一种马立克氏病病毒血清3型荧光定量PCR试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种检测马立克氏病病毒血清3型毒株的荧光定量PCR试剂盒及其在禽用生物制品质量控制中的应用。所述试剂盒含有用于检测马立克氏病病毒血清3型毒株一对特异性引物和相应的Taqman探针。本发明专利技术特异性好，马立克氏病病毒血清3型毒株扩增曲线良好，禽用病毒类生物制品及生产原材料未出现特异性扩增曲线；敏感性高，用本发明专利技术建立的方法检测不同PFU的Fc126毒株，检出限度为0.06PFU；检测10倍梯度稀释的标准品质粒，检出限度为10copies/μL；可用于禽用生物制品中外源性马立克氏病病毒的检测，对于马立克氏病病毒的检测、禽用生物制品质量控制等具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一种马立克氏病病毒血清3型荧光定量PCR试剂盒及其应用
本专利技术涉及一种马立克氏病病毒(Marker’sdiseasevirus,MDV)血清3型荧光定量PCR试剂盒及其在生物制品质量控制中的应用，属于生物技术和动物病毒学领域。
技术介绍
马立克氏病(Marker’sdisease,MD)是鸡的一种急性或亚急性淋巴细胞增生性疾病，主要表现为外周神经、皮肤、虹膜及其他组织器官出现单核细胞浸润。该病的病原马立克氏病病毒(Marker’sdiseasevirus,MDV)属于α疱疹病毒亚类的Mardivirus属，根据病毒的血清学反应，分为3个血清型，即MDV血清1型(禽疱疹病毒2型)、MDV血清2型(禽疱疹病毒3型)和MDV血清3型(火鸡疱疹病毒1型)。与其它疱疹病毒相比，禽疱疹病毒最显著的特性是细胞结合性，即在细胞培养上不产生游离于细胞培养液中有感染性的病毒粒子(特别是MDV血清1型毒株)。基于MDV的生物学特性，现有外源性MDV检验方法主要是通过鸡胚法观察尿囊膜病变、细胞法检查细胞病变、鸡检查法通过琼脂扩散实验测定抗体。但随着兽用生物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种马立克氏病病毒血清3型荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包含两条特异性引物和相应的Taqman探针，qPCR Buffer(2×)、酶、标准品质粒、阳性提取对照品、阴性提取对照品、无酶水；/n所述的特异性引物和相应的Taqman探针，其序列分别为：/n序列1上游引物(Fc126-UL19-F)：5′-gcgatcactg tcgccttcta-3′20/n序列2下游引物(Fc126-UL19-R)：5′-agtaacggct gtggtcatgg-3′20/n序列3Taqman探针(Fc126-UL19-P)：5′-FAM-tgtaacgagc gacgtcgtcca-BH...

【技术特征摘要】
1.一种马立克氏病病毒血清3型荧光定量PCR试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包含两条特异性引物和相应的Taqman探针，qPCRBuffer(2×)、酶、标准品质粒、阳性提取对照品、阴性提取对照品、无酶水；
所述的特异性引物和相应的Taqman探针，其序列分别为：
序列1上游引物(Fc126-UL19-F)：5′-gcgatcactgtcgccttcta-3′20
序列2下游引物(Fc126-UL19-R)：5′-agtaacggctgtggtcatgg-3′20
序列3Taqman探针(Fc126-UL19-P)：5′-FAM-tgtaacgagcgacgtcgtcca-BHQ1-3′21；
所述标准品质粒为所述引物从Fc126毒株血清3型马立克氏病病毒上扩增目的片段连接到pEASY-Blunt载体得到的；
所述阳性提取对照品为10PFU灭活的血清3型Fc126毒株马立克氏病病毒；
所述阴性提取对照品为SPF鸡胚尿囊液。


2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于荧光定量P...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏佳，陈晓春，赵炜，王嘉，侯力丹，刘丹，曹明慧，薛青红，
申请(专利权)人：中国兽医药品监察所，
类型：发明
国别省市：北京;11