检测游离棉酚的双信号胶体金免疫层析试纸条及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开检测游离棉酚的双信号胶体金免疫层析试纸条及其制备方法和应用。本发明专利技术首先公开了检测游离棉酚的双信号胶体金免疫层析试纸条包括PVC背衬及设置在PVC背衬上的依次搭接的样品垫、结合垫、反应垫和吸水垫；所述结合垫上含有胶体金标记的可识别游离棉酚的单克隆抗体，所述反应垫上依次设置相互平行的分别包被不同浓度的游离棉酚半抗原与载体蛋白偶联物的检测线T

【技术实现步骤摘要】
检测游离棉酚的双信号胶体金免疫层析试纸条及其制备方法和应用
本专利技术涉及棉酚的检测领域。更具体地，涉及检测游离棉酚的双信号胶体金免疫层析试纸条及其制备方法和应用。
技术介绍
棉籽饼粕是一种营养丰富的蛋白质原料，一直作为蛋白质饲料用于畜牧养殖业中，可在一定程度上代替豆粕等常规蛋白质原料，弥补蛋白质饲料资源法的不足。但是有毒物质棉酚的存在限制了棉籽饼粕的大量使用。棉酚(gossypol)，又称棉花毒素，是一种黄色多羟基双萘醛化合物，主要分布在锦葵科植物树棉、草棉或陆地棉根皮、成熟种子、茎秆中色素腺体中。棉酚可分为左旋棉酚[(-)-棉酚]和右旋棉酚[(+)-棉酚]2种光学异构体。(+)-棉酚几乎无活性，而(-)-棉酚表现出更强的药用活性，如抗生育、抗肿瘤、抗病毒和抗菌作用。当棉酚被畜禽大量摄入时，其中含有的游离棉酚会使畜禽出现食欲减退，呼吸困难，受精率下降等症状，并通过食物链的作用，蓄积在肉、蛋、奶等食物中，间接威胁人类健康。关于测定游离棉酚的方法，目前有纸层析法、薄层层析法、比色法、气相色谱法和近红外方法等。这些方法可进行定量分析本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测游离棉酚的双信号胶体金免疫层析试纸条，包括PVC背衬及设置在PVC背衬上的依次搭接的样品垫、结合垫、反应垫和吸水垫；其特征在于，所述结合垫上含有胶体金标记的可识别游离棉酚的单克隆抗体，所述反应垫上从靠近所述结合垫端到靠近所述吸水垫端依次设置相互平行的检测线T

【技术特征摘要】
1.一种检测游离棉酚的双信号胶体金免疫层析试纸条，包括PVC背衬及设置在PVC背衬上的依次搭接的样品垫、结合垫、反应垫和吸水垫；其特征在于，所述结合垫上含有胶体金标记的可识别游离棉酚的单克隆抗体，所述反应垫上从靠近所述结合垫端到靠近所述吸水垫端依次设置相互平行的检测线T1线、检测线T2线和控制线C线，所述检测线T1线和检测线T2线分别包被不同浓度的游离棉酚半抗原与载体蛋白偶联物，所述控制线C线包被羊抗鼠IgG。


2.根据权利要求1所述的双信号胶体金免疫层析试纸条，其特征在于，所述可识别游离棉酚的单克隆抗体是由保藏编号为CGMCCNo.19682的单克隆细胞株AAB1分泌产生。


3.根据权利要求1所述的双信号胶体金免疫层析试纸条，其特征在于，所述游离棉酚半抗原为半游离棉酚，其分子结构式如式I所示：





4.根据权利要求1所述的双信号胶体金免疫层析试纸条，其特征在于，所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清白蛋白或钥孔血蓝蛋白，优选的为牛血清白蛋白。


5.根据权利要求1所述的双信号胶体金免疫层析试纸条，其特征在于，所述检测线T1线包被的游离棉酚半抗原与载体蛋白偶联物的浓度为0.75mg/mL，游离棉酚半抗原与载体蛋白偶联物的包被量为0.5-1μL/cm；所述检测线T2线包被的游离棉酚半抗原与载体蛋白偶联物的浓度为0.25mg/mL，游离棉酚半抗原与载体蛋白偶联物的包被量为0.5-1μL/cm。


6.根据权利要求1所述的双信号胶体金免疫层析试纸条，其特征在于，所述控制线C线包被的羊抗鼠IgG的浓度为0.15mg/mL，羊抗鼠IgG的包被量为0.5-1μL/cm。


7.检测游离棉酚的双信号胶体金免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
结合垫的制备：将胶体金标记的可识别游离棉酚溶液涂抹到玻璃纤维上，干燥，得到结合垫；
反应垫的制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：李爱科，王丽，王永伟，王薇薇，施晶晶，何贝贝，刘宽博，宋丹，成俊林，
申请(专利权)人：国家粮食和物资储备局科学研究院，
类型：发明
国别省市：北京;11