【技术实现步骤摘要】
一种缩宫素及其8种差向异构体的分离方法及应用
本专利技术涉及药物检测领域，更具体地，涉及一种缩宫素及其8种差向异构体的分离方法及应用。
技术介绍
缩宫素又名催产素，是由8种氨基酸组成的九肽药物，分子式：C43H66N12O12S2，分子量1007.2，结构式：Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2(1,6二硫键)。它能够刺激子宫收缩和乳汁排出，临床上主要用于诱导促进分娩、缩短第三产程、控制产后出血等。缩宫素肽链中有8个含手性碳原子的氨基酸残基，构型均为L型，其中只有一个非预期构型(D型)的氨基酸残基所形成的肽链叫做差向异构体，缩宫素可能形成8种差向异构体，其结构式如表1所示。缩宫素的合成过程中有可能引入这8种差向异构体，例如差向异构体可能形成于原料氨基酸中的光学异构体，也可能形成于肽链中氨基酸残基脱酰胺过程中外消旋化(J.AM.CHEM.SOC.2003,125,11486-11487)。表1缩宫素中潜在的8种差向异构体杂质编号杂质名称结构式杂质1[D-Cys1]缩宫素D-Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2(1,6二硫键)杂质2[D-Tyr2]缩宫素Cys-D-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2(1,6二硫键)杂质3[D-Ile3]缩宫素
【技术保护点】
1.一种缩宫素及其八种差向异构体的分离方法，其特征在于，其包括下述步骤：利用高效液相色谱检测供试品溶液即可；/n其中，所述供试品溶液为含有缩宫素的水溶液；所述高效液相色谱检测中，色谱柱柱温为32～42℃；所述高效液相色谱检测中，采用梯度洗脱方式进行洗脱，流动相A为水相和乙腈的混合液，所述水相为10～150mmol/L磷酸二氢钠溶液，pH值为5.2～5.4；所述水相与所述乙腈的体积比为(95:5)～(85:15)；流动相B为乙腈；/n所述流动相A和所述流动相B的梯度洗脱条件如下所述：/n
【技术特征摘要】
1.一种缩宫素及其八种差向异构体的分离方法，其特征在于，其包括下述步骤：利用高效液相色谱检测供试品溶液即可；
其中，所述供试品溶液为含有缩宫素的水溶液；所述高效液相色谱检测中，色谱柱柱温为32～42℃；所述高效液相色谱检测中，采用梯度洗脱方式进行洗脱，流动相A为水相和乙腈的混合液，所述水相为10～150mmol/L磷酸二氢钠溶液，pH值为5.2～5.4；所述水相与所述乙腈的体积比为(95:5)～(85:15)；流动相B为乙腈；
所述流动相A和所述流动相B的梯度洗脱条件如下所述：
时间/min
流动相A％
流动相B％
0
90-98
2-10
7
85-92
8-15
10
80-90
10-20
12
70-80
20-30
13
70-80
20-30
13.1
90-98
2-10
16
90-98
2-10
上述百分比为流动相A或流动相B的体积与“流动相A或流动相B”总体积之比；
所述八种差向异构体包括杂质1、杂质2、杂质3、杂质4、杂质5、杂质6、杂质7和杂质8；
其中，所述杂质1为[D-Cys1]缩宫素，所述杂质2为[D-Tyr2]缩宫素，所述杂质3为[D-Ile3]缩宫素，所述杂质4为[D-Gln4]缩宫素，所述杂质5为[D-Asn5]缩宫素，所述杂质6为[D-Cys6]缩宫素，所述杂质7为[D-Pro7]缩宫素，所述杂质8为[D-Leu8]缩宫素。
2.如权利要求1所述的缩宫素及其八种差向异构体的分离方法，其特征在于，所述供试品溶液中，缩宫素的浓度为0.002～0.2mg/mL，优选0.01～0.1mg/mL，例如0.02mg/mL；
和/或，所述供试品溶液中含有的单个杂质的浓度为0.00002～0.2mg/mL，优选0.002～0.1mg/mL，例如0.001mg/mL；
和/或，所述高效液相色谱检测中，色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，优选WatersXbridgeC18色谱柱；所述十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱的规格优选地为150mm×4.6mm，5μm。
3.如权利要求1所述的缩宫素及其八种差向异构体的分离方法，其特征在于，所述流动相A和所述流动相B的梯度洗脱条件如下所述：
4.如权利要求3所述的缩宫素及其八种差向异构体的分离方法，其特征在于，所述梯度洗脱条件如下所示：
时间/min
流动相A％
流动相B％
0
...
【专利技术属性】
技术研发人员：王振平，李妍哲，李娟，丁金国，黄臻辉，
申请(专利权)人：上海上药第一生化药业有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31
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