试剂层的超声直接固定及其制备剥离型试件的方法技术

一种制备用于测定液体样品中特定成分的干分析的剥离型试件的方法，该试件包括一个其上具有一个试剂层和一个可脱落膜层的衬底板，所述试剂层是用试剂浸透的多孔基质，而所述可脱落膜层具有滤出粒子的作用，在施加样品之后剥下所述可脱落膜层以观察试剂层的显色，所述制备方法包括如下步骤：　　　　使试剂层和膜层彼此接触按该次序叠置在衬底板上并从衬底板一侧施加超声振动；　　　　施加压力以使熔化层的表面粘着一相邻非熔化层的表面上或使熔化层的表面材料与相邻层的表面合为一体；以及　　　　取消超声振动和压力。（*该技术在2016年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种在用于测定液体样品中特定成分的干分析试剂盒的制备中将一试剂层固定到衬底上的方法。这种试剂盒通常用于诸如尿液分析、血清分析、全血分析以及免疫测定这些临床检验领域中。本专利技术还涉及一种制备剥离型试件的方法，该试件是一种用于测定全血中特定成分的干分析试剂盒，通常用于临床检验领域的全血分析中。在临床检验领域中，体液(例如血液、尿液、唾液、脑脊髓液等)中各种成分的分析有助于诊断许多疾病或对疗效进行客观判断。这些分析的一般方法是一种叫做湿化学的方法，在这种方法中首先将体液(样品)和试液放入一个测定池中并搅拌，然后在37℃下将测定池保温一段给定的时间，最后用吸收光度计、荧光光度计、浊度计等测定由样品的特定成分的反应所生成的物质。另一方面，研究出一种叫做干化学的分析方法。这种方法的优点在于试剂以干态形式提供，在分析中试剂的制备不是完全必需的，无需搅拌，无废液出现，并且非常少量的样品就足够分析许多项目。利用干化学可在医院的急救室、夜间医院的护士办公室、或医生办公室中进行即时检验。干化学中所用的干分析试剂盒通常包括一试剂层和一个衬底板。可如下制备试剂层，即将能与样品中的某种成分反应的试剂渗入一种多孔基质(例如纸、布、无纺布、筛网、膜滤纸、多孔状淀土和陶瓷)中，然后干燥，或者将试剂与一种溶剂捏和的聚合物粘合剂的混合物施加到一薄树脂膜上，然后干燥。当如此利用切成条的试剂层，即利用诸如酶、底物或颜色生成物这些昂贵试剂时，使用有效面积大的试条是不经济的，会导致成本大幅度上升。因此，考虑到可进行目视比色法的尺寸、反射光度法中所用的光束直径、测定值的准确性以及在制备或使用中易于操作，将试剂层切成4至10mm的正方形或长方形。用粘合剂例如双面粘合带、糊状粘合剂或瞬时粘合剂或热熔树脂将切割后的试剂层固定到作为底层或把手的基底上。而且，在某些情况下利用的用于干化学的干分析试剂盒的所谓剥离型试件包括一个其上依次具有一个试剂层和一个具有样品测定功能的可脱落膜层的基底。在使用时，将样品施加到剥离型试件上之后，剥开膜层以便观察试剂层的显色。更具体地说，能够滤出全血的微粒和测出到达试剂层的适当量样品的膜层被叠加在由用试剂浸透的热塑性树脂或非热塑性物质基质制成的试剂层上。当使用这种类型的干分析试剂盒时，将样品(全血)施加到膜层上，微粒和过量血液被擦离膜层的表面，并且剥开膜层，暴露出试剂层以便观察试剂层的显色程度。在某些情况下，不用擦试即可剥开膜层。如上所述，将试剂层直接固定到基底上的最常用的方法是用双面粘合带进行固定。然而，双面粘合带通常使用聚丙烯树脂，并且含有不是少量的聚合引发剂、单体、稳定剂、增塑剂和湿润剂。这些成分在与试剂层接触时趋于和试剂层中的试剂发生反应导致活性组分的显色或分解。因此，对于每个项目需要严格选择双面粘合带。而且，用双面粘合带固定具有如此缺陷，即粘合剂与处理机粘附会导致机器故障，而与试剂层表面粘附会使部分试剂层不与样品反应，从而导致颜色形成不均。为了消除这些与双面粘合带有关的缺陷，可用热熔性粘合剂(含有在80-150℃软化的热塑性树脂的粘合剂)进行固定。然而，在这种情况下，整个试剂层必须在100-110℃下保持几秒钟以便熔化热熔性粘合剂，这会导致试剂，特别是蛋白质(例如酶、抗体和抗原)的变性。另外，热熔性粘合剂与双面粘合带类似，含有增塑剂、稳定剂及其类似物质，这些组分对试剂具有不良影响。正如JP-B-53-6551(如此所用的“JP-B”一词意指“被审查过的公开日本专利申请)中所公开的，业已提出一种包括将试剂层封闭到织物或棉网中并用热熔性粘合剂熔融胶合封皮两边的方法”作为这些显著问题的解决方案。这个包括将试剂层封闭到尼龙网中并用热熔性粘合剂胶合其两边的方法成功地解决了上述两个问题。然而，在运输过程中由于震动尼龙网变得松驰，结果导致试剂层趋于移动或脱落。另外，这种方法烦琐且昂贵。JP-B-6-68488中公开了一种用于检测的组合物的制备方法，该法包括将一个热塑性树脂层插入试剂层和基底之间并借助激光束或超声波切割薄层以便通过熔融固定切割区域。这种技术可制备用于干分析的多层试剂盒，而无需用粘合剂。然而，所制备的试剂盒是夹紧作为把手的支杆才能被拿起或者在使用时放到一个平台上的类型。而且，被激光束或超声波切下的边缘浪费了。另外，需要产生用于切割叠层的足够能量的激光束或超声波的机器，而这种机器通常是昂贵的。特别是，此处被固定到基底上的试剂层是玻璃纤维滤纸等，它可将用于利用免疫反应(所谓干免疫测定法)的微分析中的抗体、抗原、抗体-抗生物素蛋白-生物素复合物等化学胶合到其上，因此使用双面粘合带或热熔性粘合剂不仅会导致上述问题而且会引起其它问题，即未反应成分或影响反应的物质被非特异性吸咐到玻璃纤维滤纸上，从而导致大的误差。而且，由于剥离型试件至少包括三层，因此制备过程因为涉及到两个步骤而变得烦琐；其中一个步骤是用于将第一层粘附到第二层上，其次一个步骤是用于将第三层粘附到第二层上。另外，在去除膜层时，必需在膜层和试剂层之间进行剥离。在基底和试剂层之间的交界面对试件进行剥离是相当不便的。考虑到这一点，试剂层和基底之间的粘着强度应该大于试剂层和膜层之间的粘着强度(此后称作“层间剥离强度”)。而使两个粘合交界面之间的层间剥离强度有差异是相当烦琐的。可一次层叠粘附三层，同时利用两种粘合剂使两个粘合交界面之间的层间剥离强度有差异。然而，如上所述，粘合剂中所用的成分趋于对试剂层中的试剂会有不良影响。因此，使用粘合剂是不受欢迎的。因此需要开发一种用于制备剥离型试件的理想方法，利用这种方法不用粘合剂就可一次固定三层，同时还能使层间剥离胶合强度有差异。业已发现可如下解决干分析试剂盒制备中的上述问题可利用热塑性树脂作为试剂层和衬底板之一或两者的材料，并且从外部将超声振动和压力施加到试剂层与衬底板的组合体上以便产生摩擦热。本专利技术所用的超声波熔融技术具有如下优点与由粘合剂进行的粘着不同，构成一个或几个层的热塑性树脂是由超声波产生的摩擦热进行熔融和固定的。因此，试剂层中的试剂不会受到粘合剂中存在的增塑剂或溶剂的影响。由于热量是在层的表面瞬时产生并迅速减少的，因此试剂层中的试剂不会变性。此方法是经济的；因为将试剂层和基底直接固定到一起，从而无需切掉边缘。由于本专利技术所用的超声振动直接被传送到试剂层，因此使用的超声波发生器相对便宜些。在由若干热塑性树脂层或热塑性树脂层和非热塑性多孔层的组合构成的层状物从其一侧受到超声破碎，从而导致超声熔融的情况下，本专利技术的专利技术人业已发现，在比较各界面间的层间剥离胶合强度时，界面离施加有超声波的那一侧越近，层间剥离强度就越大。正是通过将这个原理应用到剥离型试件的制备中来完成本专利技术的。当借助产生热量并将热量直接传送到几个层中的装置一次熔融胶合三个层时，虽然离施加有热量的那一侧较近的界面能够被固定，但是就热量传导而论要想固定离那一侧较远的界面是困难的。即使可以固定较远的界面，较近的界面到那时也将会被较大的热量损坏，并且试剂将完成失去活性。相反，根据本专利技术的方法，热量不是直接而是间接被传到几个层中。即，超声振动被传送到几个层中以便产生摩擦热。这样，就不会出现上述问题。因此，本专利技术提供了一种相当新的制备干分析试剂盒和剥离本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：太田实，高桥好范，樋口善彦，辻井尚，
申请(专利权)人：爱科来株式会社，
类型：发明
国别省市：