一种基于太赫兹波快速检测大肠杆菌的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于太赫兹波快速检测大肠杆菌的方法，抗大肠杆菌的单克隆抗体的制备和联合应用太赫兹波和特异性抗体在复杂食品基质中快速检测大肠杆菌的有效技术方法建立。所述的抗大肠杆菌单克隆抗体的制备是将大肠杆菌作为免疫原，采用常规杂交瘤技术得到大肠杆菌的单克隆抗体，将该抗体包被ELISA板，与含有大肠杆菌的复杂食品基质共孵育、洗涤并风干后进行太赫兹波检测。该方法应具有准确性高，灵敏度好，检测快速方便的特点。

【技术实现步骤摘要】
一种基于太赫兹波快速检测大肠杆菌的方法
本专利技术属于食品安全检测
，涉及一种基于太赫兹波快速检测大肠杆菌的方法。
技术介绍
由病原微生物引起的食源性疾病是全世界关注的食品安全问题，也是疾病安全防控的重要内容之一。此类疾病传染性强，危害大，严重威胁人类健康。例如上世纪80年代上海因为生吃毛蚶引起30万人甲肝流行；2001年江苏及安徽因大肠杆菌O157：H7感染引发2万人中毒，177人死亡。食品生产时间长，环节多，存在着许多被致病性微生物污染的可能性。作为原料来源的活体就可能带有致病性微生物；在加工过程中原料之间的交叉污染；加工者携带的致病性微生物也可能进入食品；在销售中会通过器具和其它途径污染致病性微生物。总之，与食品有直接和间接关系的致病性微生物都可能污染食品，这是一个复杂的致病性微生物群体。常见的有：沙门氏菌、葡萄球菌、链球菌、副溶血性弧菌、变形杆菌、志贺氏菌、禽流感病毒、黄曲霉菌及病毒、口蹄疫病毒等。因此，为了保证人民食品安全，建立早期快速检测方法对预防控制此类疾病的发生发展具有重大意义。随着研究的日益深入，在微生物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于太赫兹波快速检测大肠杆菌的方法，其特征在于，包括以下操作：/n1)将能够与大肠杆菌特异性结合的单克隆抗体用包被液稀释后，包被检测板，然后于4℃下放置16～24h；/n2)将大肠杆菌与基质混合制成梯度浓度的检测液，以进行标准指纹图谱的检测；/n将待测样品制成流质的待测液；/n3)将检测液、待测液分别加入到包被后的检测板中，37℃孵育0.8～2h，然后洗涤、风干；/n用太赫兹时域光谱装置分别对检测板中检测液和待测液所孵育的板孔进行检测，以获取大肠杆菌太赫兹标准指纹图谱库和样品太赫兹吸收谱图；/n在检测时，太赫兹波设置为：频率范围0-2.5THz、输出波长800nm、光谱宽度＞50nm、...

【技术特征摘要】
1.一种基于太赫兹波快速检测大肠杆菌的方法，其特征在于，包括以下操作：
1)将能够与大肠杆菌特异性结合的单克隆抗体用包被液稀释后，包被检测板，然后于4℃下放置16～24h；
2)将大肠杆菌与基质混合制成梯度浓度的检测液，以进行标准指纹图谱的检测；
将待测样品制成流质的待测液；
3)将检测液、待测液分别加入到包被后的检测板中，37℃孵育0.8～2h，然后洗涤、风干；
用太赫兹时域光谱装置分别对检测板中检测液和待测液所孵育的板孔进行检测，以获取大肠杆菌太赫兹标准指纹图谱库和样品太赫兹吸收谱图；
在检测时，太赫兹波设置为：频率范围0-2.5THz、输出波长800nm、光谱宽度＞50nm、重复频率80MHz±1Hz、脉冲宽度≦50fs、光束直径1～2mm；
4)对照大肠杆菌太赫兹标准指纹图谱库和样品太赫兹吸收谱图，进行大肠杆菌的定性鉴别和/或半定量检测。


2.如权利要求1所述的基于太赫兹波快速检测大肠杆菌的方法，其特征在于，在检测时，太赫兹时域光谱装置的飞秒激光脉冲经过偏光分束镜分为两束，一束作为泵浦光入射到太赫兹发射器上，产生太赫兹脉冲，此脉冲被抛物面镜聚焦到待测量的样品上；另一束为探测光，其与透射样品后的太赫兹电磁脉冲共线经过探测器；调整时间延迟装置产生不同达时间的探测光，测量太赫兹电场强度的变化量；探测器检测的信号经电流前置放大、数字信号处理器后进行图像还原，获得太赫兹脉冲的时域波形光谱图；
根据以下折射率、吸收系数的转换得到太赫兹吸收谱图；
折射率：
吸收系数：
其中，d为样品厚度，由游标卡尺测出；ω为频率，c为光速，T(ω)为检测液的频域信号；为电场相位。


3.如权利要求1所述的基于太赫兹波快速检测大肠杆菌的方法，其特征在于，所述的单...

【专利技术属性】
技术研发人员：骞爱荣，宋朝君，刘粉利，李郁，赵欣，
申请(专利权)人：西北工业大学，西安九清生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61