一类苯丙氨酸来源的细胞松弛素及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一类苯丙氨酸来源的细胞松弛素(cytochalasins)及其制备方法和应用。该类细胞松弛素类化合物的制备方法如下：将一株三尖杉(Cephalotaxus fortunei Hook.f)叶子中的内生真菌Xylaria sp.CFL5接种于大米培养基，待其生长3周后，切碎培养基，并用乙酸乙酯浸泡提取，减压浓缩得粗浸膏；该提取物用大孔树脂、硅胶及半制备的高效液相色谱柱分离，即得该类化合物。该类化合物对LAG3与MHC Ⅱ的结合及LAG3与FGL1的结合具有明显的抑制活性，进而抑制肿瘤细胞的免疫逃逸，所以该类化合物可能作为一种新型抗癌候选药物。

【技术实现步骤摘要】
一类苯丙氨酸来源的细胞松弛素及其制备方法和应用
本专利技术属于生物化工
,具体涉及一类苯丙氨酸来源的细胞松弛素及其制备方法和应用。
技术介绍
植物内生真菌因其与宿主植物长期共存，对于宿主植物的生长生存有着重要的作用，比如，保护植物免受昆虫、食草动物进食，促进植物生长，产生信号分子吸引昆虫、鸟类帮助授粉等。研究表明，这些作用的存在与植物内生真菌产生的天然产物有很大的相关性，有些内生真菌甚至可以产生与宿主植物相同或相似的代谢产物。因而对植物内生真菌及其代谢产物的研究可以探寻植物与内生真菌的协同进化关系，同时又是一个寻找有价值的天然产物的重要途径。三尖杉(CephalotaxusfortuneiHook.f)为我国特有树种，隶属于裸子植物三尖杉科(Cephalotaxaceae)三尖杉属(Cephalotaxus)。三尖杉属植物的主要活性成分是生物碱，如：三尖杉酯碱(harringtonin)和高三尖杉酯碱(homobarringtonie)。从该属植物的根、树皮、种子等部位中提取的多种生物碱被临床证明具有抗癌作用，特别是在白血病治疗方本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一类抗肿瘤药物的制备方法，其特征在于，选用一类苯丙氨酸来源细胞松弛素类化合物作为主原料,其结构式如式(Ⅰ)为：/n

【技术特征摘要】
1.一类抗肿瘤药物的制备方法，其特征在于，选用一类苯丙氨酸来源细胞松弛素类化合物作为主原料,其结构式如式(Ⅰ)为：





2.根据权利要求1所述的一类抗肿瘤药物的制备方法，其特征在于，所述苯丙氨酸来源细胞松弛素类化合物是从三尖杉叶子内生真菌Xylariasp.CFL5发酵提取物中获得的。


3.根据权利要求1所述的一类抗肿瘤药物的制备方法，其特征在于，制备方法为：将真菌三尖杉叶子内生真菌接种于培养基，待其生长2–5周后，切碎培养基，并用乙酸乙酯浸泡提取，减压浓缩得粗浸膏；该提取物用大孔树脂、硅胶及半制备的高效液相色谱柱分离，即得该类化合物。


4.根据权利要求3所述的一类抗肿瘤药物的制备方法，其特征在于，制备步骤如下：
S1、将真菌三尖杉叶子内生真菌接种于YMG培养基，140rpm，28℃培养5天，得到种子液。之后将其按每瓶10mL接种量加入大米培养基，于28℃恒温培养3周。
S2、待发酵结束，切碎培养基。使用EtOAc室温浸提5次，减压蒸馏除去溶剂，从而获得粗浸膏。
S3、使用大孔树脂对该粗浸膏进行分段，用30％,50％,80％,95％EtOH作为流动相梯度洗脱，获得4个组分Fr.1–4，依次对应为30％,50％,80％,95％EtOH洗脱相。
S4、Fr.3使用正相硅胶柱进行分段，流动相为石油醚/乙酸乙酯的混合溶剂梯度洗脱，体积比依次为10:1，5:1，2:1，1:1，1:2，通过TLC检测，将相似的样品进行合并，得到7个组分Fr.3A–3G，Fr.3A对应10：1，Fr.3B对应5：1，Fr.3C和Fr.3D对应2：1，Fr.3E对应1：1，Fr.3F对应1：2，Fr.3G对应样品部位。
S5、Fr.3B使用HPLC，其中MeCN/H2O＝7:3,v/v；进行分离，得到了化合物Xs-1(XylariasinA)，tR＝30min。
S6...

【专利技术属性】
技术研发人员：高坤，马凯亮，李亚，刘珍伶，
申请(专利权)人：兰州大学，
类型：发明
国别省市：甘肃;62