶剂淋洗杂质、洗脱目标物，其中色谱上样和洗脱流速为140cm/h～350cm/h；这里，所述色谱柱采用C18反相色谱柱，所述有机溶剂为甲醇、乙醇或乙腈，所述洗脱目标物的有机溶剂浓度为30％～90％；这里，所述浓缩方式可以为常压蒸发、减压蒸发、薄膜蒸发、多效蒸发；所述干燥方式可以为减压干燥、冷冻干燥、红外线干燥、喷雾干燥；这里，反相色谱柱的填料基质为硅胶或高分子聚合物，填料配基的碳原子数为1～30的正链烷基中的一种或多种，色谱柱内径为20mm～1600mm，色谱柱床高本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人参总皂苷的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：/na) 将人参筛去杂质、洗净、软化、切片、干燥后，加20%~80%的乙醇进行浸泡5h~15h，然后煎煮0.5h~12h，滤取药液；药渣再依上述方法煎煮2~3次，滤取药液，并与上述药液合并进行浓缩，即得人参粗提物溶液；将所述人参粗提物溶液浓缩、干燥，即得人参粗提物干粉；/nb) 将所述人参粗提物溶液进行膜过滤，收集膜透过液，采用高效液相色谱将膜透过液进行纯化，得精制液，将其浓缩、干燥，即得精制人参总皂苷粉末；/nc) 将所述精制人参总皂苷粉末用纯化水溶解，采用离子交换色谱对其进行脱色除杂，收集脱色除杂后的液体，将其浓缩、干燥，即得人参总皂苷纯品粉末。/n

【技术特征摘要】
1.一种人参总皂苷的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
a)将人参筛去杂质、洗净、软化、切片、干燥后，加20%~80%的乙醇进行浸泡5h~15h，然后煎煮0.5h~12h，滤取药液；药渣再依上述方法煎煮2~3次，滤取药液，并与上述药液合并进行浓缩，即得人参粗提物溶液；将所述人参粗提物溶液浓缩、干燥，即得人参粗提物干粉；
b)将所述人参粗提物溶液进行膜过滤，收集膜透过液，采用高效液相色谱将膜透过液进行纯化，得精制液，将其浓缩、干燥，即得精制人参总皂苷粉末；
c)将所述精制人参总皂苷粉末用纯化水溶解，采用离子交换色谱对其进行脱色除杂，收集脱色除杂后的液体，将其浓缩、干燥，即得人参总皂苷纯品粉末。


2.根据权利要求1所述的一种人参总皂苷的纯化方法，其特征在于，所述步骤b)中的膜可以是中空纤维膜、卷式膜、管式膜或板框式膜，所述膜孔径为0.22μm~0.65μm或500KD~1000KD。


3.根据权利要求1所述的一种人参总皂苷的纯化方法，其特征在于，所述步骤b)中采用高效液相色谱仪将膜透过液进行纯化包括：采用平衡缓冲液冲洗所述高效液相色...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁鑫淼，晏沣钰，叶贤龙，郭志谋，万瑛，钱子俊，
申请(专利权)人：泰州医药城国科化物生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32