一种谷物中硒元素的检测方法技术

本发明专利技术属于微量元素检测技术领域，具体涉及到一中谷物中硒元素的检测方法，将谷物洗净、晾干、粉碎，然后经过8000r/min均质20min，制成若干份样品浆料，一，直接消解测得总硒含量；二，分离有机硒和无机硒，分别消解测定无机硒、有机硒总量；三，在二的基础上将有机硒分离得到硒蛋白、多糖硒，分别消解测定硒蛋白、多糖硒含量。本发明专利技术原料处理采用均质方法，比传统的粉碎、搅拌等方式更容易让谷物中成分析出；并且测得硒种类多，精度高。

【技术实现步骤摘要】
一种谷物中硒元素的检测方法
本专利技术属于微量元素检测
，具体涉及到一中谷物中硒元素的检测方法。
技术介绍
硒在自然界的存在方式分为两种：无机硒和有机硒，无机硒一般指亚硒酸钠和硒酸钠，包括有大量无机硒残留的酵母硒、麦芽硒，从金属矿藏的副产品中获得，无机硒有较大的毒性，且不易被吸收，不适合人和动物使用，有机硒通过生物转化与氨基酸、多糖、核苷酸等结合而成，一般以硒蛋白、多糖硒等的形式存在，是人类和动物允许使用的硒源。很多营养品种都添加了硒元素，目前硒的检测方法多种多样，技术较为成熟，问题是不同形式的硒如何分离成为检测难题，申请号为CN201210458379.1公开了一种使用微波消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法直接测定海产品中有机硒、蛋白硒或多糖硒的检测方法，该专利技术的优点在于：可以高效、简便、快速的测定海产品中有机硒、蛋白硒和多糖硒；但是该专利技术在分离过程中容易将小分子硒去除，并且过多使用化学反应分离，容易造成化学键断裂，影响物质溶解性，测试结果不精确。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种硒元素的检测方法，主要是针对谷物等。本专利技术通过以下技术方案来实现：一种谷物中硒元素的检测方法，将谷物洗净、晾干、粉碎，然后经过8000r/min均质20min，制成若干份样品浆料，一，直接消解测得总硒含量；二，分离有机硒和无机硒，分别消解测定无机硒、有机硒总量；三，在二的基础上将有机硒分离得到硒蛋白、多糖硒，分别消解测定硒蛋白、多糖硒含量。r>上述消解方法采用现有技术中的硝酸-高氯酸消解法：将1-2g消解原料放入消化管中，多次加入2ml硝酸，两次之间相隔5分钟，直至消化管中液体透明无色，转移至赶酸器中赶酸直至少量固体析出，然后冷却加入2ml高氯酸、加水定容至10ml后加热样品直至无色，样品冷却后即可。进一步的，所述分离有机硒和无机硒，包括以下步骤：(1)将样品浆料放入透析袋中，反复在蒸馏水中透析，直至透析外液中检测不到无机硒，收集所有透析外液，然后加入环己烷进行萃取，得到含有无机硒的水相和含有水溶性有机硒的有机相；(2)将含有水溶性有机硒的有机相合并透析内液，浓缩干燥得到有机硒；(3)将含有无机硒的水相通过膜蒸馏技术分离，得到无机硒。进一步的，硒蛋白的分离：S1、在5g有机硒中加入15-25ml正己烷，超声波浸泡5-8小时，频率为30-50KHz，功率60-90w，离心去除上清液；现有技术总常采用丙酮，但是相对于丙酮而言，正己烷功能官能团较少，除了物理作用非极性间的相互融合之外，发生的化学键反应较少；S2、重复S1步骤中正己烷脱脂1-3次，将剩余物在0.5-0.7atm压力下，70-80℃下进行脱气20-40min，得到脱脂有机硒；S3、将脱脂有机硒加入18mlTris-HCl缓冲液+2ml甘油的混合液中，离心得到不溶的非蛋白固体物，然后向上清液中加入硫酸铵至饱和，混匀后在4℃下静置4-6h进行盐析，得到的沉淀物冷却干燥，即得硒蛋白。离心得到的不溶的非蛋白固体物含有丰富的多糖硒，可以进行下一步的分离，由于无聊经历过均质，而在脱脂过程中又采用超声波，因此在分离过程中分离原料成分见较为分散，无需采用化学方式进行分离。进一步的，多糖硒的分离：将步骤S3中的非蛋白固体物加入20ml水，20KHz超声波处理3小时，功率6w，温度80-90℃，然后去除不溶物后将混合液转移至透析袋中，反复在蒸馏水中透析3-6次，每次3-5小时，最后透析内液冷却干燥即得多糖硒。通过超声高温水提多糖硒，并且通过透析将其他无机盐、过程中缓冲液等去除。上述硒元素的检测方法，采用原子荧光光谱法测定硒。与现有技术相比，本专利技术具有以下技术优点：1、原料处理采用均质方法，比传统的粉碎、搅拌等方式更容易让谷物中成分析出；2、本专利技术测得硒种类多，精度高。具体实施方式通过以下实施例对专利技术进一步解释，本专利技术需要使用到现有技术的工艺方法如下所述。无机硒的定性：向待测溶液中加入15％半胱氨酸溶液，混匀后加入1滴亚甲蓝溶液，无机硒褪色30-60s，有机硒褪色需要5min+。原子荧光光谱法测定硒：绘制测定标准曲线：硒标准储备液(100μg/mL):精确称取100.0mg元素硒(光谱纯)，溶于少量硝酸中，加2mL过氯酸，置沸水浴中加热3.5h，冷却后加入8.4mL盐酸，再置沸水浴中煮2min。准确稀释至1000mL，其盐酸浓度为0.1mol/L。此储备液浓度为100μg/mL。取适量硒标准储备液稀释成0μg/L、2μg/L、4μg/L、8μg/L、12μg/L、20μg/L的溶液，上述溶液各取3mL，再分别加入盐酸1.6mL，80g/L铁氰化钾溶液0.8mL，即得硒标准使用液。将上述硒标准使用液在如下条件下进样测试：负高压为300V；灯电流为90mA；原子化温度为800℃；炉高为9mm；载气流速为450mL/min；屏蔽气流速为850mL/min；进样体积为1.5mL。根据测定结果绘制标准曲线并建立回归方程。回归方程为：y＝66.32x+6.375，R2＝0.999。取3mL需要检测的消化液，加入1.6mL盐酸与80g/L铁氰化钾溶液0.8mL，混匀后进行测定，并用回归方程计算硒的含量。去两次鉴定数据平均值，若两次鉴定数据差别很大，增加测试样本，取相似结果平均值。X＝(C-C0)×V/m，其中：X为硒含量，μg/kg；C为消化液硒测定的浓度，μg/L；C0为空白样品浓度，μg/L；V为样品定容体积，mL；m为样品重量，g。结果如表1所示：硝酸-高氯酸消解法：将1-2g消解原料放入消化管中，多次加入2ml硝酸，两次之间相隔5分钟，直至消化管中液体透明无色，转移至赶酸器中赶酸直至少量固体析出，然后冷却加入2ml高氯酸、加水定容至10ml后加热样品直至无色，样品冷却后即可。样品制备：将谷物洗净、晾干、粉碎，然后经过8000r/min均质20min，制成若干份样品浆料；一，分离有机硒和无机硒(1)将30g样品浆料放入透析袋中，反复在蒸馏水中透析，5次120h后透析外液中检测不到无机硒，收集所有透析外液，然后加入环己烷进行萃取，得到含有无机硒的水相和含有水溶性有机硒的有机相；(2)将含有水溶性有机硒的有机相合并透析内液，浓缩干燥得到有机硒；(3)将含有无机硒的水相通过膜蒸馏技术分离，得到无机硒。各种有机形态硒提取如实施例1-3所述；实施例1分离硒蛋白、多糖硒硒蛋白的分离：S1、在5g有机硒中加入20ml正己烷，超声波浸泡6小时，频率为40KHz，功率80w，离心去除上清液；S2、重复S1步骤中正己烷脱脂2次，将剩余物在0.6atm压力下，75℃下进行脱气30min，得到脱脂有机硒；S3、将脱脂有机硒加入18mlTris-HCl缓冲液+2ml甘油的混合液中，离心得到不溶的非蛋本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种谷物中硒元素的检测方法，其特征在于，将谷物洗净、晾干、粉碎，然后经过8000r/min均质20min，制成若干份样品浆料，一，直接消解测得总硒含量；二，分离有机硒和无机硒，分别消解测定无机硒、有机硒总量；三，在二的基础上将有机硒分离得到硒蛋白、多糖硒，分别消解测定硒蛋白、多糖硒含量。/n

【技术特征摘要】
1.一种谷物中硒元素的检测方法，其特征在于，将谷物洗净、晾干、粉碎，然后经过8000r/min均质20min，制成若干份样品浆料，一，直接消解测得总硒含量；二，分离有机硒和无机硒，分别消解测定无机硒、有机硒总量；三，在二的基础上将有机硒分离得到硒蛋白、多糖硒，分别消解测定硒蛋白、多糖硒含量。


2.根据权利要求1所述的谷物中硒元素的检测方法，其特征在于，消解方法为硝酸-高氯酸消解法。


3.根据权利要求1所述的谷物中硒元素的检测方法，其特征在于，所述分离有机硒和无机硒，包括以下步骤：
(1)将样品浆料放入透析袋中，反复在蒸馏水中透析，直至透析外液中检测不到无机硒，收集所有透析外液，然后加入环己烷进行萃取，得到含有无机硒的水相和含有水溶性有机硒的有机相；
(2)将含有水溶性有机硒的有机相合并透析内液，浓缩干燥得到有机硒；
(3)将含有无机硒的水相通过膜蒸馏技术分离，得到无机硒。


4.根据权利要求1或3所述的谷物中硒元素的检测方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：王素香，姜存佩，滕伟秀，董纪龙，
申请(专利权)人：奥迈检测有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37