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一种对糖基化蛋白进行高分子功能化修饰的方法技术

技术编号:26160971 阅读:37 留言:0更新日期:2020-10-31 12:43
本发明专利技术公开了一种对糖基化蛋白进行高分子功能化修饰的方法,其具体是在蛋白质糖基化位点上接上聚合物高分子,以利用不同种类高分子的物化特性,使蛋白质具有相应的功能与理化性质(如温敏性),且该方法对蛋白质的二级结构影响较低,可有效保持蛋白质原有的结构和较高的活性。

【技术实现步骤摘要】
一种对糖基化蛋白进行高分子功能化修饰的方法
本专利技术属于生物医药领域,具体涉及一种对糖基化蛋白进行高分子功能化修饰的方法。
技术介绍
蛋白药物相比其他药物具有多种优势,如特异性强、相容性好。尽管如此,蛋白质或者多肽类药物仍然存在些许局限性,如细胞摄取低、生物利用率低、容易受到环境干扰、易失活等,这些局限性正阻碍着蛋白质药物的开发与利用。在过去的研究中,通过氨基位点对蛋白质进行修饰存在接枝位置与位点不可控的问题,造成蛋白活性受到影响。为解决这个问题,需要对蛋白质进行位点选择性地修饰,也即利用蛋白质的某些特殊位点选择性地与高分子进行共价连接。蛋白质-高分子结合体是改善蛋白质性能和拓宽蛋白质应用范围的重要技术之一,修饰后的蛋白质被赋予新的理化性质的同时,也增强了蛋白质自身的稳定性。糖基化位点是进行蛋白质修饰的一个理想位点,具有接枝效率高、可控性好等优势。环境响应性高分子是蛋白质-高分子的重要组成部分。在蛋白质接枝高分子后,通过环境变化刺激高分子,改变表面电荷或亲水疏水的性质,可实现对蛋白质功能化控制。同时,其所使用的单体种类可灵活选本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种对糖基化蛋白质进行高分子功能化修饰的方法,其特征在于:包括以下步骤:/n1)将糖基化蛋白质加入磷酸盐缓冲液中,混合均匀,配成浓度为1mg/mL的蛋白溶液;然后在其中加入高碘酸钠,将混合液于冰上避光进行氧化反应;反应后将产物于磷酸盐缓冲液中避光透析12 h,得到蛋白质氧化物;/n2)将透析后的蛋白质氧化物取出,加入引发剂的磷酸盐缓冲液,于37 ℃下进行肟化反应,反应4h后将反应液于磷酸盐缓冲液中进行透析,透析液用孔径为0.45 μm的滤膜过滤,得到蛋白质-引发剂结合体;/n3)将所得蛋白质-引发剂结合体移入圆底烧瓶A中,连接氮气纯化装置除氧25 min;将CuBr、甲醇、单体、配体加入圆...

【技术特征摘要】
1.一种对糖基化蛋白质进行高分子功能化修饰的方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)将糖基化蛋白质加入磷酸盐缓冲液中,混合均匀,配成浓度为1mg/mL的蛋白溶液;然后在其中加入高碘酸钠,将混合液于冰上避光进行氧化反应;反应后将产物于磷酸盐缓冲液中避光透析12h,得到蛋白质氧化物;
2)将透析后的蛋白质氧化物取出,加入引发剂的磷酸盐缓冲液,于37℃下进行肟化反应,反应4h后将反应液于磷酸盐缓冲液中进行透析,透析液用孔径为0.45μm的滤膜过滤,得到蛋白质-引发剂结合体;
3)将所得蛋白质-引发剂结合体移入圆底烧瓶A中,连接氮气纯化装置除氧25min;将CuBr、甲醇、单体、配体加入圆底烧瓶B中,连接氮气纯化装置除氧25min,再加入抗坏血酸,除氧20min;用氮气将圆底烧瓶B中的反应物压入圆底烧瓶A中,并保持氮气除氧30min后,将混合物于磷酸盐缓冲液中透析过夜,得到高分子功能化修饰的蛋白质聚合物。


2.根据权利要求1所述的对糖基化蛋白质进行高分子功能化修饰的方法,其特征在于:步骤1)所述糖基化蛋白质为...

【专利技术属性】
技术研发人员:吴元子毕雪然马山云熊文丽
申请(专利权)人:福州大学
类型:发明
国别省市:福建;35

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