丙戊酸药物浓度检测试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术公开一种检测干血斑中丙戊酸药物浓度的试剂盒，包含：盒体、第一容器、校准品卡和质控品卡。校准品卡为固定有一组丙戊酸干血斑样本作为干血斑校准点的血斑采集卡，干血斑校准点的数量为至少6个；质控品卡为固定有至少一组丙戊酸干血斑样本作为干血斑质控点的血斑采集卡，每一组干血斑质控点的数量为至少3个；第一容器内装有内标提取液，内标采用同位素取代的丙戊酸。本发明专利技术还公开该试剂盒的检测方法。本发明专利技术的试剂盒具有试剂制备简单，样品所需量较少且便于储存运输，前处理快速，分析周期短，成本较低等优点，适合在临床常规检测中推广。

【技术实现步骤摘要】
丙戊酸药物浓度检测试剂盒及其应用
本专利技术涉及医学检验领域，特别是涉及一种对干血斑样本中丙戊酸药物浓度进行检测的试剂盒。
技术介绍
丙戊酸(vaplproicacid，VPA)是目前临床应用的一线广谱抗癫痫药，应用于全身强直一阵挛性发作、失神性发作、肌阵挛性发作、自主性发作等癫痫的治疗，对难治性癫痫尤其是婴儿痉挛症有显著的疗效。大量临床试验结果显示，在所有治疗儿童和成人癫痫的抗癫痫药物中，丙戊酸可能是抗癫痫活性范围最广的。除了治疗部分性和全面性癫痫发作外，研究证实，丙戊酸还能有效控制非常难治的癫痫综合征，例如Lennox-Gastaut综合征和West综合征。因此，在治疗症状难控制的复杂类型癫痫发作患者方面，丙戊酸有十分突出的优势。此外，由于丙戊酸的抗癫痫活性范围广，不同于许多其它类型的抗癫痫药物，因此任何类型的痫样发作和癫痫都在丙戊酸的治疗范围内。丙戊酸(vaplproicacid，VPA)可通过提高脑及脑脊液中γ-氨基丁酸(GABA)的水平，抑制痫样冲动的扩散，从而发挥抗癫痫的作用。丙戊酸有效血药浓度范围为50-100μg/mL，超过100μg/mL时其不良反应增加而疗效无明显增加，低于50μg/mL时达不到治疗效果。临床改善症状的血药浓度常为50-60μg/mL。其治疗指数低，治疗窗较窄，毒副作用强，中毒症状与癫痫发作症状难以判断，因此对服用丙戊酸的癫痫患者进行血药浓度监测，制订个体化给药方案，对提高癫痫发作的控制，减少不良反应，指导临床合理用药具有重要意义。丙戊酸分子式为C8H16O2，分子量为144.211，含有1个羧基官能团，分子结构中不含有紫外特征吸收基团，不能用紫外或其他特定检测器直接测定，比如HPLC-UV法。通常需要对样品进行衍生化预处理，操作过程复杂、周期较长，测定过程的影响因素较多，结果误差较大，对操作人员要求较高。丙戊酸在人体具有多代谢途径的特征，包括线粒体β-氧化途径、葡萄糖醛酸化、ω-氧化等途径，这导致丙戊酸在人体的代谢产物多达50种，主要代谢产物有2-丙基-4-五烯酸、3-羟基丙戊酸、5-羟基丙戊酸。这些化合物与丙戊酸的结构非常相似。免疫分析检测药物浓度时易与血液中相似的结构代谢产物发生交叉反应，从而产生假阳性的检测结果。而且接受单克隆抗体诊断或治疗的病人其样本中可能含有单抗，使用免疫法检测时往往出现假性升高或降低值；另外人血清中的异嗜性抗体可与免疫法中的免疫球蛋白发生反应干扰检测结果，使定量结果不准。目前应用于丙戊酸血药浓度测定的免疫法主要有酶放大免疫法(EMIT)，均相酶免疫法(HEIA)、化学发光免疫法(CLIA)、荧光偏振免疫法(FPIA)、胶乳凝集比浊法等。但免疫分析法准确度不足，特异性差，易与血液中其它相似结构代谢产物发生交叉反应。而且传统的检测模式患者必须去医院由专业医护人员抽血检测，过程繁琐，创伤大，血样需冷冻保存，增加了样本的保存难度和成本，不适合广泛开展。液质联用(LC-MS/MS)又叫液相色谱-质谱联用技术，它以液相色谱作为分离系统，质谱为检测系统。样品在液相部分和流动相分离，被离子化后，经质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器得到质谱图。液质联用体现了色谱和质谱优势的互补，将色谱对复杂样品的高分离能力，与MS具有高选择性、高灵敏度及能够提供相对分子质量与结构信息的优点结合起来，在药物分析、食品分析和环境分析等许多领域得到了广泛的应用。目前本领域还未有基于液相色谱-质谱联用技术的丙戊酸浓度测定试剂盒。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于，提供一种新型的丙戊酸药物浓度检测试剂盒，能够用于干血斑中丙戊酸药物浓度的检测，以解决现有技术中缺少基于色谱法的丙戊酸药物浓度检测试剂盒的技术问题，能够克服需要衍生化前处理、免疫分析检测定量结果不准、所需样品量较大、储藏和运输条件要求高、内源性干扰较大等缺陷。为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案为：一种干血斑中丙戊酸药物浓度的检测试剂盒，包含：盒体、第一容器、校准品卡和质控品卡，所述第一容器、校准品卡、质控品卡放置于所述盒体内；所述校准品卡为固定有一组丙戊酸干血斑样本作为干血斑校准点的血斑采集卡，所述干血斑校准点的数量为至少6个；所述质控品卡为固定有至少一组丙戊酸干血斑样本作为干血斑质控点的血斑采集卡，每一组干血斑质控点的数量为至少3个；所述第一容器内装有内标提取液。所述内标采用同位素取代的丙戊酸。所述内标提取液用于对干血斑样本进行提取。经提取得到的提取物用于进样检测分析。其中，同位素取代可以是C同位素取代、O同位素取代或H同位素取代的形式。较佳的，所述同位素取代的丙戊酸为氢同位素取代的丙戊酸。更佳的，所述同位素取代的丙戊酸为丙戊酸-D6。在一种优选的实施方式中，所述同位素取代的丙戊酸的浓度为0.01～10μg/mL。在一种优选的实施方式中，所述试剂盒具有可开启/关闭的盒盖，所述盒盖与盒体是相连接的或相互独立的。所述盒盖与盒体配合关闭时，使所述试剂盒保持密封状态。在一种优选的实施方式中，所述盒体内设置有固定板，所述固定板上设有第一容置空间；所述第一容置空间用于放置和固定第一容器。在一种优选的实施方式中，所述盒体内设置有固定板，所述固定板上还设有第二容置空间；所述第二容置空间用于放置和固定校准品卡和质控品卡。在一种优选的实施方式中，所述第一容置空间为设置于所述固定板上的凹陷，所述凹陷的形状与所述第一容器的整体或部分区域的外形相匹配。所述第一容器的整体或部分区域放置于所述凹陷内。在一种优选的实施方式中，所述第二容置空间呈矩形为设置于所述固定板上的凹槽，所述凹槽呈方形；所述校准品卡和质控品卡放入所述凹槽中。在一种优选的实施方式中，所述固定板为纸板、海绵块、泡沫块、塑料块或其中两者或两者以上的组合。在一种优选的实施方式中，所述固定板为可拆卸地固定在所述盒体的内部。在一种优选的实施方式中，所述第一容器为玻璃瓶、塑料瓶、或样品管。在一种优选的实施方式中，所述第一容器的体积为1～200ml；更优选为，10～100ml；更优选为，20～40ml。在一种优选的实施方式中，所述干血斑校准点为一组圆形斑点，是将已知浓度的丙戊酸校准品点制于采血卡上形成的丙戊酸干血斑样本。优选的，所述圆形斑点的直径为5～10mm。所述至少6个干血斑校准点分别具有不同浓度丙戊酸，所述干血斑校准点按照血斑中丙戊酸的浓度高低依次排列。在一种优选的实施方式中，各干血斑校准点的丙戊酸浓度梯度的浓度范围为5-150μg/mL。在一种优选的实施方式中，所述干血斑校准点的数量为至少7个。较佳的，所述干血斑校准点的数量为7个。在一种优选的实施方式中，所述7个干血斑校准点的丙戊酸浓度由低至高分别为5，10，20，40，80，100，150μg/mL。在一种优选的实施方式中，所述干血斑质控点为至少一组圆形斑点，是将已知浓度的丙戊酸质控品点制于采血卡上形成的丙戊酸干血斑样本。圆形斑点的直径优选为5～10mm。根据丙戊酸的浓度本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种干血斑中丙戊酸药物浓度的检测试剂盒，其特征在于，包括盒体、第一容器、校准品卡和质控品卡，所述第一容器、校准品卡、质控品卡放置于所述盒体内；/n所述校准品卡为固定有一组丙戊酸干血斑样本作为干血斑校准点的血斑采集卡，所述干血斑校准点的数量为至少6个；/n所述质控品卡为固定有至少一组丙戊酸干血斑样本作为干血斑质控点的血斑采集卡，每一组干血斑质控点的数量为至少3个；/n所述第一容器内装有内标提取液，所述内标采用同位素取代的丙戊酸。/n

【技术特征摘要】
1.一种干血斑中丙戊酸药物浓度的检测试剂盒，其特征在于，包括盒体、第一容器、校准品卡和质控品卡，所述第一容器、校准品卡、质控品卡放置于所述盒体内；
所述校准品卡为固定有一组丙戊酸干血斑样本作为干血斑校准点的血斑采集卡，所述干血斑校准点的数量为至少6个；
所述质控品卡为固定有至少一组丙戊酸干血斑样本作为干血斑质控点的血斑采集卡，每一组干血斑质控点的数量为至少3个；
所述第一容器内装有内标提取液，所述内标采用同位素取代的丙戊酸。


2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述盒体内设置有固定板，所述固定板上设有第一容置空间；所述第一容置空间用于容纳第一容器。


3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述固定板上还设有第二容置空间；所述第二容置空间用于容纳校准品卡及质控品卡。


4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述校准品卡中各干血斑校准点的丙戊酸浓度互不相同，所述各干血斑校准点按照血斑中丙戊酸的浓度大小依次排列；各干血斑校准点中丙戊酸浓度梯度的浓度范围为5-150μg/mL。


5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述干血斑校准点的数量为7个；7个干血斑校准点的丙戊酸浓度由低至高分别为5，10，20，40，80，100，150μg/mL。


6.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述质控品卡中，每一组干血斑质控点具有低浓度质控点、中浓度质控点和高浓度质控点三个干血斑质控点；其中，低浓度质控点中丙戊酸浓度为5～25μg/mL，中浓度质控点中丙戊酸浓度为40～100μg/mL，高浓度质控点中丙戊酸浓度为120～150μg/mL。


7.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述质控品卡中，每一组干血斑质控点还包括一个空白对照干血斑质控点，所述空白对照干血斑质控点为空白全血，其中不含有丙戊酸。


8.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述质控品卡具有两组干血斑质控点，每一组干血斑质控点均具有低浓度质控点、中浓度质控...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗稳，沈敏，李晓芳，
申请(专利权)人：苏州药明泽康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32