一种产衣康酸的重组土曲霉菌株及其构建方法与应用技术

一种产衣康酸的重组土曲霉菌株及其构建方法与应用，属于基因工程领域。为了提高衣康酸的产量，本发明专利技术提供了一种产衣康酸的重组土曲霉菌株，是在出发菌株中过表达玉蜀黍黑粉菌的反式乌头酸脱羧酶而获得的；出发菌株为土曲霉(Aspergillus terreus)；所述反式乌头酸脱羧酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码所述反式乌头酸脱羧酶基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明专利技术提供重组菌株的衣康酸发酵产量普遍高于出发菌株，其中产量最高的菌株在摇瓶水平上比出发菌株提高了约50％，具有很强的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种产衣康酸的重组土曲霉菌株及其构建方法与应用
本专利技术涉及基因工程领域，具体涉及一种产衣康酸的重组土曲霉菌株及其构建方法与应用。
技术介绍
衣康酸(itaconicacid)是目前在聚合物工业中用作单体或共聚单体，主要用于合成腈纶化纤、树脂、塑料、橡胶、涂料、表面活性剂、高分子螯合剂、造纸、医药、农药、轻工、食品、丝绸等领域,也被鉴定为哺乳动物体内产生的具有抗菌活性的代谢物。在土曲霉中，衣康酸的代谢途径是由三羧酸循环分流出来的，三羧酸循环中的顺乌头酸在顺乌头酸脱羧酶(cis-aconiticaciddecarboxylase,CAD)的催化作用下脱羧形成衣康酸。玉蜀黍黑粉菌Ustilagomaydis是另外一种能天然合成衣康酸的微生物，2016年研究人员发现玉蜀黍黑粉菌的衣康酸合成途径与土曲霉有差异，它是利用反式乌头酸作为前体，在反式乌头酸脱羧酶(trans-aconitatedecarboxylase，Tad1)的催化作用下脱羧形成衣康酸(ElenaGeiser,SandraKPrzybilla,AlexandraFriedric本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种产衣康酸的重组土曲霉菌株，其特征在于，所述重组土曲霉菌株是在出发菌株中过表达玉蜀黍黑粉菌的反式乌头酸脱羧酶而获得的；所述出发菌株为土曲霉(Aspergillus terreus)。/n

【技术特征摘要】
1.一种产衣康酸的重组土曲霉菌株，其特征在于，所述重组土曲霉菌株是在出发菌株中过表达玉蜀黍黑粉菌的反式乌头酸脱羧酶而获得的；所述出发菌株为土曲霉(Aspergillusterreus)。


2.根据权利要求1所述产衣康酸的重组土曲霉菌株，其特征在于，所述出发菌株为土曲霉CICC40205、土曲霉NRRL1960、土曲霉DSM23081、土曲霉TN484或土曲霉TN484-M1。


3.根据权利要求1所述产衣康酸的重组土曲霉菌株，其特征在于，所述反式乌头酸脱羧酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。


4.根据权利要求1所述产衣康酸的重组土曲霉菌株，其特征在于，编码所述反式乌头酸脱羧酶基因的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示。


5.根据权利要求1所述产衣康酸的重组土曲霉菌株，其特征在于，所述重组土曲霉菌株中含有反式乌头酸脱羧酶的表达盒，所述表达盒由构巢曲霉三磷酸甘油醛脱氢酶基因启动子PgpdAt、反式乌头酸脱羧酶基因和构巢曲霉色氨酸合成酶终止子TtrpC组成。


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【专利技术属性】
技术研发人员：吕雪峰，柴小高，黄雪年，周昌，王敏，刘璐，谢义生，周凯华，
申请(专利权)人：中国科学院青岛生物能源与过程研究所，浙江国光生化股份有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37