胱氨酸结折迭蛋白质制造技术

本发明专利技术涉及新型蛋白质（ＩＮＳＰ００２），它经本发明专利技术鉴定为一种分泌性蛋白质，是胱氨酸结折迭细胞因子超家族的Ｄａｎ家族成员，以及涉及该蛋白质和来自编码基因的核酸序列在诊断、预防和治疗疾病中的应用。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及新型蛋白质(INSP002)，经本专利技术鉴定为一种分泌性蛋白质，它是胱氨酸结折迭细胞因子超家族的Dan家族的成员，以及涉及该蛋白质和来自编码基因的核酸序列在诊断、预防和治疗疾病中的应用。本文所引用的出版物、专利和专利申请，均纳入其全文作为参考。
技术介绍
目前，药物发现方法正蕴酿着一场根本革命，因为功能基因组学年代已经来临。术语“功能基因组学”应用于使用生物信息学工具将功能归因于感兴趣的蛋白质序列的方法。这些工具正日益显示其必要性，因为序列数据产生的速度远远高于研究实验室将功能划分给这些蛋白质序列的能力。随着生物信息学工具的功效和准确性提高，这些工具正快速取代生物化学特性鉴定的常规技术。事实上，鉴定本专利技术所用的先进生物信息学工具现在能够输出可获得较高置信度的结果。各所研究院和商业机构正在检查已有的序列数据，并且逐渐获得重大发现。然而，仍然有必要鉴定和特性分析其他基因和它们编码的多肽，作为研究和药物发现的目标。分泌性蛋白质的背景细胞制造和分泌胞外蛋白质的能力是许多生物过程的中心。通过分泌小泡与质膜融合，酶、生长因子、胞外基质蛋白和信号传导分子全部由细胞分泌出来。多数情况下，但不是所有情况，蛋白质被信号肽导入内质网，并进入分泌小泡。信号肽是顺式作用序列，影响多肽链从细胞质转运至膜结合室如分泌小泡。靶向分泌小泡的多肽或者分泌进入胞外基质，或者留在质膜内。留在质膜内的多肽有一或多个跨膜结构域。在细胞机能中发挥中心作用的分泌性蛋白质的例子是细胞因子、激素、胞外基质蛋白(粘附分子)、蛋白酶及生长和分化因子。生长因子代表相对较大的一组均有在体内外诱导细胞增殖的性质的多肽。生长因子有两方面与诸如胰岛素或生长激素等典型内分泌激素不同。首先，内分泌激素通常在专有腺体内合成(例如胰岛素在胰腺内合成)，而生长因子一般在多种类型的细胞和组织内合成。其次，典型内分泌激素在合成位点释放进入体液，被血流带到它们的靶组织。在多数情形下，生长因子的特点是它们在被合成的组织内局部地发挥作用(综述参见Heath，JK.(1993)Growth Factors，Oxford University Press，Oxford，UK，pp.15-33)。虽然生长因子之间序列相似性的水平不高，但根据结构和功能相似性可将它们分成超家族。这些超家族的例子包括(a)造血生长因子，例如生长激素、IL-2、IL-4、G-CSF和CNTF，它们全部都具有四螺旋束结构基序；(b)β-三叶家族成员，例如IL-1β、IL-1α、FGF和角化细胞生长因子；(c)EGF-样生长因子，例如EGF和TGFα，它们全部都有免疫球蛋白样结构域；和(d)胱氨酸结生长因子折迭，包括NGF、TGFβ、PDGF和糖蛋白激素。生长因子位于细胞外，为了发挥生物作用，它们与位于靶细胞质膜上的特异性高亲和力受体相互作用。很多不同生长因子受体的分子特性揭示，它们属于限定家族酪氨酸激酶受体、G-蛋白相关的7次跨膜受体，和丝氨酸/苏氨酸激酶受体。酪氨酸激酶受体的特点在于具有酪氨酸激酶活性的胞外结构域、跨膜结构域和胞内结构域。丝氨酸/苏氨酸激酶生长因子受体与带有胞外结构域、跨膜结构域和胞内结构域的酪氨酸激酶受体相似。胞内结构域具有内在丝氨酸/苏氨酸激酶活性。生长因子的反调节暗示各种疾病状态，包括但不限于肿瘤疾病(BartucciM等，(2001)Cancer Res.Sep 15；61(18)6747-54，Dias S等，(2001)Proc NatlAcad Sci USA.Sep 11；98(19)10857-62，Djavan B等，(2001)World J Urol.19(4)225-33)、炎症疾病(Fiocchi C.(2001)J Clin Invest.Aug；108(4)523-6，Hodge S等，(2001)Respirology.Sep；6(3)205-211，Fenwick SA等，(2001)JAnat.Sep；199(Pt 3)231-40)、神经系统疾病(Cooper JD等，(2001)Proc NatlAcad Sci USA 98(18)10439-44，Fahnestock M等，(2001)Mol Cell Neurosci18(2)210-20)和代谢疾病(Vickers MH等，(2001)Endocrinology.142(9)3964-73)。胱氨酸结折迭超家族胱氨酸结超家族中看到的典型结构基于6个胱氨酸的存在，建立3个二硫键。其中两个二硫键建立“环状”结构，第3个二硫键贯穿其中(Sun等，1995)。通常发现胱氨酸结结构域有6个以上胱氨酸残基。附加胱氨酸残基正常情况下用于二聚作用过程中建立胱氨酸结结构域内其他二硫键或链间二硫键。将该胱氨酸结超家族分为亚家族，包括糖蛋白激素(例如卵泡刺激素)、转化生长因子β(TGFβ)蛋白(例如骨形态生成蛋白4)、血小板分泌的生长因子样(PDGF-样)蛋白(例如血小板分泌的生长因子A)、神经生长因子(NGF)(例如脑分泌的神经营养因子)和成神经细胞瘤中差异筛选选择的基因畸变(DAN)家族(例如cerberus)。DAN亚家族包括Cerl、Cerberus、Caronte、Drm/Gremlin、PRDC、DAN、Dante和CeCanl(Massague等，Genes Dev 2000 Mar 15；14(6)627-44；Massague & Wotton，EMBO J.2000 Apr 17；19(8)1745-54)。一般认为，DAN亚家族成员能够调节蛋白质TGFβ亚家族成员的作用(Pearce等，Dev Biol.1999 May 1；209(1)98-110)。更具体地说，DAN亚家族成员在发育期间能够调节骨形态生成蛋白(BMP)的作用是可能的。业已发现，DAN亚家族成员是骨形态生成蛋白(BMP)的拮抗剂，而骨形态生成蛋白是胱氨酸结超家族的TGFβ亚家族成员(Stanley等，Mech Dev.1998Oct；77(2)173-84；Massague等，2000(见上)；Massague J&Wotton D，2002(见上)。BMP单体在与细胞表面受体相互作用之前，通过它们的胱氨酸结结构域结合而发生同源或异源二聚化。一般认为，DAN亚家族成员通过它们各自的胱氨酸结结构域能够与BMP结合。这防止BMP与它的天然二聚配偶子结合，结果是BMP不能再与它的细胞表面信号传导受体相互作用。特别针对DAN、Cerl和DRM进行的实验已经显示，它们抑制BMP4的作用(Pearce等，1999，(见上))。因为结合研究的结果，使得对cerberus功能的理解加深(Piccolo S.等，Nature.1999 Feb 25；397(6721)707-10)。首次对cerberus进行的功能研究使用了非洲爪蟾cerberus蛋白(cer)。将非洲爪蟾cerberus mRNA微量注入非洲爪蟾胚胎中，结果发现cer蛋白诱导Spemann’s组织者的前内胚层中形成异位头(ectopic head)(Bouwmeester等，Nature 1996 Aug 15；382(本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多肽，其特征在于：所述多肽（ｉ）包括ＳＥＱＩＤＮＯ：６或者ＳＥＱＩＤＮＯ：８所示的氨基酸序列；（ｉｉ）是其具有分泌性蛋白质的功能，优选具有胱氨酸结折迭细胞因子超家族成员的功能，更好具有ＤＡＮ亚家族成员的功 能，或者具有与（ｉ）的多肽相同的抗原决定簇的片段；或者（ｉｉｉ）是（ｉ）或（ｉｉ）的功能等同物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：MD戴维斯，CB菲尔普斯，RJ法根，C包尔，M优克，M伊伯森，
申请(专利权)人：阿雷斯贸易股份有限公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]