一种耐高温植物乳杆菌菌剂及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一株植物乳杆菌及其产品的制备方法与应用。本发明专利技术的植物乳杆菌为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，其菌株号为SG‑03，其在广东省微生物菌种保藏中心的登记入册编号为GDMCC No：61035。该菌的乳酸产量较高，且具有较好的抑菌活性，能耐高温。植物乳杆菌SG‑03发酵后高温喷雾干燥所制备的活菌剂产品可以促进肉鸡生长，提高肉鸡的产能。植物乳杆菌SG‑03对人、畜安全，没有环境污染问题，培养条件简单，容易保存，耐高温方便加工，适合开发应用。

【技术实现步骤摘要】
一种耐高温植物乳杆菌菌剂及其制备方法与应用
本专利技术涉及生物
中一种植物乳杆菌菌剂及其制备方法与应用。
技术介绍
近年来，抗生素在人和动物中的普遍使用甚至是滥用所带来的弊端日益彰显。长期使用抗生素会使人和动物肠道内的正常菌群失调，影响机体免疫功能的形成，甚至因长期滥用抗生素产生了具有多重抗药性的“超级细菌”。因此，寻找抗生素的替代品成为人类未来生存和发展的紧迫任务。原生质体融合是一项十分有用的育种技术，与其他育种技术相比具有以下优点：(1)能克服有性杂交的不亲和性,冲破种属的界限，而达到种间、属间乃至界间的融合，实现远缘杂交；(2)重组频率高、受结合型或致育型限制小，以及遗传物质传递完整且不需要完全了解作用机制；(3)避免了分离、提纯、剪切、拼接等基因操作，在技术和仪器设备上的要求比基因工程简单，投资少；(4)去除了细胞壁的阻碍，两亲株融合后整套基因组相互接触，从而构建集双亲优良遗传性状于一体的融合子。植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)是目前已报道的几乎天然存在于所有脊椎动物和哺乳动物肠道内的乳酸菌。植物乳杆菌对肠黏膜具有很强的黏附能力和优异的抗胃肠道消化液耐受能力，能够在人体肠道中定植并繁殖，可改善肠道菌群分布，拮抗有害菌定植，避免罹患肠道疾病；植物乳杆菌能够产生一种被称为“植物乳杆菌素”的多肽类广谱抗菌物质，能广泛抑制革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌，有助于其在动物胃肠道内的定植。植物乳杆菌作为益生菌制剂可显著增加肠黏膜IgA的含量，提高机体免疫力从而维护肠道生态平衡，促进动物健康。植物乳杆菌作为国际上公认的新型益生乳酸菌，具有很高的理论研究和生产应用价值。但是，植物乳杆菌不能形成具有强抗逆性的休眠体，如芽孢，温度耐受性较差，这也大大限制了其在饲料加工中的应用。地衣芽孢杆菌以其较好的产酶和产孢特性，具备极好的耐高温、耐酸碱、易贮存等特点被广泛作为益生菌或致病菌竞争性抑制剂应用于畜禽养殖业中。近年来,国内外关于地衣芽孢杆菌在各方面应用的报道日益增多。在医药、饲料加工、农药等行业，均取得了较好的研究成果。研究表明,地衣芽孢杆菌可以通过促进肠道优势菌群的生长而进一步提高营养物质的消化和吸收,具有明显的促生长作用和降低料重比的功能。植物乳杆菌和地衣芽孢杆菌都是对动物肠道健康有益的益生菌，将此两种菌进行融合，可实现融合子既具备了地衣芽孢杆菌较强的产蛋白酶、产淀粉酶能力以及形成芽孢可耐高温的能力，也具有了乳酸菌耐受胃部的低酸环境以及肠道前段高胆盐环境的能力，肠道定殖能力大大增强，同时还能够克服其不易培养和制剂化的缺陷，融合子在厌氧和有氧环境中都能很好生长，并具有高抗逆性的能力。开展植物乳杆菌与地衣芽孢杆菌的融合选育研究，以获得兼具两亲本菌株优良性状的融合菌株，实现一菌多效，是获得乳酸菌和芽孢菌优势互补的一个全新课题，具有极高的现实意义与应用价值。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是如何利用一株能够产乳酸，又兼具芽孢菌的产酶和抗逆性、耐高温性的融合菌株来制备的菌剂，并进行应用。为了解决以上技术问题，本专利技术提供一种菌剂，所述菌剂含有植物乳杆菌SG-03和/或所述植物乳杆菌SG-03的代谢物，所述植物乳杆菌是植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)SG-03，其在广东省微生物菌种保藏中心的登记入册编号为GDMCCNo：61035。该菌株已于2020年5月27日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(简称GDMCC)，保藏地址为广州市先烈中路100号大楼59号楼5楼广东省微生物研究所，邮编510070。下文简称植物乳杆菌SG-03。植物乳杆菌SG-03的培养物也属于本专利技术的保护范围。植物乳杆菌SG-03的培养物是将植物乳杆菌SG-03在微生物培养基中培养得到的物质(如含有植物乳杆菌SG-03和分泌到液体培养基内的物质即发酵液，或如含有植物乳杆菌SG-03和分泌到固体培养基内的物质)。上述植物乳杆菌SG-03的培养物具有下述W1-W3的至少一种功能：W1、生产短链脂肪酸(例如乳酸)；W2、抑制革兰氏阳性菌的活性；W3、抑制革兰氏阴性菌的活性；W4、促进肉鸡生长；W5、提高肉料比；W6、提高蛋白质的表观消化率；W7、增加肉鸡体重；W8、提高肉鸡免疫功能。本专利技术还提供一种产品，所述产品含有植物乳杆菌SG-03和/或所述植物乳杆菌SG-03的代谢物和/或所述植物乳杆菌SG-03的培养物。所述产品可为菌剂、含有所述菌剂的微生态制剂、或含有所述菌剂或所述微生态制剂的饲料。上述产品的活性成分可为植物乳杆菌SG-03或/和植物乳杆菌SG-03的代谢物或/和所述植物乳杆菌SG-03的培养物，上述产品的活性成分还可含有其他生物成分或非生物成分，上述产品的其他活性成分本领域技术人员可根据产品的效果确定。所述产品具体可为下述任一种产品：V1、生产乳酸的产品；V2、抑制革兰氏阳性菌的产品；V3、抑制革兰氏阴性菌的产品；V4、促进动物生长的产品；V5、提高动物肉料比的产品；V6、提高蛋白质的表观消化率的产品；V7、增加动物体重的产品；V8、提高动物免疫功能的产品。上述产品中，所述提高动物免疫功能，体现为下述Z1-Z7中的全部或部分：Z1、提高肝脏抗氧化能力；Z2、提高胸肌抗氧化能力；Z3、提高空肠抗氧化能力；Z4、提稿血清抗氧化能力；Z5、增加血清IgG含量；Z6、增加血清白细胞介素Ⅰ含量；Z7、增加空肠粘膜SIgA含量。上文所述动物可为家禽，具体可为肉鸡。所述产品还可包括载体。所述载体可为固体载体或液体载体。所述固体载体可为各种固体培养基、碳酸钙、脱脂米糠等中的至少一种；所述液体载体可为水或各种液体培养基等中的至少一种。所述产品中，植物乳杆菌SG-03或/和植物乳杆菌SG-03的代谢物或/和所述植物乳杆菌SG-03的培养物可以以被培养的活细胞、活细胞的发酵液、细胞培养物的滤液或细胞与滤液的混合物的形式存在。所述产品的剂型可为多种剂型，如液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂。根据需要，所述产品中还可添加表面活性剂(如吐温20、吐温80等)、粘合剂、稳定剂(如抗氧化剂)、pH调节剂等。上述菌剂或/和上述植物乳杆菌SG-03或/和上述植物乳杆菌SG-03的代谢物或/和上述植物乳杆菌SG-03的培养物，或/和上述产品的下述任一种应用也属于本专利技术的保护范围：U1、在乳酸生产中的应用；U2、在抑菌中的应用；U3、促进动物生长中的应用；U4、在动物养殖中的应用；U5、在提高动物免疫功能中的应用。上文中，所述植物乳杆菌SG-03的代谢物可为植物乳杆菌SG-03的发酵液。植物乳杆菌SG-03的发酵液可按照如下方法制备：在液体发酵培养基中培养植物乳杆菌SG-03，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种菌剂，其特征在于：所述菌剂含有植物乳杆菌SG-03和/或所述植物乳杆菌SG-03的代谢物，所述植物乳杆菌SG-03为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，其在广东省微生物菌种保藏中心的登记入册编号为GDMCC No：61035。/n

【技术特征摘要】
1.一种菌剂，其特征在于：所述菌剂含有植物乳杆菌SG-03和/或所述植物乳杆菌SG-03的代谢物，所述植物乳杆菌SG-03为植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)，其在广东省微生物菌种保藏中心的登记入册编号为GDMCCNo：61035。


2.植物乳杆菌SG-03的培养物，其特征在于：其为将植物乳杆菌SG-03在微生物培养基中培养得到的物质。


3.根据权利要求2所述植物乳杆菌SG-03的培养物，其特征在于：具有W1-W8的至少一种功能：
W1、生产乳酸；
W2、抑制革兰氏阳性菌的活性；
W3、抑制革兰氏阴性菌的活性；
W4、促进肉鸡生长；
W5、提高肉料比；
W6、提高蛋白质的表观消化率；
W7、增加肉鸡体重；
W8、提高肉鸡免疫功能。


4.一种产品，其特征在于：含有权利要求1所述的植物乳杆菌SG-03或/和植物乳杆菌SG-03的代谢物和/或权利要求2或3所述的植物乳杆菌SG-03的培养物。


5.根据权利要求4所述的产品，其特征在于：为下述任一种产品：
V1、生产乳酸的产品；
V2、抑制革兰氏阳性菌的产品；
V3、抑制革兰氏阴性菌的产品；
V4、促进动物生长的产品；
V5、提高动物肉料比的产品；
V6、提高蛋白质的表观消化率的产...

【专利技术属性】
技术研发人员：李军超，黄钦耿，梁玲，翁雪清，吴松刚，
申请(专利权)人：松刚福建生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：福建;35