一种(3R，4R)-N，4-二甲基-1-(苯基甲基)-3-哌啶胺盐的分析方法技术

本发明专利技术涉及一种(3R，4R)‑N，4‑二甲基‑1‑(苯基甲基)‑3‑哌啶胺盐酸盐异构体的液相色谱分析方法。包括下列步骤：(1)用乙腈溶解乙酰葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)配制衍生化试液；(2)精密量取本品与衍生化试液配制成供试液；(3)配制系统适应性溶液；(4)采用高效液相色谱，对(3R，4R)‑N，4‑二甲基‑1‑(苯基甲基)‑3‑哌啶胺盐酸盐进行对映异构体检查，以控制产品质量。该方法用一种衍生化高效液相色谱方法能科学、有效、便捷的对其对映异构体进行质量控制，专属性强，灵敏度高。其技术领域属于药物的分析方法。

【技术实现步骤摘要】
一种(3R，4R)-N，4-二甲基-1-(苯基甲基)-3-哌啶胺盐的分析方法
本专利技术涉及一种(3R，4R)-N，4-二甲基-1-(苯基甲基)-3-哌啶胺盐酸盐异构体的液相色谱分析方法，该方法专属性强，灵敏度高，对其质量控制具有良好作用。其
属于药物的分析方法。
技术介绍
(3R，4R)-N，4-二甲基-1-(苯基甲基)-3-哌啶胺盐酸盐是枸橼酸托法替布合成的重要起始物料。为生产质量优良的成品枸橼酸托法替布，需对本品质量进行严格控制。本品分子结构如下：本品含有手性碳，存在非对映异构体与对映异构体杂质，非对映异构体杂质采用常规有关物质方法可进行分离并检测，对映异构体在普通色谱柱有关物质条件下，与主成分完全重合，故需采用手性色谱柱或其他方法进行分离。本品可采用手性色谱柱(ChiralpakAGP)进行分离，但此色谱柱柱效较低，对于较低的杂质量检出有限，同时该色谱柱使用寿命较短，不利于日常生产监控。故我们对本品进行衍生后，采用普通C8或C18色谱柱进行测定，其灵敏度高，专属性强，准确度良好。
技术实现思路
本专利技术提供了一种(3R，4R)-N，4-二甲基-1-(苯基甲基)-3-哌啶胺盐酸盐对映异构体测定的液相色谱分析方法，该方法表现为用一种衍生化高效液相色谱方法能科学、有效、便捷的对其对映异构体进行质量控制。本专利技术的技术方案为：1、衍生化试液的配制精密称取乙酰葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)适量，用乙腈溶解并稀释制成每1ml中约含4.0mg的溶液。2、供试品溶液的配制取本品约16mg，精密称定，置20ml量瓶中，加溶剂(含0.2％三乙胺的乙腈溶液)溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品贮备液。精密量取1ml与衍生化试液1ml，混匀，放置40分钟，作为供试品溶液。3、系统适用性溶液的配制精密称取对映异构体约2mg，置50ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，作为杂质贮备液；精密称取本品16mg，置20ml量瓶中，加入杂质贮备液2ml，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性贮备液；精密量取系统适用性贮备液1ml与衍生化试液1ml，摇匀，放置40分钟，作为系统适用性溶液。步骤1-3所述的适宜溶剂为0.1％-0.3％三乙胺的乙腈溶液。4、测定将步骤1-3的溶液使用不同极性的色谱柱，在柱温20-40℃，流动相流速为0.8-1.0ml/min的检测条件下，采用梯度洗脱，在202nm-212nm波长处对本品进行对映异构体测定。所述的不同极性的色谱柱为C18柱或C8柱；所述的有机溶剂为乙腈；所述的水相为0.01mol/L-0.05mol/L的磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值至3.8)；所述的梯度洗脱程序为线性梯度洗脱。溶剂为三乙胺与乙腈混合溶剂；溶剂比例为0.1％-0.3％三乙胺的乙腈溶液。采用该高效液相色谱条件，能有效地对(3R，4R)-N，4-二甲基-1-(苯基甲基)-3-哌啶胺盐酸盐进行对映异构体检查，以控制产品质量。附图说明图1为对映异构体的液相色谱图图2为系统适用性的液相色谱图图3为供试品溶液的液相色谱图图4为供试品溶液的液相色谱图图5为供试品溶液的液相色谱图图6为供试品溶液的液相色谱图图7为供试品溶液的液相色谱图具体实施例下面的实施例，对本专利技术加以详细说明，但本专利技术不限于这些实施例。实施例1以0.01mol/L磷酸二氢钾(用磷酸调pH值为3.8)为流动相A；流动相B为乙腈。色谱柱为C18柱；检测波长为207nm，柱温30℃；流速为1.0ml/min。梯度洗脱程序如下：精密量取系统适用性溶液5μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。主成分与对映异构体的分离度应符合要求。再精密量取空白溶液、对映异构体溶液、供试品溶液5μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。按面积归一化法计算(见图1-图3)实施例2以0.03mol/L磷酸二氢钾(用磷酸调pH值为3.8)为流动相A；流动相B为乙腈。色谱柱为C8柱；检测波长为207nm，柱温30℃；流速为1.0ml/min。梯度洗脱程序如下：精密量取供试品溶液5μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。(见图4)实施例3以0.01mol/L磷酸二氢钾(用磷酸调pH值为3.8)为流动相A；流动相B为乙腈。色谱柱为C18柱；检测波长为207nm，柱温35℃；流速为0.8ml/min。梯度洗脱程序如下：精密量取供试品溶液5μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。(见图5)实施例4以0.02mol/L磷酸二氢钾(用磷酸调pH值为3.8)为流动相A；流动相B为乙腈。色谱柱为C8柱；检测波长为207nm，柱温30℃；流速为0.9ml/min。梯度洗脱程序如下：精密量取供试品溶液5μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。(见图6)实施例5以0.01mol/L磷酸二氢钾(用磷酸调pH值为3.8)为流动相A；流动相B为乙腈。色谱柱为C18柱；检测波长为212nm，柱温25℃；流速为1.0ml/min。梯度洗脱程序如下：精密量取供试品溶液5μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。(见图7)本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种枸橼酸托法替布起始物料(3R，4R)-N，4-二甲基-1-(苯基甲基)-3-哌啶胺盐酸盐的液相色谱分析方法，其特征在于能有效的对其进行光学异构体测定，其技术方案为：使用常用衍生化试剂与不同极性色谱柱，在柱温20-40℃，流动相流速为0.8-1.0ml/min的检测条件下，采用线性梯度程序洗脱，以紫外检测器不同波长进行测定。/n

【技术特征摘要】
1.一种枸橼酸托法替布起始物料(3R，4R)-N，4-二甲基-1-(苯基甲基)-3-哌啶胺盐酸盐的液相色谱分析方法，其特征在于能有效的对其进行光学异构体测定，其技术方案为：使用常用衍生化试剂与不同极性色谱柱，在柱温20-40℃，流动相流速为0.8-1.0ml/min的检测条件下，采用线性梯度程序洗脱，以紫外检测器不同波长进行测定。


2.根据权利要求1所述的液相色谱方法，其特征在于所述的不同极性的色谱柱为C18柱或C8柱。


3.根据权利要求1所述的液相方法，其特征在于所述的流动相为磷酸盐缓冲液和有机溶剂。


4.根据权利要求1所述的液相方法，其特征在于所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：李敬芝，徐静，孙月静，
申请(专利权)人：南京格亚医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32