嗜中性粒细胞亚型制造技术

公开了一种表征和/或分离嗜中性粒细胞的方法，该方法包括根据嗜中性粒细胞上CD101的表达将嗜中性粒细胞表征和/或分开为包含增殖嗜中性粒细胞的第一群体和包含成熟嗜中性粒细胞的第二群体。还公开了包含呈CD10

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】嗜中性粒细胞亚型
本公开涉及嗜中性粒细胞，将嗜中性粒细胞分类为嗜中性粒细胞亚型和将其分开和/或分离/富集的方法。本公开还涉及与嗜中性粒细胞亚型相关的治疗、诊断和预后方法或试剂盒。
技术介绍
嗜中性粒细胞是针对病原体的早期先天免疫应答的不可缺少的细胞。嗜中性粒细胞生成中的任何缺陷都可能导致威胁生命的疾患，因此需要严格调控它们的发育。由于其半衰期短，嗜中性粒细胞需要从增殖性骨髓(BM)前体不断补充。虽然已经确立了嗜中性粒细胞来源于粒细胞-巨噬细胞祖细胞(GMP)，但是从GMP到功能性成熟的嗜中性粒细胞的分化途径很不明确。
技术实现思路
本专利技术试图提供一种将嗜中性粒细胞分类/表征为嗜中性粒细胞亚型以及将其分开和/或分离/富集的方法。本专利技术还试图提供与嗜中性粒细胞亚型相关的试剂盒和治疗、诊断和预后方法。根据本专利技术的一个方面，提供了一种表征和/或分开嗜中性粒细胞的方法，该方法包括根据嗜中性粒细胞上CD101的表达表征嗜中性粒细胞和/或将嗜中性粒细胞分离为包含增殖性嗜中性粒细胞的第一群体和包含成熟嗜中性粒细胞的第二群体。在一些实例中，第一群体表达CD101-和第二群体表达CD101+。在一些实例中，当嗜中性粒细胞是人嗜中性粒细胞时，该方法可进一步包括根据嗜中性粒细胞上CD10的表达表征和/或分开嗜中性粒细胞，其中包含增殖性嗜中性粒细胞的第一群体是CD10-CD101-，而包含成熟嗜中性粒细胞的第二群体是CD10+CD101+，任选地第二嗜中性粒细胞群体还包含呈CD10-CD101+的未成熟嗜中性粒细胞。在一些实例中，该方法可进一步包括根据一种或多种生物标记物的表达来表征和/或分开嗜中性粒细胞，所述生物标记物选自下组：CD49d、CD16、CXCR2、CD34、CD66、CD15、CD71和CD11b。在一些实例中，增殖性嗜中性粒细胞可以包括原嗜中性粒细胞(pro-neutrophil)和前嗜中性粒细胞(pre-neutrophil)。在一些实例中，原嗜中性粒细胞可以是CD101-CD10-CD16-CD34-CD66b+CD15+CD71+CD49d+CD11b-CXCR2-，前嗜中性粒细胞可以是CD101-CD10-CD16-CD34-CD66b+CD15+CD71+CD49d+CD11b+CXCR2-，未成熟嗜中性粒细胞可以是CD101+CD10-CD16-CD34-CD66b+CD15+CD71-CD49dloCD11b+CXCR2-，和成熟嗜中性粒细胞可以是CD101+CD10+CD16+CD34-CD66b+CD15+CD71-CD49dloCD11b+CXCR2+。在一些实例中，当嗜中性粒细胞是鼠嗜中性粒细胞时，该方法可进一步包括根据嗜中性粒细胞上cKit的表达表征和/或分开嗜中性粒细胞，其中包括增殖性嗜中性粒细胞的第一群体可以是cKithiCD101–、cKitintCD101–或cKitloCD101–之一，且第二群体包括可以是cKit-CD101+的成熟嗜中性粒细胞。在一些实例中，第一嗜中性粒细胞群体可以进一步包含呈cKitloCD101+的未成熟嗜中性粒细胞。在一些实例中，所述方法可进一步包括根据一种或多种生物标记物的表达来表征和/或分开嗜中性粒细胞，所述生物标记物选自下组：CD101、cKit、Ly6C、CD106、SiglecF、CD115、CD205、CD11b、Gr1和CXCR4。在一些实例中，增殖性嗜中性粒细胞可以包括原嗜中性粒细胞和前嗜中性粒细胞。在一些实例中，原嗜中性粒细胞可以是CD101-cKitHiLy6C+CD106+SiglecF-CD115-CD205-CD11bLoGr1LoCXCR4Hi，前嗜中性粒细胞可以是CD101-cKitloLy6C+CD106++SiglecF-CD115-CD205+CD11bHiGr1HiCXCR4Hi或CD101-cKitintLy6C+CD106++SiglecF-CD115-CD205+CD11bHiGr1HiCXCR4Hi，未成熟嗜中性粒细胞可以是CD101-cKitintLy6C+CD106+SiglecF-CD115-CD205+CD11bHiGr1HiCXCR4Lo或CD101-cKitloLy6C+CD106+SiglecF-CD115-CD205+CD11bHiGr1HiCXCR4Lo和成熟嗜中性粒细胞可以是CD101+cKit-Ly6C+CD106loSiglecF-CD115-CD205+CD11bHiGr1HiCXCR4Lo。根据本专利技术的另一个方面，提供了一种用于分离嗜中性粒细胞的试剂盒。在一些实例中，所述试剂盒可以包含用于检测嗜中性粒细胞上CD101的表达的试剂；和/或分离器，其用于根据嗜中性粒细胞上CD101的表达分离包含增殖性嗜中性粒细胞的第一群体和包含成熟嗜中性粒细胞的第二群体。在一些实例中，第一群体可以表达CD101-和第二群体可以表达CD101+。在一些实例中，所述试剂盒可用于分离人嗜中性粒细胞，且所述试剂盒可进一步包含用于检测人嗜中性粒细胞上CD10的表达的试剂，并且所述分离器可适应于根据嗜中性粒细胞上CD10的表达分开嗜中性粒细胞，其中包含增殖性嗜中性粒细胞的第一群体是CD10-CD101-，并且包含成熟嗜中性粒细胞的第二群体是CD10+CD101+，任选地第二群体还包含呈CD10-CD101+的未成熟嗜中性粒细胞。在一些实例中，用于检测CD10表达的试剂是适应于靶向CD10的抗体，和/或其中用于检测CD101表达的试剂是适应于靶向CD101的抗体。在一些实例中，所述试剂盒可以进一步包括用于检测一种或多种生物标记物在嗜中性粒细胞上的表达的试剂，所述生物标记物选自下组：CD49d、CD16、CXCR2、CD34、CD66、CD15、CD71和CD11b，且其中所述分离器适应于根据嗜中性粒细胞上CD49d、CD16、CXCR2、CD34、CD66、CD15、CD71和CD11b中的一种或多种的表达来分开嗜中性粒细胞。在一些实例中，所述试剂盒可以用于分开鼠嗜中性粒细胞，且其中所述分离器可以进一步适应于根据CD101和/或cKit的表达分开嗜中性粒细胞，其中第一群体可以包含增殖性嗜中性粒细胞，其是cKithiCD101–、cKitintCD101–或cKitloCD101–之一，并且第二群体可以包含成熟嗜中性粒细胞，其是cKit-CD101+，任选地其中第一群体还可以包含呈cKitloCD101+的未成熟嗜中性粒细胞。在一些实例中，用于检测CD101和/或cKit表达的试剂可以是适应于靶向CD101和/或cKit的抗体。在一些实例中，所述试剂盒可进一步包括用于检测一种或多种生物标记物在嗜中性粒细胞上表达的试剂，所述生物标记物例如但不限于CD101、cKit、Ly6C、CD106、SiglecF、CD115、CD205、CD11b、Gr1、CXCR4等，且其中所述分离器可适应于根据所述生物标记本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种表征和/或分开嗜中性粒细胞的方法，所述方法包括：/n根据所述嗜中性粒细胞上CD101的表达，将所述嗜中性粒细胞表征和/或分开为包含增殖性嗜中性粒细胞的第一群体以及包含成熟嗜中性粒细胞的第二群体。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180126 SG 10201800714R1.一种表征和/或分开嗜中性粒细胞的方法，所述方法包括：
根据所述嗜中性粒细胞上CD101的表达，将所述嗜中性粒细胞表征和/或分开为包含增殖性嗜中性粒细胞的第一群体以及包含成熟嗜中性粒细胞的第二群体。


2.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一群体表达CD101-，而所述第二群体表达CD101+。


3.根据权利要求1或2所述的方法，其中当所述嗜中性粒细胞是人嗜中性粒细胞时，所述方法进一步包括根据所述嗜中性粒细胞上CD10的表达来表征和/或分开所述嗜中性粒细胞，其中包含增殖性嗜中性粒细胞的所述第一群体是CD10-CD101-，而包含成熟嗜中性粒细胞的所述第二群体是CD10+CD101+，任选地所述第二嗜中性粒细胞群体还包含为CD10–CD101+的未成熟嗜中性粒细胞。


4.根据权利要求3所述的方法，其中所述方法还包括根据选自下组的一种或多种生物标记物的表达来表征和/或分开所述嗜中性粒细胞：CD49d、CD16、CXCR2、CD34、CD66、CD15、CD71和CD11b。


5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述增殖性嗜中性粒细胞包括原嗜中性粒细胞和前嗜中性粒细胞。


6.根据权利要求5所述的方法，其中所述原嗜中性粒细胞是CD101-CD10-CD16-CD34-CD66b+CD15+CD71+CD49d+CD11b-CXCR2-，所述前嗜中性粒细胞是CD101-CD10-CD16-CD34-CD66b+CD15+CD71+CD49d+CD11b+CXCR2-，所述未成熟嗜中性粒细胞是CD101+CD10-CD16-CD34-CD66b+CD15+CD71-CD49dloCD11b+CXCR2-，而所述成熟嗜中性粒细胞是CD101+CD10+CD16+CD34-CD66b+CD15+CD71-CD49dloCD11b+CXCR2+。


7.根据权利要求1或2所述的方法，其中当所述嗜中性粒细胞是鼠嗜中性粒细胞时，所述方法进一步包括根据所述嗜中性粒细胞上cKit的表达来表征和/或分开所述嗜中性粒细胞，其中包含增殖性嗜中性粒细胞的所述第一群体是cKithiCD101–、cKitintCD101–或cKitloCD101–之一，而包含成熟嗜中性粒细胞的所述第二群体是cKit-CD101+，任选地所述第一嗜中性粒细胞群体还包含为cKitloCD101+的未成熟嗜中性粒细胞。


8.根据权利要求7所述的方法，其中所述方法还包括根据选自下组的一种或多种生物标记物的表达来表征和/或分开所述嗜中性粒细胞：CD101、cKit、Ly6C、CD106、SiglecF、CD115、CD205、CD11b、Gr1和CXCR4。


9.根据权利要求7或8所述的方法，其中所述增殖性嗜中性粒细胞包括原嗜中性粒细胞和前嗜中性粒细胞。


10.根据权利要求9所述的方法，其中所述原嗜中性粒细胞是CD101-cKitHiLy6C+CD106+SiglecF-CD115-CD205-CD11bLoGr1LoCXCR4Hi，所述前嗜中性粒细胞是CD101-cKitloLy6C+CD106++SiglecF-CD115-CD205+CD11bHiGr1HiCXCR4Hi或CD101-cKitintLy6C+CD106++SiglecF-CD115-CD205+CD11bHiGr1HiCXCR4Hi，所述未成熟嗜中性粒细胞是CD101-cKitintLy6C+CD106+SiglecF-CD115-CD205+CD11bHiGr1HiCXCR4Lo或CD101-cKitloLy6C+CD106+SiglecF-CD115-CD205+CD11bHiGr1HiCXCR4Lo，而所述成熟嗜中性粒细胞是CD101+cKit-Ly6C+CD106loSiglecF-CD115-CD205+CD11bHiGr1HiCXCR4Lo。


11.一种用于分离嗜中性粒细胞的试剂盒，所述试剂盒包括：
用于检测CD101在嗜中性粒细胞上表达的试剂；和/或
分离器，用于根据所述嗜中性粒细胞上CD101的表达分离包含增殖嗜中性粒细胞的第一群体和包含成熟嗜中性粒细胞的第二群体。


12.根据权利要求11所述的试剂盒，其中所述第一群体表达CD101-，并且所述第二群体表达CD101+。


13.根据权利要求12所述的试剂盒，其中所述试剂盒用于分开人嗜中性粒细胞，并且所述试剂盒还包含用于检测CD10在人嗜中性粒细胞上的表达的试剂，并且所述分离器适应于根据CD10在所述嗜中性粒细胞上的表达分开所述嗜中性粒细胞，其中包含增殖性嗜中性粒细胞的所述第一群体是CD10–CD101–，并且包含成熟嗜中性粒细胞的所述第二群体是CD10+CD101+，任选地所述第二群体还包含为CD10–CD101+的未成熟嗜中性粒细胞。


14.根据权利要求12所述的试剂盒，其中所述用于检测CD10表达的试剂为适应于靶向CD10的抗体，和/或其中所述用于检测CD101表达的试剂为适应于靶向CD101的抗体。


15.根据权利要求11至14中任一项所述的试剂盒，其中所述试剂盒还包含用于检测所述嗜中性粒细胞上一种或多种生物标记物的表达的试剂，所述生物标记物选自下组：CD49d、CD16、CXCR2、CD34、CD66、CD15、CD71和CD11b，并且其中所述分离器适应于根据所述嗜中性粒细胞上CD49d、CD16、CXCR2、CD34、CD66、CD15、CD71和CD11b中的一种或多种的表达分开所述嗜中性粒细胞。


16.根据权利要求15所述的试剂盒，其中所述试剂盒用于分离鼠嗜中性粒细胞，且其中所述分离器进一步适应于根据CD101和/或cKit的表达分开嗜中性粒细胞，其中包含增殖性嗜中性粒细胞的第一群体是cKithiCD101–、cKitintCD101–或cKitloCD101–之一，并且包含成熟嗜中性粒细胞的第二群体是cKit-CD101+，任选地，其中所述第一群体还包含为cKitloCD101+的未成熟嗜中性粒细胞。


17.根据权利要求11或16所述的试剂盒，其中用于检测CD101和/或cKit表达的试剂是适应于靶向CD101和/或cKit的抗体。


18.根据权利要求11、16或17中任一项所述的试剂盒，其中所述试剂盒还包含用于检测一种或多种生物标记物在所述嗜中性粒细胞上的表达的试剂，所述生物标记物选自下组：CD101、cKit、Ly6C、CD106、SiglecF、CD115、CD205、CD11b、Gr1和CXCR4，且其中所述分离器适应于根据所述嗜中性粒细胞上CD101、cKit、Ly6C、CD106、SiglecF、CD115、CD205、CD11b、Gr1和/或CXCR4的表达分开所述嗜中性粒细胞。


19.一种分离和/或富集所需的嗜中性粒细胞的方法，所述方法包括：
根据嗜中性粒细胞上CD101的表达将样品中的嗜中性粒细胞分类为包含增殖性嗜中性粒细胞的第一群体以及包含成熟嗜中性粒细胞的第二群体；和从所述第一群体和/或所述第二群体分离和/或富集一种或多种嗜中性粒细胞。


20.根据权利要求19所述的方法，其中所述样品获自人受试者，且其中所述方法还包括根据所述嗜中性粒细胞上CD10的表达将所述嗜中性粒细胞分类，其中包含增殖性嗜中性粒细胞的所述第一群体是CD10-CD101-，并且包含成熟嗜中性粒细胞的所述第二群体是CD10+CD101+，任选地，所述第二群体还包含未成熟嗜中性粒细胞并且是CD10–CD101+。


21.根据权利要求20所述的方法，其中所述方法包括用适应于靶向CD10和/或CD101的试剂检测CD10和/或CD101的表达。...

【专利技术属性】
技术研发人员：L·G·吴，M·埃瓦德，I·W·H·郭，
申请(专利权)人：新加坡科技研究局，
类型：发明
国别省市：新加坡;SG