【技术实现步骤摘要】
一种撕裂蜡孔菌高浓度孢子液的制备方法及应用
本专利技术属于农业微生物
，特别涉及一种撕裂蜡孔菌高浓度孢子液的制备方法及应用。
技术介绍
我国化肥农药的使用量位居世界各国之首，高量的化肥农药投入带来了一系列环境、生态及食品安全问题。在现代集约化农业生产中，需要大量频繁施用农药防治作物病害。但长期、大量施用农药造成了一系列生产、环境和健康问题，如病菌耐药性增强，药效降低，用药量增大，环境和农产品的农药残留量增加，影响食品安全，危害人类健康等。真菌病害占作物病害的70％～80％。目前，病害防治的主要手段是选育高抗品种，加强田间管理和施用化学农药为主。但是，具有育种周期较长，费用高昂；田间管理需要生产者较高的操作水平，消耗大量劳力的缺陷；而大量施用化学农药产生上述一系列生产、环境和健康问题。因此，研制安全、无毒、高效的生物农药十分必要。生防菌主要通过分泌抗菌物质，与病原菌竞争营养空间，杀灭或抑制病原微生物，或诱导植物获得抗性，提高植物自身免疫力，达到少施或不施农药；促生菌能分泌促生物质如生长素类，促进植物生长，...
【技术保护点】
1.一种撕裂蜡孔菌高浓度孢子液的制备方法，其特征在于，包括：/n种子培养，将撕裂蜡孔菌菌株接种至培养基中培养得到种子液，再经发酵罐培养形成发酵罐菌丝体；/n发酵液预处理，待发酵罐菌丝体发酵完毕后，加入助滤剂，搅拌均匀后得到预处理发酵液；/n固态菌丝体的制备，将预处理发酵液送入板框压滤器过滤，弃滤液，所得滤饼再进行干燥脱水，得到固态菌丝体；/n稀释菌丝体，加入孢子保护剂，搅拌混匀后即得菌丝体稀释液；/n密闭封存，将菌丝体稀释液进行分装密封存放4个月以上后得到撕裂蜡孔菌高浓度孢子液。/n
【技术特征摘要】
1.一种撕裂蜡孔菌高浓度孢子液的制备方法，其特征在于，包括：
种子培养，将撕裂蜡孔菌菌株接种至培养基中培养得到种子液，再经发酵罐培养形成发酵罐菌丝体；
发酵液预处理，待发酵罐菌丝体发酵完毕后，加入助滤剂，搅拌均匀后得到预处理发酵液；
固态菌丝体的制备，将预处理发酵液送入板框压滤器过滤，弃滤液，所得滤饼再进行干燥脱水，得到固态菌丝体；
稀释菌丝体，加入孢子保护剂，搅拌混匀后即得菌丝体稀释液；
密闭封存，将菌丝体稀释液进行分装密封存放4个月以上后得到撕裂蜡孔菌高浓度孢子液。
2.根据权利要求1所述的撕裂蜡孔菌高浓度孢子液的制备方法，其特征在于，种子培养包括：
斜面种子培养，在无菌条件下将所述菌株涂布接种于斜面培养基上，得斜面菌丝；
摇瓶种子培养，在无菌条件下，挖取生长成熟的斜面菌丝，接种于摇瓶培养基中，再置于恒温培养振荡器上，得摇瓶种子液；
种子罐培养，将摇瓶种子液种入种子罐培养基中，得种子罐种子液；
发酵罐培养，将种子罐种子液压入发酵罐培养基中，得发酵罐菌丝体。
3.根据权利要求2所述的撕裂蜡孔菌高浓度孢子液的制备方法，其特征在于，斜面种子培养步骤中，培养温度为22-30℃，培养时间为7-10天；
摇瓶种子培养步骤中，振荡频率为200-260rpm，培养温度为22-30℃，培养时间为48-90小时；
种子罐培养步骤中，振荡频率为120-200rpm，空气流量为1:0.8-2.0vvm，罐压0.05MPa，培养温度为22-30℃，培养时间为60-90小时；
发酵罐培养步骤中，振荡频率为60-140rpm，空气流量为1:0.2-0.8vvm，罐压0.05MPa，培养温度为22-30℃，培养时间为110-170小时；
发酵液预处理步骤中，加入助滤剂珍珠岩，搅拌混合均匀制得预处理发酵液；
固态菌丝体的制备步骤中，所得滤饼再进行干燥脱水，得到固态菌丝体；
稀释菌丝体步骤中，按菌丝体的重量加入2.0～2.5倍的孢子保护剂，孢子保护剂包括有氯化钠溶液和磷酸盐缓冲液；搅拌混匀后即得pH值为5.8-6.2的菌丝体稀释液。
4.根据权利要求1所述的撕裂蜡孔菌高浓度孢子液的制备方法，其特征在于，稀释菌丝体步骤中，需要先制备孢子保护剂，步骤如下：
将18kg氯化钠、16.68kg磷酸二氢钾、1.74kg磷酸氢二钾置于容积为2000L的配液罐中，加入适量饮用水，搅拌混合均匀后制得孢子保护剂。
5.根据权利要求2所述的撕裂蜡孔菌高浓度孢子液的制备方法，其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：四川金珠生态农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51
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