人葡萄球菌及其培养方法和应用技术

本发明专利技术属于微生物技术领域，尤其涉及一种人葡萄球菌及其培养方法和应用。所述人葡萄球菌保藏于广东省微生物菌种保藏中心，且所述人葡萄球菌的保藏编号为GDMCC No.60608。该人葡萄球菌对于百日咳疾病的治疗具有较高的安全性，同时可改善呼吸道菌群，避免其他肠道疾病的发生，应用于婴幼儿或成人均可，具有较广的应用范围，其为日后百日咳疾病的治疗提供了一种新的选择方式。

【技术实现步骤摘要】
人葡萄球菌及其培养方法和应用
本专利技术属于微生物
，尤其涉及一种人葡萄球菌及其培养方法和应用。
技术介绍
百日咳(Pertussis)民间亦称“鸳鸯咳”、“疫咳”，是由百日咳杆菌所致的急性呼吸道传染病。临床特征为咳嗽逐渐加重，呈典型的阵发性、痉挛性咳嗽、咳嗽终末出现深长的鸡啼样吸气性吼声，病程长达2-3个月，故有百日咳之称。百日咳传染源可为带菌患儿，青年人感染后漏诊率高，症状不明显，为重要传染源。百日咳杆菌主要经飞沫传播，经过潜伏期后(约7-10天)出现症状，对传染病缺乏特异性免疫力的人为易感者，因母体通过胎盘传递的百日咳抗体为非保护性抗体，易被感染，故新生儿尤其不能除外。百日咳一般由百日咳鲍特杆菌(简称百日咳杆菌)感染所引起，为革兰阴性杆菌，可产生一些包括百日咳毒素(光滑型百日咳杆菌的荚膜，毒力强，为主要致病因子)、百日咳丝状血凝素(百日咳杆菌常见的致病黏附因子，黏附于杆菌膜表面)、百日咳黏附素(外膜表面相关蛋白，推测可参与百日咳杆菌在宿主中的成活和繁殖)以及腺苷酸环化酶素(百日咳杆菌的主要致病因素之一，可引起人类急性咳嗽)等在内的致病物质。在二十世纪50、60年代，全球范围内大规模应用以百日咳灭活全菌体与白喉类毒素、破伤风类毒素联合制备成的百白破联合疫苗(diphtheria，tetanusandpertussiscombinedvaccine，DTP)，虽显著地减少了百日咳疾病的发生，但接种全细胞百日咳疫苗(whole-cellpertussisvaccine，wP)曾发生少数严重不良反应甚至致死的案例，导致DTP接种率曾一度显著下降。随后应用免疫原性更强，更安全的无细胞百日咳疫苗(acellularpertussisvaccine，aP)也出现了免疫力不足，记忆免疫应答低，易诱发百日咳病原菌出现适应性变异的问题。尽管百日咳疫苗全球接种率达到85％，有的国家甚至达到99％以上，但近年来流行病学上百日咳开始死灰复燃。有研究指出，2014年全球有2400万百日咳病例和16.07万例5岁以下儿童死亡。更令人震惊的是，在过去20年里，在几个完全实施免疫接种的国家，百日咳的发病率稳步上升。除了发病率的增加，红霉素(EM)耐药性是中国百日咳感染的另一个担忧。2012-2013年5月，西安市87.5％(14/16)；2016-2017年7月，上海57.4％(81/141)；2013年6月至2014年6月，在北京甚至达到了91.4％(91/99)。目前百日咳治疗有：1.一般疗法；按呼吸道隔离，保持空气新鲜，避免一切可诱发痉咳的因素。加强护理以预防并发症，注意营养。婴幼儿时应即刻行人工呼吸，给氧，必要时给予止痉排痰。可用普鲁卡因静脉滴注，以减少窒息或惊厥，需同时注意心率和血压。有低钙、低血糖等时，予以对症治疗。优点：罹患百日咳后，对于痉咳等症状的缓解有一定的帮助。缺点：仅对于疾病症状有所缓解，不能从根本上治愈。2.抗生素治疗；应用于卡他期或痉咳期早期，可降低传染性，减轻症状并缩短病程。首选红霉素，或是罗红霉素，疗程不少于10天，复方新诺明亦可使用。优点：相较一般疗法，对百日咳的治疗具有显著效果(减轻症状，缩短病程)。缺点：发病早期应用效果较好，痉咳期疗效欠佳，有一定副作用。而百日咳的预防方法有：1.全细胞百日咳疫苗(whole-cellpertussisvaccine，wP)；优点：①可显著地抑制百日咳疾病的发生；②制作工序相对简易。缺点：①安全性问题：发生少数严重不良反应甚至致死；②有效抗原量不稳定。2.无细胞百日咳疫苗(acellularpertussisvaccine，aP)；优点：①可显著地抑制百日咳疾病的发生；②免疫原性较wP强；③安全性较wP高，接种后较少出现不良反应。缺点：①aP产生的免疫力与wP相比会迅速衰减；②记忆免疫应答低；③自使用后，百日咳病原菌出现了适应性变异。变异菌株的毒性或传染性更强，均表现为一种疫苗压力下的选择优势。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种人葡萄球菌及其培养方法和应用，旨在解决现有百日咳药物效果不理想、副作用大的技术的问题。为实现上述专利技术目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种人葡萄球菌，所述人葡萄球菌保藏于广东省微生物菌种保藏中心，且所述人葡萄球菌的保藏编号为GDMCCNo.60608。本专利技术提供的人葡萄球菌来源于健康儿童的呼吸道，该菌以无性二分裂方式繁殖，具有较强的繁殖能力，在较短时间内能产生大量菌体。该人葡萄球菌对于百日咳疾病的治疗具有较高的安全性，同时可改善呼吸道菌群，避免其他肠道疾病的发生，应用于婴幼儿或成人均可，具有较大的应用范围，其为日后百日咳疾病的治疗提供了一种新的选择方式。相应地，本专利技术还提供一种人葡萄球菌的培养方法，包括如下步骤：将本专利技术的上述人葡萄球菌接种在肉汤培养基中，进行扩大培养，得到种子液；将所述种子液加入到发酵培养基中，进行发酵培养，得到发酵液。本专利技术提供一种对本专利技术特有的人葡萄球菌的培养方法，该培养方法成本低廉，可工业化生产，最终得到的含有大量该人葡萄球菌的发酵液，对百日咳杆菌均具有一定的抑制作用，可用于对于百日咳疾病的治疗。最后，本专利技术还提供一种本专利技术所述的人葡萄球菌和/或本专利技术所述的人葡萄球菌的培养方法得到的发酵液在制备治疗百日咳的药物中的应用。附图说明图1是本专利技术实施例的人葡萄球菌StaphylococcushominisWHG2019031202显微形态图；图2是本专利技术实施例的人葡萄球菌StaphylococcushominisWHG2019031202在血琼脂平板培养基的菌落形态图；图3是本专利技术实施例的人葡萄球菌StaphylococcushominisWHG2019031202基于16SrDNA序列的系统发育树；其中，图中拉丁名后为相应菌株在Genbank的编号；图4是本专利技术实施例的人葡萄球菌StaphylococcushominisWHG2019031202的平皿抑制实验结果图(百日咳菌悬液浓度：0.9MCF；人葡菌发酵液浓度：8‰)；其中，A为发酵培养基空白对照，B为菌株WHG2019031201发酵液；C为菌株WHG2019031201发酵液的上清液，D为菌株WHG2019031201发酵液上清液的过滤液。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。本专利技术实施例提供一种人葡萄球菌，所述人葡萄球菌保藏于广东省微生物菌种保藏中心，且所述人葡萄球菌的保藏编号为GDMCCNo.60608。本专利技术提供的人葡萄球菌(分类命名Staphylococcushominis)于2019年3月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)，保藏地址：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，广东省微生物研究所；微生物保藏号：GDMCCNo.60本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种人葡萄球菌，其特征在于，所述人葡萄球菌保藏于广东省微生物菌种保藏中心，且所述人葡萄球菌的保藏编号为GDMCC No.60608。/n

【技术特征摘要】
1.一种人葡萄球菌，其特征在于，所述人葡萄球菌保藏于广东省微生物菌种保藏中心，且所述人葡萄球菌的保藏编号为GDMCCNo.60608。


2.如权利要求1所述的人葡萄球菌，其特征在于，所述人葡萄球菌的鉴定引物如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示。


3.一种人葡萄球菌的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
将权利要求1或2所述的人葡萄球菌接种在肉汤培养基中，进行扩大培养，得到种子液；
将所述种子液加入到发酵培养基中，进行发酵培养，得到发酵液。


4.如权利要求3所述的人葡萄球菌的培养方法，其特征在于，所述肉汤培养基包括蛋白胨、牛肉膏和NaCl；和/或，
所述肉汤培养基的pH为7.0-7.2。


5.如权利要求3所述的人葡萄球菌的培养方法，其特征在于，所述扩大培养的温度为35℃；和/或，
所述扩大培养的培养时间为22-26h。


6.如权利要求3所述的人...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴文魁，周潜，李嘉琪，黄琳娣，薛俊免，周乐天，栗东芳，杨振宇，李寅虎，
申请(专利权)人：深圳微健康基因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44