【技术实现步骤摘要】
检测多主棒孢菌的琥珀酸脱氢酶D亚基点突变类型的方法及所用引物组合物
本专利技术涉及植物保护和生物
中一种检测多主棒孢菌的琥珀酸脱氢酶D亚基点突变类型的方法及所用引物组合物。
技术介绍
由多主棒孢菌(Corynesporacassiicoa)引起的黄瓜棒孢叶斑病是果蔬上一种非常普遍的病害，且危害十分严重，给果蔬生产造成了巨大的损失。黄瓜棒孢叶斑病一般田间发病率为10％-25％，严重时可达60％-70％，甚至100％。目前防治该病害仍然主要依赖于杀菌剂。琥珀酸脱氢酶抑制剂(SDHI)类杀菌剂是生产上现在使用较多的一类杀菌剂。但由于其大量使用，多主棒孢菌已对其产生了抗药性，而该药的防治效果也随之大幅度下降。对抗性菌株进行研究发现，抗性菌株的琥珀酸脱氢酶B、C、D亚基发生了点突变。研究发现主要的抗性突变类型有：SdhB-H278R/Y,SdhB-I280V,SdhC-S73P,SdhD-G109V,SdhD-H105R,SdhD-D95E,SdhD-S89P，且琥珀酸脱氢酶B、C和D亚基上不同的点突变分别对应不...
【技术保护点】
1.检测或辅助检测多主棒孢菌的琥珀酸脱氢酶D亚基点突变类型的引物组合物，其特征在于：所述琥珀酸脱氢酶D亚基点突变类型为SdhD-G109V，SdhD-H105R和SdhD-D95E这三种氨基酸点突变，所述引物组合物由MAS-R、MAS-F、D95E-R、H105R-R和G109V-R组成，所述MAS-F为对应于野生型多主棒孢菌琥珀酸脱氢酶D亚基的MAS-PCR上游引物，所述MAS-R为对应于野生型多主棒孢菌琥珀酸脱氢酶D亚基的一条MAS-PCR下游引物，所述D95E-R为对应于多主棒孢菌琥珀酸脱氢酶D亚基上SdhD-D95E突变的一条MAS-PCR下游引物，所述H105R-...
【技术特征摘要】
1.检测或辅助检测多主棒孢菌的琥珀酸脱氢酶D亚基点突变类型的引物组合物，其特征在于：所述琥珀酸脱氢酶D亚基点突变类型为SdhD-G109V，SdhD-H105R和SdhD-D95E这三种氨基酸点突变，所述引物组合物由MAS-R、MAS-F、D95E-R、H105R-R和G109V-R组成，所述MAS-F为对应于野生型多主棒孢菌琥珀酸脱氢酶D亚基的MAS-PCR上游引物，所述MAS-R为对应于野生型多主棒孢菌琥珀酸脱氢酶D亚基的一条MAS-PCR下游引物，所述D95E-R为对应于多主棒孢菌琥珀酸脱氢酶D亚基上SdhD-D95E突变的一条MAS-PCR下游引物，所述H105R-R为对应于多主棒孢菌琥珀酸脱氢酶D亚基上SdhD-H105R突变的一条MAS-PCR下游引物，所述G109V-R为对应于多主棒孢菌琥珀酸脱氢酶D亚基上SdhD-G109V突变的一条MAS-PCR下游引物。
2.根据权利要求1所述的引物组合物，其特征在于：所述MAS-F是核苷酸序列为序列表中序列1的单链DNA，所述MAS-R是核苷酸序列为序列表中序列2的单链DNA，所述D95E-R是核苷酸序列为序列表中序列3的单链DNA，所述H105R-R是核苷酸序列为序列表中序列4的单链DNA，所述G109V-R是核苷酸序列为序列表中序列5的单链DNA。
3.检测或辅助检测多主棒孢菌的琥珀酸脱氢酶D亚基点突变类型的的试剂或试剂盒，其特征在于：所述试剂或试剂盒包括权利要求1或2所述的引物组合物；所述琥珀酸脱氢酶D亚基点突变类型为SdhD-G109V，SdhD-H105R和SdhD-D95E这三种氨基酸点突变。
4.权利要求1或2所述的引物组合物在检测或辅助检测多主棒孢菌对SDHI杀菌剂抗药性中的应用或在制备检测或辅助检测多主棒孢菌对SDHI杀菌剂抗药性产品中的应用。
5.权利要求3所述的试剂或试剂盒在检测或辅助检测多主棒孢菌对SDHI杀菌剂抗药性中的应用或在制备检测或辅助检测多主棒孢菌对SDHI杀菌剂抗药性产品中的应用。
6.检测或辅助检测多主棒孢菌的琥珀酸脱氢酶D亚基点突变类型的方法，其特征在于，所述方法包括以待鉴别多主棒孢菌的基因组DNA为模板，用权利要求1或2所述引物组合物进行MAS-PCR扩增得到MAS-PCR产物，检测所述MAS-PCR产物的大小，如果所述MAS-PCR产物为大于400bp至小于500bp的一个DNA片段，则所...
【专利技术属性】
技术研发人员：石延霞，李宝聚，孙炳学，谢学文，柴阿丽，李磊，
申请(专利权)人：中国农业科学院蔬菜花卉研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11
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