一种用于测定游离甲状腺素的试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种用于测定游离甲状腺素的试剂盒，包括羊单抗包被的磁珠、分析缓冲液和酶工作液，所述羊单抗包被的磁珠上包被有生物素抗体。本发明专利技术通过在羊单抗包被的磁珠上包被有生物素抗体，即本发明专利技术的；羊单抗包被的磁珠上包被有其它抗体，能够提高试剂盒稳定性，进而提高了试剂盒在检测临床样本时的抗干扰能力。

【技术实现步骤摘要】
一种用于测定游离甲状腺素的试剂盒
本专利技术涉及游离甲状腺素检测
，具体涉及一种用于测定游离甲状腺素的试剂盒。
技术介绍
甲状腺素(T4)是由甲状腺滤泡上皮细胞合成分泌的主要甲状腺素，一般作为前体物质或激素原。分泌入血的T4大部分与各类蛋白结合，只有0.03％具有生物活性以游离状态(FT4)存在于血液循环中。游离甲状腺素的测定不受血清结合蛋白(主要是TBG)的影响，是甲状腺功能体外试验的灵敏指标。即使在生理及病理情况下引起血清甲状腺素结合球蛋白浓度和结合力改变时，也能较准确地反映甲状腺的功能。因此，血液中FT4的测定更能如实评价甲状腺合成分泌甲状腺激素的状况，可用于反映机体的甲状腺功能，作为甲状腺功能亢进、减退、甲状腺肿、重症感染发热等疾病的辅助诊断。现有游离甲状腺素测定试剂盒(化学发光法)在检测临床样本时，易受到样本中干扰物质的影响，导致假阳性，影响临床的诊断和治疗。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种用于测定游离甲状腺素的试剂盒，解决游离甲状腺素测定试剂盒抗干扰能力的问题。本专利技术通过下述技术方案实现：一种用于测定游离甲状腺素的试剂盒，包括羊单抗包被的磁珠、分析缓冲液和酶工作液，所述羊单抗包被的磁珠上包被有生物素抗体。本专利技术通过在羊单抗包被的磁珠上包被有生物素抗体，即本专利技术的；羊单抗包被的磁珠上包被有其它抗体，能够提高试剂盒稳定性，进而提高了试剂盒在检测临床样本时的抗干扰能力。进一步地，生物素抗体至少包括鼠IgG，兔IgG和牛IgG中的一种。进一步地，生物素抗体由IgG，兔IgG和牛IgG组成。进一步地，羊单抗包被的磁珠上羊单抗的包被量为0.2-1.0μg/mg。本专利技术与现有技术相比，降低了羊单抗包被的磁珠上羊单抗的包被量。现有技术上羊单抗包被的磁珠上羊单抗的包被量大于1.0μg/mg。本专利技术采用降低羊单抗磁珠上羊单抗的包被量，进一步提高了试剂盒的抗干扰能力，尤其是当羊单抗磁珠上羊单抗的包被量等于0.2μg/mg时，试剂盒灵敏度和特异性均有很大提高。进一步地，羊单抗包被的磁珠上羊单抗的包被量为0.2μg/mg。进一步地，羊单抗包被的磁珠上生物素抗体的包被量为0.5μg/mg。进一步地，酶工作液为ALP标记的T4衍生物和含BSA的缓冲溶液的混合溶液。进一步地，含BSA的缓冲溶液和ALP标记的T4衍生物的比例小于等于2000:1。本专利技术与现有技术相比，降低了酶工作液的稀释比例，灵敏度和特异性均得到有效提高，尤其是在1/1000的稀释比例条件下，灵敏度较高且发光值适当，试剂盒效价更高。现有技术酶工作液的稀释比例为1/3000。进一步地，含BSA的缓冲溶液和ALP标记的T4衍生物的比例小于等于1000:1。进一步地，生物素抗体由IgG，兔IgG和牛IgG组成，所述羊单抗包被的磁珠上生物素抗体的包被量为0.5μg/mg，所述羊单抗包被的磁珠的包被量为0.2μg/mg，所述酶工作液为ALP标记的T4衍生物和含BSA的缓冲溶液的混合溶液，含BSA的缓冲溶液和ALP标记的T4衍生物的比例小于等于1000:1。进一步地，所述羊单抗包被的磁珠制备方法为：将羊单抗稀释到设定的浓度，对稀释后的羊单抗进行生物素标记获得生物素抗体，将生物素抗体包被在裸磁珠上获得羊单抗包被的磁珠。在对羊单抗标记之前，将羊单抗稀释到特定的浓度，可以提高试剂盒的稳定性，不同批次的试剂盒功能相近。优选地，所述设定的浓度为固定值，设定的浓度在0.1mg/mL～0.6mg/mL内取值。羊单抗稀释到特定的浓度在该范围内时，试剂盒的效价较高，而且稳定性好。本专利技术与现有技术相比，具有如下的优点和有益效果：1、本专利技术通过在羊单抗包被的磁珠上包被有生物素抗体，即本专利技术的；羊单抗包被的磁珠上包被有其它抗体，能够提高试剂盒稳定性，进而提高了试剂盒在检测临床样本时的抗干扰能力。2、本专利技术采用降低羊单抗磁珠上羊单抗的包被量，进一步提高了试剂盒的抗干扰能力，尤其是当羊单抗磁珠上羊单抗的包被量等于0.2μg/mg时，试剂盒灵敏度和特异性均有很大提高。3、本专利技术与现有技术相比，降低了酶工作液的稀释比例，灵敏度和特异性均得到有效提高，尤其是在1/1000的稀释比例条件下，灵敏度较高且发光值适当，试剂盒效价更高。具体实施方式为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例，对本专利技术作进一步的详细说明，本专利技术的示意性实施方式及其说明仅用于解释本专利技术，并不作为对本专利技术的限定。实施例1：一种用于测定游离甲状腺素的试剂盒，包括羊单抗包被的磁珠、分析缓冲液和酶工作液，所述羊单抗包被的磁珠上包被有生物素抗体，所述生物素抗体为鼠IgG，所述羊单抗包被的磁珠上羊单抗的包被量为0.2μg/mg，所述生物素抗体的包被量均0.5μg/mg。在本实施例中，所述羊单抗包被的磁珠的制备方法如下：A、取0.25mg羊单抗，用0.02MPBS(PH7.4)缓冲液5L进行2～8℃透析过夜；B、取出透析好的羊单抗于适当容器，准确量取体积并记录，将羊单抗稀释为0.5mg/mL备用。C、称取1.0mg的BNHS，用217μLDMSO充分溶解，配制成10mmol/L的BNHS溶液。D、将配制好的BNHS与羊单抗的比例为20：1的量加入到透析后的羊单抗中，充分混匀后室温反应30min。即1.0mg的抗体加入10mmol/LBNHS13.3μL。0.2mg加入配置好的10mmol/LBNHS3.3μL。E、取1mol/LTris缓冲液进行终止反应，加入1mol/LTris缓冲液于反应液中。加入Tris的体液为上述反应液终体积的百分之一，充分混匀，室温反应10Min。F、取出终止后的反应液装入透析袋，用0.02MPBS(PH7.4)缓冲液5L进行2～8℃透析过夜。G、将透析好的生物素抗体取出，并准确量取体积，加入等体积的丙三醇，贴签，并记录浓度，于-20℃保存，备用。H、取0.25mg鼠IgG，用0.02MPBS(PH7.4)缓冲液5L进行2～8℃透析过夜；I、取出透析好的鼠IgG于适当容器，准确量取体积并记录，将鼠IgG稀释为0.5mg/mL备用。J、称取1.0mg的BNHS，用217μLDMSO充分溶解，配制成10mmol/L的BNHS溶液。K、将配制好的BNHS与鼠IgG的比例为20：1的量加入到透析后的鼠IgG中，充分混匀后室温反应30min。即1.0mg的抗体加入10mmol/LBNHS13.3μL。0.2mg加入配置好的10mmol/LBNHS3.3μL。L、取1mol/LTris缓冲液进行终止反应，加入1mol/LTris缓冲液于反应液中。加入Tris的体液为上述反应液终体积的百分之一，充分混匀，室温反应10Min。M、取出终止后的反应液装入透析袋，用0.02MP本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于测定游离甲状腺素的试剂盒，包括羊单抗包被的磁珠、分析缓冲液和酶工作液，其特征在于，所述羊单抗包被的磁珠上包被有生物素抗体。/n

【技术特征摘要】
1.一种用于测定游离甲状腺素的试剂盒，包括羊单抗包被的磁珠、分析缓冲液和酶工作液，其特征在于，所述羊单抗包被的磁珠上包被有生物素抗体。


2.根据权利要求1所述的一种用于测定游离甲状腺素的试剂盒，其特征在于，所述生物素抗体至少包括鼠IgG，兔IgG和牛IgG中的一种。


3.根据权利要求2所述的一种用于测定游离甲状腺素的试剂盒，其特征在于，所述生物素抗体由IgG，兔IgG和牛IgG组成。


4.根据权利要求1所述的一种用于测定游离甲状腺素的试剂盒，其特征在于，所述羊单抗包被的磁珠上羊单抗的包被量为0.2-1.0μg/mg。


5.根据权利要求4所述的一种用于测定游离甲状腺素的试剂盒，其特征在于，所述羊单抗包被的磁珠上羊单抗的包被量为0.2μg/mg。


6.根据权利要求1所述的一种用于测定游离甲状腺素的试剂盒，其特征在于，所述羊单抗包被的磁珠上生物素抗体的包被量为0.5μg/mg。


7.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：李佳璐，李玲，
申请(专利权)人：四川沃文特生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51