美洲大蠊多肽溶液的制备方法及美洲大蠊多肽溶液技术

本发明专利技术提供了一种美洲大蠊多肽溶液的制备方法及美洲大蠊多肽溶液，涉及多肽提取技术领域，本发明专利技术提供的美洲大蠊多肽溶液的制备方法，包括将预处理后的美洲大蠊依次经过醇提、酶解、水提和纯化后，得到所述美洲大蠊多肽溶液。该方法操作简单、成本较低，适于工业上推广应用。

【技术实现步骤摘要】
美洲大蠊多肽溶液的制备方法及美洲大蠊多肽溶液
本专利技术涉及多肽提取
，尤其是涉及一种美洲大蠊多肽溶液的制备方法及美洲大蠊多肽溶液。
技术介绍
美洲大蠊，俗称蟑螂，是地球上最古老的昆虫之一，属于节肢动门、昆虫纲、蜚蠊目，是常见的医学昆虫。其因为繁殖快、数量多、难以消灭，特别是携带多种细菌等原因被人们视为害虫，但其顽强的生存能力却引起医学界的关注。在我国古代，美洲大蠊就被视为一种药物，美洲大蠊经晒干后加工成粉末即可得美洲大蠊粉，美洲大蠊粉是中国传统医学药品之一，具有活血散瘀，解毒消疳，利尿消肿的作用。其功效在多部文献中有记载，《神农本草经》：主血瘀，症坚、寒热，破积聚，喉咽痹；《名医别录》：通利血脉；《唐本草》：食之下气；《本草纲目》：主瘀血，症坚，寒热，下气，利血脉；《分类草药性》：治一切饮食诸毒。同蜈蚣捣烂包鱼口，消疮，敷结毒，治喉娥；《陆川本草》：驱风解热，通血脉。治肿疡(外敷)。经研究，美洲大蠊干虫体提取物，含有多元醇类、粘氨酸、粘糖氨酸、多肽以及多种氨基酸等活性物质。目前药学工作者普遍认为，美洲大蠊中蛋白质、氨基酸、肽类、含氮小分子等化学成分是其主要药效成分；且现在医学界发现美洲大蠊提取物在创面、黏膜修复方面具有很好的功效，故而美洲大蠊提取物，特别是氨基酸、肽类等很有研究意义。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的在于提供一种美洲大蠊多肽溶液的制备方法，以至少缓解现有技术中存在的技术问题之一。本专利技术的第二个目的在于提供应用上述的制备方法制备得到的美洲大蠊多肽溶液。本专利技术提供了一种美洲大蠊多肽溶液的制备方法，包括将预处理后的美洲大蠊依次经过醇提、酶解、水提和纯化后，得到所述美洲大蠊多肽溶液。进一步的，所述预处理包括粉碎处理和/或脱脂处理；优选地，所述粉碎处理包括将干燥的美洲大蠊粉碎至＜60目；优选地，所述脱脂处理包括将美洲大蠊置于有机溶剂中进行脱脂；优选地，将美洲大蠊置于有机溶剂中24h以上进行脱脂；优选地，所述有机溶剂的用量为美洲大蠊重量的4-6倍，优选为5倍；优选地，所述有机溶剂包括乙酸乙酯；优选地，所述脱脂次数为2-4次，优选为3次。进一步的，所述醇提包括将预处理后的美国大蠊置于有机溶剂中，在70-80℃的条件下浸提7h以上，固液分离后收集醇提液；优选地，所述浸提的次数为1-3次，优选为2次；优选地，所述浸提的温度为80℃，浸提的时间8h；优选地，所述有机溶剂优选为70％-80％(v/v)的乙醇溶剂，更优选包括80％(v/v)的乙醇溶剂；优选地，所述有机溶剂的用量为美洲大蠊重量的4-6倍，优选为5倍。进一步的，所述酶解包括向醇提过的虫渣中加入胰蛋白酶溶液进行浸提，将酶灭活后固液分离，收集酶解液；优选地，浸提的温度为35-45℃，浸提的时间为1.5-2.5h；优选地，浸提的温度为40℃，浸提的时间为2h；优选地，所述胰蛋白酶溶液的用量为虫渣质量的4-6倍，优选为5倍；优选地，所述胰蛋白酶溶液中胰蛋白酶的含量为0.2％-0.4％(w/v)，优选为0.3％(w/v)；优选地，所述酶灭活的温度为75-85℃，时间为0.5-1.5h；优选地，所述酶灭活的温度为80℃，时间为1h。进一步的，所述水提包括向酶解后的虫渣中加入水，浸提后固液分离，得到水提液；优选地，所述水提的温度为75-85℃，时间为2.5-3.5h；优选地，所述水提的温度为80℃，时间为3h；优选地，所述水的用量为虫渣质量的4-6倍，优选为5倍。进一步的，在纯化前还包括将酶解得到的酶解液和水提得到的水提液混合并加入乙醇溶液进行醇沉，过滤后得到醇沉滤液；优选地，所述乙醇溶液加入后的终浓度为75％-85％(v/v)，优选为80％(v/v)；优选地，加入乙醇溶液后静置15h以上，然后过滤后得到醇沉滤液。进一步的，在纯化前还包括浓缩的步骤；优选地，将所述醇提液和醇沉滤液合并后减压浓缩掉无醇味溶液体积的1/2-2/3得到浓缩液，离心后得到粗提液；优选地，将所述浓缩液静置12h以上再进行离心处理；优选地，所述浓缩液静置温度为0-10℃；优选地，所述减压浓缩的温度为40-60℃，优选为50℃；优选地，所述离心的转速为5000-8000r/min，时间为30-60min。进一步的，使用树脂进行纯化；优选地，将所述粗提液通过大孔树脂，再经过水和有机溶剂洗脱后得到纯化液；优选地，所述粗提液与大孔树脂的体积比为1:1-3，优选为1:2；优选地，所述有机溶剂优选为乙醇溶剂，更优选包括10％-30％(v/v)的乙醇溶剂，进一步优选包括20％(v/v)的乙醇溶剂；优选地，上样速度为0.5-1.0BV/h；优选地，使用纯化水水洗1.5-2.5BV后使用20％(v/v)的乙醇溶剂洗脱3.0-4.0BV，收集流出液；优选地，将流出液进行减压浓缩，至体积为上样体积时停止浓缩，得到所述纯化液；优选地，所述减压浓缩的温度为40-60℃，优选为50℃；优选地，所述树脂包括HB16、HB60或LX-D4。进一步的，还包括对得到的美洲大蠊多肽溶液进行贮存的步骤；优选地，通过向美洲大蠊多肽溶液加入防腐剂进行贮存；优选地，所述防腐剂包括苯氧乙醇、聚六亚甲基双胍、山梨酸钾、尼泊金甲酯、尼泊金乙酯或尼泊金丙酯中的一种或多种；优选地，所述贮存的温度为20-25℃。另外，本专利技术还提供了应用上述的制备方法制备得到的美洲大蠊多肽溶液。与现有技术相比，本专利技术具备如下有益效果：本专利技术提供的美洲大蠊多肽溶液的制备方法，包括将预处理后的美洲大蠊依次经过醇提、酶解、水提和纯化后，得到所述美洲大蠊多肽溶液。其中，利用醇提法对预处理后的美洲大蠊进行提取，能够将其体内原有的大部分多肽提取出来，然后再利用生物酶解法对虫体中的大分子蛋白、多肽进行切割分解，进行进一步的提取，极大的提高了美洲大蠊中多肽的提取效率。并且，通过醇提和酶解的组合，既将美洲大蠊体内原有的抗菌多肽分离出来，又得到了酶解的小分子多肽，可以较大程度的提高其药用价值的可用度。最后经纯化处理，使得制备得到的美洲大蠊多肽溶液具有更高的纯度。该方法操作简单、成本较低，适于工业上推广应用。本专利技术提供的美洲大蠊多肽溶液，应用本专利技术提供的制备方法制备得到，其有效成分为多肽。该美洲大蠊多肽溶液中含有美洲大蠊体内原有抗菌肽，同时又含有酶解的小分子肽，整体易于吸收利用。附图说明为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种美洲大蠊多肽溶液的制备方法，其特征在于，包括将预处理后的美洲大蠊依次经过醇提、酶解、水提和纯化后，得到所述美洲大蠊多肽溶液。/n

【技术特征摘要】
1.一种美洲大蠊多肽溶液的制备方法，其特征在于，包括将预处理后的美洲大蠊依次经过醇提、酶解、水提和纯化后，得到所述美洲大蠊多肽溶液。


2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述预处理包括粉碎处理和/或脱脂处理；
优选地，所述粉碎处理包括将干燥的美洲大蠊粉碎至＜60目；
优选地，所述脱脂处理包括将美洲大蠊置于有机溶剂中进行脱脂；
优选地，将美洲大蠊置于有机溶剂中24-30h进行脱脂；
优选地，所述有机溶剂的用量为美洲大蠊重量的4-6倍，优选为5倍；
优选地，所述有机溶剂包括乙酸乙酯；
优选地，所述脱脂次数为2-4次，优选为3次。


3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述醇提包括将预处理后的美国大蠊置于有机溶剂中，在70-80℃的条件下浸提7h以上，固液分离后收集醇提液；
优选地，所述浸提的次数为1-3次，优选为2次；
优选地，所述浸提的温度为80℃，浸提的时间为7-8h，优选为8h；
优选地，所述有机溶剂为乙醇溶液，优选包括70％-80％(v/v)的乙醇溶剂，更优选包括80％(v/v)的乙醇溶剂；
优选地，所述有机溶剂的用量为美洲大蠊重量的4-6倍，优选为5倍。


4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述酶解包括向醇提过的虫渣中加入胰蛋白酶溶液进行浸提，将酶灭活后固液分离，收集酶解液；
优选地，浸提的温度为35-45℃，浸提的时间为1.5-2.5h；
优选地，浸提的温度为40℃，浸提的时间为2h；
优选地，所述胰蛋白酶溶液的用量为虫渣质量的4-6倍，优选为5倍；
优选地，所述胰蛋白酶溶液中胰蛋白酶的含量为0.2％-0.4％(w/v)，优选为0.3％(w/v)；
优选地，所述酶灭活的温度为75-85℃，时间为0.5-1.5h；
优选地，所述酶灭活的温度为80℃，时间为1h。


5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述水提包括向酶解后的虫渣中加入水，浸提后固液分离，得到水提液；
优选地，所述水提的温度为75-85℃，时间为2.5-3.5h；
优选地，所述水提的温度为80℃，时间为3h；
优选地，...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴晓军，杨晓磊，
申请(专利权)人：西安惠普生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：陕西;61