一种动物蛋白的多级酶解方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种动物蛋白的多级酶解方法及应用，属于蛋白酶解技术领域。本发明专利技术所述动物蛋白的多级酶解方法包括以下步骤：将动物源原料进行预处理；将浆料和水混合水解；对初级水解浆料依次进行一级生化降解、二级生化降解、三级生化降解、四级生化降解、五级生化降解，进行过滤，得到多级酶解后的蛋白。本发明专利技术相对于现有动物蛋白酶解方法，具有酶解效果稳定，分子量统一性高，目标分子收成率高，相对成本低等优势。

【技术实现步骤摘要】
一种动物蛋白的多级酶解方法及应用
本专利技术涉及蛋白酶解
，具体涉及一种动物蛋白的多级酶解方法及应用。
技术介绍
随着生物技术的发展和广泛应用，从天然动植物体提取特定天然物质的技术成为获取天然营养原料的重要手段，植物提取物技术多采用亚临界、超临界、酒精或乙醚萃取的方案，可以高效的分离特定特征分子。而动物提取领域主要以酶解技术和发酵技术为主要手段，一般的酶解技术关注于活性和平均分析量，而不考虑分子量分布。以胶原蛋白生产为例，由于常规大规模生产难以达到均匀稳定的分子量分布，从而限制了小分子产品的纯化和提取，因此限制了小分子蛋白市场的发展，很多研究由于无法得到大量的准确分子量的产品而无法实现工业化转化和技术研发。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种动物蛋白的多级酶解方法及应用。本专利技术相对于现有动物蛋白酶解方法，具有酶解效果稳定，分子量统一性高，目标分子收成率高，相对成本低等优势。本专利技术提供了一种动物蛋白的多级酶解方法，包括以下步骤：1)将动物源原料依次进行物理撕碎、破碎和胶体磨破壁得到浆料；2)将步骤1)所述浆料和水混合，搅拌，加热至75℃，恒温水解3h，得到初级水解浆料；3)对步骤2)所述初级水解浆料进行温度调节，使温度调节至50～54℃，调节pH值为8.0～9.0，加入碱性蛋白酶，搅拌，恒温反应20～50min，得到一级生化降解浆料；所述碱性蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.02～0.04％；4)待步骤3)所述一级生化降解浆料的pH值为7.5，在温度为50～53℃下加入碱性蛋白酶，搅拌，恒温反应20～40min，得到二级生化降解浆料；所述碱性蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.02～0.05％；5)待步骤4)所述二级生化降解浆料的pH值为6.8～7.2，在温度为50～53℃下加入木瓜蛋白酶，搅拌，恒温反应30～40min，得到三级生化降解浆料；所述木瓜蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.03～0.06％；6)待步骤5)所述三级生化降解浆料的pH值为6.4～6.8，在温度为50℃下加入木瓜蛋白酶，搅拌，恒温反应20～30min，得到四级生化降解浆料；所述木瓜蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.03～0.04％；7)待步骤6)所述四级生化降解浆料的pH值为5.5～6.0，在温度为45～50℃下，加入酸性蛋白酶，搅拌，恒温反应30～50min，得到五级生化降解浆料；所述酸性蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.05～0.08％；8)待步骤7)所述五级生化降解浆料的pH为4.0～7.0，过滤，得到多级酶解后的蛋白。优选的是，所述动物源原料包括农业渔业加工剩下的动物渣料。优选的是，所述农业渔业加工剩下的动物渣料包括屠宰厂下水渣料、渔业码头捕捞的小鱼小虾和碎鱼杂鱼；所述屠宰场下水渣料包括杀鸡后的鸡肠和/或水产厂杀鱼剩下的鱼肠鱼渣。优选的是，步骤2)所述浆料和水混合的质量比为1:1。优选的是，步骤3)所述温度调节的方法包括将初级水解浆料和冷水混合。优选的是，步骤8)所述过滤包括袋滤或半框压滤，通过滤网或滤布过滤除渣料。优选的是，步骤8)所述过滤的次数为2次，第一次过100目，第二次过200目。优选的是，所述碱性蛋白酶的酶活为20万U/g。优选的是，所述木瓜蛋白酶的酶活为20万U/g。优选的是，所述酸性蛋白酶的酶活为10万U/g。本专利技术提供了一种动物蛋白的多级酶解方法。本专利技术采用分步酶解，通过分散系的控制，提高对酶解进程的控制，从而改变了酶解工艺的理解，从根本上改变了传统酶解工艺的思路，是一种全新的尝试和探索。本专利技术更注重分子量分布，通过更准确的控制酶解进程和强度，从而提高酶解分子量的统一性，提高目标分子段收成率，且本专利技术精确地采用分步分级式酶解工艺可以更好的在工业上实现生产。具体的，本专利技术在传统技术基础上，采用3酶，多次多级控制，采用简单设备实现生物酶解的精准控制，提高了酶的活性效果，通过降低酶解反应的副反应率，从而提高酶解效果的稳定性；通过多级酶解，使得蛋白质分子酶解切点同步率高，目标分子的收成率提高20％左右；同时由于采用了分级分步酶解，使用的酶量下降，从而降低了生产成本。因此，本专利技术多级酶解体系，可以有效生产指定特征(特定范围分子量)的蛋白肽，具有广泛的应用空间，如农业饲料添加、有机肥料、营养提取等领域。附图说明图1为本专利技术提供的最佳pH值控制曲线图；图2为本专利技术提供的最佳温度控制曲线图；图3为本专利技术提供的最佳酶用量控制曲线图。具体实施方式本专利技术提供了一种动物蛋白的多级酶解方法，包括以下步骤：1)将动物源原料依次进行物理撕碎、破碎和胶体磨破壁得到浆料；2)将步骤1)所述浆料和水混合，搅拌，加热至75℃，恒温水解3h，得到初级水解浆料；3)对步骤2)所述初级水解浆料进行温度调节，使温度调节至50～54℃，调节pH值为8.0～9.0，加入碱性蛋白酶，搅拌，恒温反应20～50min，得到一级生化降解浆料；所述碱性蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.02～0.04％；4)待步骤3)所述一级生化降解浆料的pH值为7.5，在温度为50～53℃下加入碱性蛋白酶，搅拌，恒温反应20～40min，得到二级生化降解浆料；所述碱性蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.02～0.05％；5)待步骤4)所述二级生化降解浆料的pH值为6.8～7.2，在温度为50～53℃下加入木瓜蛋白酶，搅拌，恒温反应30～40min，得到三级生化降解浆料；所述木瓜蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.03～0.06％；6)待步骤5)所述三级生化降解浆料的pH值为6.4～6.8，在温度为50℃下加入木瓜蛋白酶，搅拌，恒温反应20～30min，得到四级生化降解浆料；所述木瓜蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.03～0.04％；7)待步骤6)所述四级生化降解浆料的pH值为5.5～6.0，在温度为45～50℃下，加入酸性蛋白酶，搅拌，恒温反应30～50min，得到五级生化降解浆料；所述酸性蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.05～0.08％；8)待步骤7)所述五级生化降解浆料的pH为4.0～7.0，过滤，得到多级酶解后的蛋白。本专利技术将动物源原料依次进行物理撕碎、破碎和胶体磨破壁得到浆料。在本专利技术中，所述动物源原料优选包括农业渔业加工剩下的动物渣料。在本专利技术中，所述农业渔业加工剩下的动物渣料优选包括屠宰厂下水渣料、渔业码头捕捞的小鱼小虾和碎鱼杂鱼；所述屠宰场下水渣料优选包括杀鸡后的鸡肠和/或水产厂杀鱼剩下的鱼肠鱼渣。本专利技术对所述物理撕碎、破碎和胶体磨破碎的方法没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的动物源原料物理撕碎、破碎和胶体磨破碎的常规操作方法即可。经破碎的原料水解更充分，可以缩短水解时间和调节误差。得到浆料后，本专利技术将所述浆料和水混合，搅拌，加热至75℃，恒温本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种动物蛋白的多级酶解方法，包括以下步骤：/n1)将动物源原料依次进行物理撕碎、破碎和胶体磨破壁得到浆料；/n2)将步骤1)所述浆料和水混合，搅拌，加热至75℃，恒温水解3h，得到初级水解浆料；/n3)对步骤2)所述初级水解浆料进行温度调节，使温度调节至50～54℃，调节pH值为8.0～9.0，加入碱性蛋白酶，搅拌，恒温反应20～50min，得到一级生化降解浆料；所述碱性蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.02～0.04％；/n4)待步骤3)所述一级生化降解浆料的pH值为7.5，在温度为50～53℃下加入碱性蛋白酶，搅拌，恒温反应20～40min，得到二级生化降解浆料；所述碱性蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.02～0.05％；/n5)待步骤4)所述二级生化降解浆料的pH值为6.8～7.2，在温度为50～53℃下加入木瓜蛋白酶，搅拌，恒温反应30～40min，得到三级生化降解浆料；所述木瓜蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.03～0.06％；/n6)待步骤5)所述三级生化降解浆料的pH值为6.4～6.8，在温度为50℃下加入木瓜蛋白酶，搅拌，恒温反应20～30min，得到四级生化降解浆料；所述木瓜蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.03～0.04％；/n7)待步骤6)所述四级生化降解浆料的pH值为5.5～6.0，在温度为45～50℃下，加入酸性蛋白酶，搅拌，恒温反应30～50min，得到五级生化降解浆料；所述酸性蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.05～0.08％；/n8)待步骤7)所述五级生化降解浆料的pH为4.0～7.0，过滤，得到多级酶解后的蛋白。/n...

【技术特征摘要】
1.一种动物蛋白的多级酶解方法，包括以下步骤：
1)将动物源原料依次进行物理撕碎、破碎和胶体磨破壁得到浆料；
2)将步骤1)所述浆料和水混合，搅拌，加热至75℃，恒温水解3h，得到初级水解浆料；
3)对步骤2)所述初级水解浆料进行温度调节，使温度调节至50～54℃，调节pH值为8.0～9.0，加入碱性蛋白酶，搅拌，恒温反应20～50min，得到一级生化降解浆料；所述碱性蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.02～0.04％；
4)待步骤3)所述一级生化降解浆料的pH值为7.5，在温度为50～53℃下加入碱性蛋白酶，搅拌，恒温反应20～40min，得到二级生化降解浆料；所述碱性蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.02～0.05％；
5)待步骤4)所述二级生化降解浆料的pH值为6.8～7.2，在温度为50～53℃下加入木瓜蛋白酶，搅拌，恒温反应30～40min，得到三级生化降解浆料；所述木瓜蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.03～0.06％；
6)待步骤5)所述三级生化降解浆料的pH值为6.4～6.8，在温度为50℃下加入木瓜蛋白酶，搅拌，恒温反应20～30min，得到四级生化降解浆料；所述木瓜蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0.03～0.04％；
7)待步骤6)所述四级生化降解浆料的pH值为5.5～6.0，在温度为45～50℃下，加入酸性蛋白酶，搅拌，恒温反应30～50min，得到五级生化降解浆料；所述酸性蛋白酶的质量为所述动物源原料质量的0....

【专利技术属性】
技术研发人员：王新丽，
申请(专利权)人：王新丽，
类型：发明
国别省市：安徽;34