一种地黄多糖/异种煅烧骨复合骨修复材料制造技术

本发明专利技术实施例公开了一种地黄多糖/异种煅烧骨复合骨修复材料，属于医用材料技术领域。该材料由异种锻烧骨支架材料与地黄多糖溶液复合而成。本发明专利技术的地黄多糖具有优异的促成骨作用，与异种锻烧骨支架材料进行复合后，在不影响细胞活性的前提下，能够增强异种锻烧骨的骨诱导活性，达到促进骨形成和骨缺损修复的目的。本发明专利技术的骨修复材料的促进骨生长活性和骨缺损修复活性接近自体骨，且生产工艺操作简单，关键技术易控制，生产成本较低，为临床提供更优质的骨修复方案。

【技术实现步骤摘要】
一种地黄多糖/异种煅烧骨复合骨修复材料
本专利技术实施例涉及医用材料
，具体涉及一种地黄多糖/异种煅烧骨复合骨修复材料。
技术介绍
临床上常见如高能量外伤、骨肿瘤切除等各种原因所致大块骨缺损，通常无法自行愈合，是临床亟待解决的棘手难题。自体骨移植凭借其优异的骨诱导、骨传导和成骨能力以及无免疫原性、无细胞毒性和组织相容性较好等优点而成为骨缺损修复的金标准，但是自体骨存在供区疼痛和局部并发症如血肿、骨折、感染以及术后瘢痕增生的潜在发生以及数量有限等缺点，其临床应用仍然受限。相比之下，与之性能相似的异体骨却不存在供区并发症等问题，但也存在如传播疾病，排斥反应、骨不愈合、移植物吸收和骨折及供体缺乏等问题。为了应对上述问题，异种骨似乎是一种可靠的选择。与自体骨和异体骨相比，异种骨亦具备一定的力学强度和骨诱导性能，且来源充足，安全性可靠，可以依靠物理或化学的手段消除或降低免疫原性。常见的异种骨为煅烧骨，异种锻烧骨是由新鲜牛松质骨经高温二次烧结而成，是一种磷酸钙系天然生物支架材料，其结晶特征与人工羟基磷灰石相似。异种锻烧骨的孔隙率高，这种多孔结构有助于增加表面积并帮助细胞因子释放到细胞附近，多孔结构还为新骨的生长提供了空间并加速成骨细胞的生长，其降解产生的钙和磷酸离子还可为新骨形成提供基础。与人工合成的羟基磷灰石相比，用异种锻烧骨培养的成骨细胞表现出更高的碱性磷酸酶活性。异种锻烧骨具备优良的生物相容性和骨传导能力，却也存在骨诱导活性不足的问题，解决该问题将有助于更好的促进骨缺损的修复。2015版《中国药典》记载，地黄为玄参科植物地黄RehmanniaglutinosaLibosch.的新鲜或干燥块根。作为中医常用药，其广见于中成药及临床调剂处方中，多用以防治骨质疏松症，已有千年的用药经验，效果显著。临床常用治疗骨质疏松的中成药如骨疏康胶囊、仙灵骨葆胶囊、六味地黄丸、左归丸、右归丸、金匮肾气丸、知柏地黄丸等组方中均含有地黄，可见组方中地黄抗骨质疏松作用的重要性。地黄的主要活性成分之一为地黄多糖，体外可诱导SD大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化，具有一定的骨诱导活性。另外，熟地黄水煎液提取物可调节糖尿病性骨质疏松大鼠的骨形成。
技术实现思路
为此，本专利技术实施例提供一种地黄多糖/异种煅烧骨复合骨修复材料，使用的地黄多糖由生地黄多糖和熟地黄多糖按照一定配比混合而成，具有优异的促成骨效果，与异种煅烧骨复合能够有效解决现有异种煅烧骨存在的骨诱导活性不足的问题。为了实现上述目的，本专利技术实施例提供如下技术方案：根据本专利技术实施例的第一方面，本专利技术实施例提供一种地黄多糖/异种煅烧骨复合骨修复材料，由异种锻烧骨支架材料与地黄多糖溶液复合而成。进一步地，所述异种锻烧骨支架材料的制备方法包括：取成牛的双侧股骨，将其股骨骺端松质骨部分锯下，剥离附着于骨周围的其他组织，随后用切割机将其切成3-6×3-6×3-6mm的骨块并冲洗；将冲洗后的骨块浸泡在0.5mol/LNaOH溶液中1-3h，纯化水超声清洗3遍，每遍5-15min，随后将骨块浸入3％H2O2溶液15-45min，纯化水超声清洗3遍，每遍5-15min；将处理后的骨块放入沸水中，煮沸1-2h以除去部分蛋白质和脂质，待骨块冷却后烘干过夜，将干燥的骨块放入马弗炉中进行煅烧，控制温度缓慢升温至770℃，温度达770℃后煅烧2-4h；待骨块自然冷却后，研磨打粉，用筛网筛选出粒径在250-1000μm的骨粉装入塑封袋中，经25kGy60Co辐照灭菌后保存于4℃冰箱待用。进一步地，所述地黄多糖溶液的制备方法包括：取生地黄，粉碎，过60-100目筛，得生地黄粉，按料液比(g/ml)1：10-40加入蒸馏水，加热回流提取2-4次，每次1-4h，合并上清液，减压浓缩至膏状，在搅拌条件下，加入乙醇，直至乙醇的最终浓度达到60-90％，静置12h，抽滤取沉淀，冷冻干燥12h，即得生地黄多糖；取生地黄，蒸至黑润，60-80℃烘干，粉碎，过60-100目筛，得熟地黄粉，按料液比(g/ml)1：10-40加入蒸馏水，加热回流提取2-4次，每次1-4h，合并上清液，减压浓缩至膏状，在搅拌条件下，加入乙醇，直至乙醇的最终浓度达到60-90％，静置12h，抽滤取沉淀，冷冻干燥12h，即得熟地黄多糖；取30-70％重量百分含量的生地黄多糖和30-70％重量百分含量的熟地黄多糖混合，加入8～20倍量的清水，搅匀即得。进一步地，所述异种锻烧骨支架材料与地黄多糖溶液的复合包括：将异种煅烧骨支架材料置于地黄多糖溶液中浸泡24-48h，然后-40℃真空冷冻干燥36-72h进行自组装，即得地黄多糖和异种锻烧骨复合骨修复材料。进一步地，所述异种锻烧骨支架材料与地黄多糖溶液的质量比为1：50-500。根据本专利技术实施例的第二方面，本专利技术实施例提供上述的地黄多糖/异种煅烧骨复合骨修复材料在制备骨缺损修补材料中的用途。本专利技术实施例具有如下优点：1、本专利技术的地黄多糖具有优异的促成骨作用，与异种锻烧骨支架材料进行复合后，在不影响细胞活性的前提下，能够增强异种锻烧骨的骨诱导活性，达到促进骨形成和骨缺损修复的目的。2、本专利技术的骨修复材料的促进骨生长活性和骨缺损修复活性接近自体骨，且生产工艺操作简单，关键技术易控制，生产成本较低，为临床提供更优质的骨修复方案。附图说明为了更清楚地说明本专利技术的实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。显而易见地，下面描述中的附图仅仅是示例性的，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图引伸获得其它的实施附图。图1为本专利技术提供的细胞活性测试；图2为本专利技术提供的骨诱导活性HE染色；图3为本专利技术提供的骨诱导活性评分；图4为本专利技术提供的病理切片骨钙素染色显示骨修复材料的成骨能力；图5为本专利技术提供的micro-CT的骨体积分数BV/TV显示骨修复材料的骨缺损修复能力。具体实施方式以下由特定的具体实施例说明本专利技术的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点及功效，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1本实施例的地黄多糖/异种煅烧骨复合骨修复材料：1、异种锻烧骨支架材料的制备取成牛的双侧股骨，将其股骨骺端松质骨部分锯下，剥离附着于骨周围的其他组织，随后用切割机将其切成4×4×4mm的骨块并冲洗；将冲洗后的骨块浸泡在0.5mol/LNaOH溶液中1h，纯化水超声清洗3遍，每遍8min，随后将骨块浸入3％H2O2溶液20min，纯化水超声清洗3遍，每遍8min；将处理后的骨块放入沸水中，煮沸1h以除去部分蛋白质和脂质，待骨块冷却后烘干过夜，将干燥的骨块放入马本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种地黄多糖/异种煅烧骨复合骨修复材料，其特征在于，由异种锻烧骨支架材料与地黄多糖溶液复合而成。/n

【技术特征摘要】
1.一种地黄多糖/异种煅烧骨复合骨修复材料，其特征在于，由异种锻烧骨支架材料与地黄多糖溶液复合而成。


2.根据权利要求1所述的地黄多糖/异种煅烧骨复合骨修复材料，其特征在于，所述异种锻烧骨支架材料的制备方法包括：
取成牛的双侧股骨，将其股骨骺端松质骨部分锯下，剥离附着于骨周围的其他组织，随后用切割机将其切成3-6×3-6×3-6mm的骨块并冲洗；将冲洗后的骨块浸泡在0.5mol/LNaOH溶液中1-3h，纯化水超声清洗3遍，每遍5-15min，随后将骨块浸入3％H2O2溶液15-45min，纯化水超声清洗3遍，每遍5-15min；将处理后的骨块放入沸水中，煮沸1-2h以除去部分蛋白质和脂质，待骨块冷却后烘干过夜，将干燥的骨块放入马弗炉中进行煅烧，控制温度缓慢升温至770℃，温度达770℃后煅烧2-4h；待骨块自然冷却后，研磨打粉，用筛网筛选出粒径在250-1000μm的骨粉装入塑封袋中，经25kGy60Co辐照灭菌后保存于4℃冰箱待用。


3.根据权利要求1所述的地黄多糖/异种煅烧骨复合骨修复材料，其特征在于，所述地黄多糖溶液的制备方法包括：
取生地黄，粉碎，过60-100目筛，得生地黄粉，按料液比(g/ml)1：10-40加入蒸馏水，加热回流提取2-4次，每次1-4h...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐钢，赵彦涛，李忠海，张博程，杨明，曲巍，张卫国，
申请(专利权)人：大连医科大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：辽宁;21