一种热刺激诱导细胞凋亡的方法技术

本发明专利技术属于细胞生物学技术领域，涉及一种热刺激诱导细胞凋亡的方法，具体为采用PCR控温系统作为热刺激来诱导细胞凋亡的方法。本发明专利技术采用梯度逐渐升温的方式；所述的梯度逐渐升温为温度升高后停留一段时间；升到目标温度后，保持一段时间后梯度逐渐降温。本发明专利技术建立了基于PCR精确控温系统梯度逐渐升温模式诱导细胞发生凋亡的模型，该方法早期凋亡率大于晚期凋亡率+坏死率，且重现性、稳定性好。早期凋亡率高可以实现对药物的效果验证及相关凋亡蛋白的检测；采用热刺激方法致细胞凋亡可用来模拟机体因多种原因（病原微生物感染、机体炎症反应、一些恶性类的肿瘤疾病等）导致的发热，这种发热导致的热刺激会对机体的心肌细胞等造成损伤。

【技术实现步骤摘要】
一种热刺激诱导细胞凋亡的方法
本专利技术属于细胞生物学
，涉及一种热刺激诱导细胞凋亡的方法，具体为采用PCR控温系统或类似的精确控温装置作为热刺激来诱导细胞凋亡的方法。
技术介绍
细胞凋亡的概念被提出是用于描述形态学上不同的细胞死亡方式。细胞凋亡被描述为一种独特的细胞死亡途径，细胞主动参与自身清除。对于细胞凋亡的研究，重复和稳定性的方法至关重要。引起细胞凋亡的因素有很多，如化学因素（过氧化氢、二硫苏糖醇、脂多糖、毒物等）、物理因素（缺氧、机械性损伤、高温、低温、电流等）、生物因素（各种致病菌、病毒、寄生虫、氧化低密度脂蛋白、融合蛋白、单克隆抗体）和变态反应等。热刺激可以诱导许多细胞系的凋亡，但严重的热应激会对生物体及其器官产生负面影响，导致热休克，甚至导致猝死。热刺激诱导的活性氧的产生与各种细胞类型的凋亡有关。热刺激可通过内源性和外源性途径诱导细胞凋亡。大多数据表明，热刺激可通过激活固有的凋亡通路杀死细胞。例如，Bid是一个促凋亡的Bcl-2家族成员，通过Bax/Bak凋亡途径诱导热疗后细胞凋亡，这与它作为Bax和Bak直接激活剂本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种热刺激诱导细胞凋亡的方法，其特征在于，采用梯度逐渐升温的方式，所用设备为精确控温装置；所述的梯度逐渐升温为温度升高后停留一段时间，升到目标温度后，保持一段时间后梯度逐渐降温。/n

【技术特征摘要】
1.一种热刺激诱导细胞凋亡的方法，其特征在于，采用梯度逐渐升温的方式，所用设备为精确控温装置；所述的梯度逐渐升温为温度升高后停留一段时间，升到目标温度后，保持一段时间后梯度逐渐降温。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的设备为：PCR精确控温系统。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）细胞培养；
（2）细胞的处理：取对数生长期的细胞，接种于孔板中，培养，待细胞长成单层后用胰蛋白酶消化处理，加入新鲜的DMEM培养基调整细胞密度，吸取细胞悬液；
（3）诱导凋亡：热刺激步骤（2）的悬液，加热程序为从37°C开始以0.5-1.5°C为单位梯度逐渐升温，每个温度梯度...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨勇，杨佳，容蓉，马青云，于钦辉，
申请(专利权)人：山东中医药大学，
类型：发明
国别省市：山东;37