包括亲和色谱法过程的获得百日咳鲍特菌来源蛋白质的方法技术

本发明专利技术涉及包括亲和色谱法过程的获得百日咳鲍特菌(Bordetella Pertussis)来源之蛋白质的方法。本发明专利技术通过以使用蓝色亲和柱的纯化过程而分离百日咳鲍特菌的PT和FHA蛋白提高了PT和FHA蛋白的生产产率。另外，与使用尺寸排阻色谱法(SEC)过程的分离方法相比，当使用该过滤过程时，可显著提高靶蛋白的产出。此外，使用蓝色亲和柱用于分离PT和FHA蛋白的方法降低了树脂费用、操作时间、缓冲剂消耗和生产成本，并且显著提高了PT和FHA蛋白的生产率。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包括亲和色谱法过程的获得百日咳鲍特菌来源蛋白质的方法
本专利技术涉及用于获得百日咳鲍特菌来源的蛋白质的方法，其包括亲和色谱法过程。
技术介绍
百日咳是主要在婴儿中发生并且以咳嗽持续2周或更长为特征的急性呼吸系统疾病。已经报道百日咳由作为革兰氏阴性、需氧的、短球杆菌的百日咳鲍特菌(BordetellaPertussis)引起。百日咳鲍特菌以人作为其唯一的宿主，并且人主要通过呼吸道被感染。另外，百日咳鲍特菌依存于呼吸道黏膜并在人体中引起疾病。在1930年代，开发了细胞百日咳疫苗并且证明对百日咳具有预防作用。另外，在1940年代，百日咳疫苗与破伤风和白喉灭活死疫苗组合使用；然而，报道了全细胞百日咳疫苗的不良作用(癫痫、水肿、发热，等)。因此，需要开发具有安全性的百日咳疫苗。在1950年代，进行了百日咳鲍特菌的发病机制的研究，并且例如百日咳毒素(pertussistoxin，PT)、丝状血凝素(FHA)、百日咳杆菌黏附素(PRN)和菌毛(fimbriae，FIM)等组分被报道为抗原。随后，正在进行包括这些蛋白质的分离和纯化的非细胞百日咳疫苗的开本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.用于获得PT蛋白或FHA蛋白的方法，其包括：/n使用亲和色谱法过程从包含百日咳鲍特菌(Bordetella Pertussis)培养物的样品中分离PT和FHA蛋白的步骤。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20180327 KR 10-2018-00350461.用于获得PT蛋白或FHA蛋白的方法，其包括：
使用亲和色谱法过程从包含百日咳鲍特菌(BordetellaPertussis)培养物的样品中分离PT和FHA蛋白的步骤。


2.权利要求1所述的方法，其中所述色谱法过程包括使用与具有式1结构的化合物结合的树脂：
[式1]





3.权利要求1所述的方法，其中用于所述过程的洗脱缓冲剂包含磷酸钠溶液。


4.权利要求3所述的方法，其中所述洗脱缓冲剂还包含NaCl溶液，并且所述过程通过改变所述NaCl溶液的浓度来进行。


5.权利要求4所述的方法，其中所述NaCl溶液的浓度从0M逐渐提高至3M。


6.权利要求3所述的方法，其中所述磷酸钠溶液的pH为6.5至8.5。


7.权利要求3所述的方法，其中所述磷酸钠溶液的浓度为50mM至200mM。
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【专利技术属性】
技术研发人员：朴钟冠，文在勋，崔起燮，安东浩，全亨珍，金惠连，崔普渼，
申请(专利权)人：株式会社绿十字，
类型：发明
国别省市：韩国;KR